Une méthode d'infliger Fermé chef Traumatic Brain Injury dans Drosophila

L’objectif global de cette procédure est d’infliger un traumatisme crânien fermé. Chez les mouches. Pour ce faire, il suffit de placer d’abord les mouches dans une fiole à un pouce du fond.

La deuxième étape consiste à fixer le flacon à l’appareil HIIT. Ensuite, le ressort est dévié à un angle particulier et le flacon est libéré et laissé au repos complet. En fin de compte, une variété d’essais morphologiques et moléculaires comportementaux peuvent être utilisés pour caractériser les conséquences de la lésion cérébrale traumatique qui en résulte.

Le principal avantage de cette méthode par rapport aux méthodes existantes, telles que la méthode de perte de poids chez les rongeurs, est que de nombreux animaux peuvent être étudiés sur une courte période de temps. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine des lésions cérébrales traumatiques, telles que pourquoi les conséquences d’une lésion cérébrale traumatique varient d’une personne à l’autre. Pour commencer, assemblez les matières premières énumérées dans le tableau un du protocole de texte d’accompagnement.

Pliez les pinces à l’aide d’une paire de pinces de manière à ce qu’elles s’adaptent parfaitement au ressort. Ensuite, centrez les pinces par rapport à la largeur de la planche et fixez-les les unes contre les autres avec la pince extérieure au ras du bord de la planche. Ajustez le ressort de manière à ce qu’il soit parallèle à la longueur de la planche, puis fixez les pinces sur le ressort et sur la planche à l’aide de quatre vis.

Ensuite, enroulez une bande de ruban adhésif Velcro. Une fois autour de l’extrémité libre du ressort, le bord extérieur du velcro doit affleurer l’extrémité du ressort. Placez le couvercle du seau à glace à l’envers, centré et serré contre la planche de bois.

Orientez la région en relief du couvercle du seau à glace de manière à ce que le bord long soit parallèle à la largeur de la planche. Faites glisser l’ensemble de l’appareil contre un objet fixe tel qu’un mur afin que le couvercle du seau à glace soit coincé entre la planche et l’objet et ne bouge pas. Collez ensuite le rapporteur de papier au fond d’un plateau en carton, d’un plateau de flacon et placez-le sur le bord contre la longueur du panneau de sorte que la marque de 90 degrés soit alignée avec le ressort.

Lorsqu’il est ramené à une position parfaitement verticale, placez entre une et 60 mouches anesthésiées au dioxyde de carbone dans un flacon vide et bouchez le flacon à l’aide d’une boule de coton bien ajustée. Ensuite, tracez une ligne sur la fiole à un pouce de sa base, renversez les mouches des côtés de la fiole et enfoncez la boule de coton jusqu’à ce qu’elle corresponde à une ligne nouvellement tracée. Attendez cinq minutes que les mouches récupèrent leur mobilité grâce au dioxyde de carbone.

Ensuite, insérez l’extrémité du ressort dans le flacon jusqu’à ce que le bord intérieur du velcro affleure le haut du flacon. Cela permet de fixer le flacon au ressort en créant un raccord de compression serré avec le ressort à plat. Assurez-vous qu’un pouce de la fiole chevauche la région surélevée du couvercle du seau à glace à ce moment-là.

Mettez une protection auditive car l’impact de la fiole contre le couvercle du seau à glace produit un bruit fort. Ensuite, tenez la fiole au niveau du velcro à l’aide du pouce et de l’index de la main gauche avec la main droite, tenez la planche fermement contre le dessus du banc. Ensuite, tirez le ressort parfaitement droit vers l’arrière à l’angle souhaité, puis relâchez le ressort.

Attendez que le ressort s’arrête complètement, puis retirez le flacon du ressort. Placez le flacon sur le paillasse et laissez les mouches récupérer pendant au moins cinq minutes. Pendant ce temps, les mouches retrouveront lentement leur mouvement normal.

Ensuite, transférez les mouches dans un flacon avec de la nourriture pour mouches pour une analyse ultérieure ou soumettez les mouches à une autre frappe, les flacons peuvent être réutilisés plusieurs fois. Le but de l’expérience était de déterminer l’effet de la gravité des blessures sur l’indice de mortalité à 24 heures. La gravité du traumatisme a été déterminée par l’angle de déviation du ressort de zéro à 90 degrés avant le relâchement.

L’expérience a été réalisée sur des mouches de deux âges différents, des mouches âgées de zéro à sept jours et des mouches âgées de 20 à 27 jours. Les résultats montrent que les blessures plus graves entraînent un indice de mortalité plus élevé. Les mouches plus âgées avaient un indice de mortalité plus élevé par rapport aux mouches plus jeunes lorsque la déviation printanière était de 50 degrés ou plus.

Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon d’infliger des lésions cérébrales traumatiques à l’aide de mouches.