Name: Conçu vascularisé Muscle Flap (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-01-11T09:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 18 s
Description: Apprenez à créer un lambeau musculaire vascularisé pour la reconstruction de la paroi abdominale complète en utilisant un modèle murin. Cette technique d'ingénierie tissulaire améliore la viabilité du greffon grâce à une vascularisation optimale.

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Cette recherche a été financée par la subvention du Conseil européen de la recherche FP7 281501, ENGVASC.

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Les auteurs déclarent qu’ils n’ont pas d’intérêts financiers concurrents.

Les progrès de l&#39;ingénierie tissulaire ont été atteints avec une demande croissante pour les tissus de substitution pour la reconstruction de divers types de tissus. Une variété de 1,17,18 synthétiques et biologiques 14-16 matériaux ainsi que les méthodes de fabrication ont été évalués pour leur capacité à répondre à ces demandes. Cependant, malgré les progrès dans les soins cliniques et en ingénierie tissulaire, la restauration des défauts de pleine épaisseur paroi abdominale reste un défi. Un...

Les défauts de la paroi abdominale surviennent souvent à la suite de traumatismes graves, le traitement du cancer, des brûlures et l&#39;enlèvement de maille infecté. Ces défauts impliquent souvent la perte de tissu importante, nécessitant des interventions chirurgicales complexes et présentant un défi majeur pour les chirurgiens de reconstruction plastique 1-4. Les chercheurs de l&#39;ingénierie tissulaire qui cherchent de nouvelles sources de tissus artificiels ont exploré différents matériaux, sources de cellules et facteurs de croissance. Restaurations réussies de divers tissus, tels que le 5,6 trachée, de la vessie 7, 8 cornée, os 9 et de la peau 10, par implantation d&#39;ingénierie de tissus ont été précédemment rapportés. Cependant, la fabrication d&#39;une ingénierie tissulaire vascularisé épaisse, en particulier pour la reconstruction de gros défauts, demeure un défi important dans l&#39;ingénierie tissulaire. L&#39;un des principaux facteurs limitant l&#39;épaisseur d&#39;une construction de tissu viable est le contrôle de l&#39;approvisionnement en oxygène à ses inconvénientstituent des cellules. Lorsqu&#39;ils se fient à la diffusion, construire épaisseur est limitée à celle d&#39;une couche très mince. La distance maximale entre l&#39;oxygène et en éléments nutritifs capillaires fournir in vivo est d&#39;environ 200 pm, qui est en corrélation avec la limite de diffusion de l&#39;oxygène 11,12. Vascularisation insuffisante peut entraîner une ischémie tissulaire et grimper à la résorption du tissu ou de nécrose 13. En outre, le matériau idéal utilisé pour la reconstruction tissulaire doit être biocompatible et non immunogène. Il doit aussi être capable de favoriser une plus grande intégration de cellules hôtes avec le biomatériau et le maintien de l&#39;intégrité structurelle. Divers biologiques 14-16 et synthétiques 1,17,18 matrices ont déjà été explorées pour la reconstruction des tissus, mais leur utilisation reste limitée à cause du manque d&#39;approvisionnement en sang efficaces, les infections ou la force insuffisante des tissus. Dans cette étude, une cellule-emb biocompatibleéchafaud edded composé de la Food and Drug Administration (FDA) poly -approuvé acide L-lactique (PLLA) / poly acide lactique-co-glycolique (PLGA), a été implanté autour des vaisseaux artère et la veine fémorales (AV) d&#39;une souris nude et séparée du tissu environnant, en assurant la vascularisation des vaisseaux AV uniquement. Une semaine après l&#39;implantation, la greffe était viable, épais et bien vascularisé. Ce tissu vascularisé épais avec les vaisseaux AV, a ensuite été transféré comme un lambeau pédiculé à un défaut de pleine épaisseur abdominale chez la même souris. Une semaine après le transfert, le volet était viable, vascularisé et bien intégré avec le tissu environnant, la force portante suffisante pour supporter viscères abdominaux. Ainsi, le rabat de l&#39;ingénierie tissulaire vascularisé épais, portant un pédicule autologue, présente une nouvelle méthode pour réparer des défauts de pleine épaisseur paroi abdominale.

