October 22nd, 2015
Ici, nous présentons un protocole pour induire l’anorexie basée sur l’activité (ABA) chez des souris adolescentes. L’ABA est un état d’hyperactivité évoqué par l’imposition d’une restriction alimentaire aux rongeurs ayant accès à une roue de course. Ce phénomène est utilisé comme modèle pour étudier la neurobiologie sous-jacente de l’anorexie mentale.
L’objectif global de cette procédure est d’induire une anorexie basée sur l’activité chez les souris femelles adolescentes. Pour ce faire, les souris doivent d’abord être introduites dans une roue de course et, pendant au moins trois jours, surveiller en permanence l’activité de leur roue de course. Ensuite, les M sont soumis à un horaire restreint d’accès à la nourriture et les changements dans leur course volontaire des roues sont enregistrés.
En fin de compte, ce modèle d’anorexie basé sur l’activité peut montrer que les changements neurobiologiques sont associés à des changements dans le comportement d’un animal lorsqu’il a un accès restreint à la nourriture. J’espère que ce modèle d’anorexie basée sur l’activité contribuera à améliorer le traitement de l’anorexie mentale, car il identifiera des différences individuelles discrètes dans la neurochimie et la neuroanatomie qui sous-tendent la résilience et la vulnérabilité à l’anorexie mentale. Bien que cette méthode puisse donner un aperçu de l’anorexie mentale, elle peut également être appliquée à d’autres maladies qui ont une comorbidité avec l’anxiété.
Généralement, la nuit individuelle, cette méthode aura du mal car la vulnérabilité de chaque animal à l’activité basée sur l’AIA est très variable. Ainsi, une surveillance étroite de la perte de poids, de l’alimentation et de l’activité de l’animal sont nécessaires, ou les animaux peuvent commencer à s’installer. Placez l’ordinateur et le concentrateur USB dans la salle des animaux à l’abri de l’eau courante et de la circulation piétonnière, mais à portée de l’émetteur des roues de course.
Utilisez également une alimentation de secours pour l’ordinateur et un concentrateur USB à l’aide d’interrupteurs sur le concentrateur. Réglez les numéros de canal pour qu’ils correspondent aux numéros de canal de toutes les roues de roulement qu’il surveillera. Démarrez maintenant le logiciel de gestion des roues de roulement et confirmez que le logiciel reconnaît chaque émetteur.
Chaque roue sera répertoriée dans la fenêtre du programme. Sous le cap des capteurs de roue. Le logiciel attribuera automatiquement un numéro d’identification à chaque roue.
Il peut être utile de noter ce numéro sur la roue. Si une roue n’est pas reconnue, remplacez les piles de la roue. Ensuite, préparez une cage pour chaque sujet de souris avec de la litière, des nids, un accès libre à l’eau et une roue de course.
La roue de course doit se déplacer librement sans toucher les parois de la cage, le panier de nourriture ou le dessus de la cage. Vérifiez également que le logiciel met à jour le nombre de roues. Pour s’acclimater, les animaux logent chaque souris individuellement dans une cage avec une roue de course et l’accès à environ 100 grammes de nourriture sèche et 50 grammes de nourriture humide dans la cage.
Dans le logiciel. Commencez l’acquisition et le stockage des données en sélectionnant Démarrer l’acquisition. Dans le menu Fichier, choisissez le répertoire dans lequel les données seront enregistrées jusqu’à l’arrêt.
Le logiciel enregistrera en continu tous les jours juste avant le début de la phase d’obscurité du cycle de lumière. Pesez l’animal, pesez les aliments humides et pesez les aliments secs. Remplissez le récipient pour aliments secs s’il contient moins de 50 grammes et remplacez le récipient pour aliments humides.
Si les aliments se dessèchent ou sont souillés par de la litière, enregistrez manuellement le décompte des roues en même temps. Pour sauvegarder les données numériques le premier jour de restriction alimentaire, retirez toute la nourriture humide et sèche de la cage au milieu de la partie du cycle de lumière de la journée. Plus tard, au début de la tombée de la nuit, notez le poids de l’animal et le nombre de roues.
Ensuite, mettez environ 50 grammes de nourriture sèche dans la trémie et fournissez cinq grammes de nourriture humide dans un bateau. Ensuite, préparez une cage fraîche avec de la litière et des nids pour chaque animal. Après deux heures avec le transfert de nourriture, la roue de course et quelques poignées de litière sale dans la cage préparée.
Transférez les souris dans les nouvelles cages sans nourriture. À la fin de la période d’accès aux aliments, notez le poids des aliments UNE et le décompte des roues. Répétez ce processus quotidiennement pendant toute la durée de l’expérience.
Si, à un moment donné, un animal tombe en dessous de 75 % de son poids initial, retirez-le de l’expérience. D’autres indications d’une famine excessive qui indiqueraient que l’animal devrait être retiré de l’expérience comprennent une posture voûtée et une incapacité à se déplacer dans la cage. L’animal peut être froid au toucher et ne pas manger pendant les deux heures d’accès à la nourriture.
Après trois jours de restriction alimentaire, terminez l’expérience. Euthanasiez l’animal pour récolter des tissus ou permettez-lui de se rétablir. Pour d’autres tests comportementaux dans le logiciel, cliquez sur l’option d’acquisition finale dans le menu Fichier.
Les données sont maintenant enregistrées dans un fichier WLS dans le répertoire choisi Au début de l’expérience, retirez les roues de roulement des cages puis retirez leurs batteries. Les animaux en convalescence devraient être autorisés ad libido, accès à la nourriture. Maintenant, exportez les données vers une feuille de calcul.
Choisissez l’option d’exportation dans le menu Fichier et sélectionnez les fichiers WLS souhaités dans l’option Fichier de données source. Ensuite, sélectionnez la date et l’heure de début et de fin, puis sélectionnez chaque capteur de roue pour l’exportation. Dans la liste des capteurs de roue, les données peuvent ensuite être analysées si nécessaire pour étudier l’effet de a b.
Dans une population similaire à l’anorexie mentale humaine, des souris adolescentes femelles ont été acclimatées à la roue à P 36. Peu de temps après le début de la puberté, la privation de nourriture a commencé à la P 40 et leur poids corporel a fortement diminué, les animaux témoins n’avaient pas de roues de course ni de restrictions alimentaires. Les animaux affamés ont couru excessivement après le début de la restriction alimentaire.
L’analyse détaillée de l’activité des roues a montré un schéma circadien. Curieusement, même lors de l’accès à la nourriture, les animaux affamés choisissaient d’utiliser la roue de course. Après le début de la restriction alimentaire, certains animaux ont montré une augmentation de l’activité juste avant le moment de l’alimentation, ce qui peut être appelé nourriture Activité anticipée On passe maître dans la mise en place d’une cohorte pour subir un scénario basé sur l’activité peut être réalisé en quelques heures s’il est exécuté correctement.
Lors de cette procédure, il est important de se rappeler d’enregistrer manuellement le nombre de roues au moins une fois par jour. Une interruption inattendue de la ligne électrique ou l’épuisement des batteries peut perturber le comptage des roues généré par ordinateur Suite à cette procédure. D’autres méthodes telles que l’immuno-chimie, l’électrophysiologie et les tests comportementaux peuvent être effectuées afin de répondre à des questions supplémentaires telles que la façon dont l’induction de l’anorexie basée sur l’activité affecte l’anatomie du cerveau, les propriétés biophysiques et le comportement.
Cet article présente un protocole pour induire l'anorexie basée sur l'activité (ABA) chez des souris adolescentes femelles, un modèle pour étudier la neurobiologie de l'anorexie mentale. Le protocole implique une restriction alimentaire et une surveillance de l'activité de la roue de course pour observer les changements comportementaux.