<table><tbody><tr><td>petites ciseaux droites fines</td><td>Fine Science Tools (FST)</td><td>14090-09</td><td></td></tr><tr><td>ciseaux à ressort</td><td>Fine Science Tools (FST)</td><td>15003-08</td><td></td></tr><tr><td>pince droite à pointe fine</td><td>Fine Science Tools (FST)</td><td>11251-20</td><td></td></tr><tr><td>pince dentée&nbsp ;</td><td>Fine Science Tools (FST)</td><td>11050-10</td><td></td></tr><tr><td>porte-aiguille</td><td>Fine Science Tools (FST)</td><td>12500-12</td><td></td></tr><tr><td>Cautériseur pour petits récipients&nbsp ;</td><td>Fine Science Tools (FST)</td><td>18000-00</td><td></td></tr><tr><td>Duratears</td><td>Alcon</td><td>5686</td><td></td></tr><tr><td>Sedaxylan</td><td>Euravet</td><td>DJ03</td><td></td></tr><tr><td>Clorketam 1000</td><td>Vetoquinol</td><td>4A0726B</td><td></td></tr><tr><td>Buprénorphine</td><td>vetmarket</td><td>B15100</td><td></td></tr><tr><td>4-0 sutures en soie</td><td>Assut sutures</td><td>647</td><td></td></tr><tr><td>6-0 sutures en polypropylène</td><td>Sutures en</td> soie <td>Assut 9351F</td><td></td></tr><tr><td>8-0 Sutures en soie</td><td>Sutures Assut</td><td>684568</td><td></td></tr><tr><td>Seringue à insuline (aiguille de 6 mm)</td><td>Système</td><td>d’échographie</td> haute résolution BD 324911 <td></td></tr><tr><td>Vevo 2100</td><td>VisualSonics inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sonde non linéaire MS250</td><td>VisualSonics inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Micromarqueur agent de contraste non ciblé</td><td>VisualSonics inc.</td>Cathéter de veine cathétrique de veine caudale <td>VS-11694</td><td></td></tr><tr><td></td><td>VisualSonics inc.</td><td>VS-11912</td><td></td></tr><tr><td>Logiciel Vevo 2100</td><td>VisualSonics inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>fluorescéine isothiocyanate conjugué dextran</td><td>Sigma</td><td>FD500S</td><td></td></tr><tr><td>Matlab</td><td>Mathworks, MA, USA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kimwipes</td><td>Kimtech</td><td>34120</td><td></td></tr><tr><td>solution de démasquage de l’antigène</td><td>Vector laboratories</td><td>H-3300</td><td></td></tr><tr><td>anticorps anti-CD31</td><td>Abcam&nbsp ;</td><td>ab28364</td><td></td></tr><tr><td>chèvre biotinylée anticorps anti-lapin (secondaire)</td><td>Laboratoires de vecteurs</td><td>BA-1000</td><td></td></tr><tr><td>streptavidine-peroxydase</td><td>Jackson&nbsp ;</td><td>016-030-084</td><td></td></tr><tr><td>Solution d’hamatoxyline de Mayer</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>MHS-16</td><td></td></tr><tr><td>kit de substrat aminoéthylcarbazole (AEC)</td><td>Life technologies, Invitrogen&nbsp ;</td><td>00-2007</td><td></td></tr><tr><td>Vectamount</td><td>Vector laboratories</td><td>H-5501</td><td></td></tr></tbody></table>

conçu vascularisé muscle flap

Engineered Vascularized Muscle Flap

L’un des principaux facteurs limitant l’épaisseur d’une construction tissulaire et sa viabilité et son applicabilité in vivo, est le contrôle de l’apport d’oxygène au microenvironnement cellulaire, car la diffusion passive est limitée à une couche très mince. Bien que divers matériaux aient été décrits pour restaurer l’intégrité des défauts de pleine épaisseur de la paroi abdominale, aucun matériau ne s’est encore avéré optimal, en raison d’une faible vascularisation du greffon, d’un rejet tissulaire, d’une infection ou de propriétés mécaniques inadéquates. Ce protocole décrit un moyen d’ingénierie d’un lambeau entièrement vascularisé, d’une épaisseur pertinente pour la reconstruction du tissu musculaire. Des constructions d’acide polylactique et d’acide polylactique co-glycolique intégrées dans des cellules sont implantées autour de l’artère fémorale et de la veine de la souris et maintenues in vivo pendant une période d’une ou deux semaines. Le greffon vascularisé est ensuite transféré sous forme de lambeau vers un défaut de pleine épaisseur réalisé dans l’abdomen. Cette technique remplace la nécessité de sacrifications de tissus autologues et peut permettre l’utilisation de lambeaux vascularisés conçus in vitro dans de nombreuses applications chirurgicales.

La vascularisation du greffon et de la perfusion in vivo Les greffons ont été implantées une ou deux semaines avant leur transfert comme volets axiaux. À une et deux semaines après l&#39;implantation, l&#39;observation brut de la zone de greffe révélé greffes de tissus viables et vascularisées. Ces greffes se sont avérées hautement vascularisé, tel que déterminé par immuno-coloration de CD31 positive (Figure 1A), et très perfusé, comme en témoigne injection veine ca...

À ce jour, les défauts des tissus épais sont généralement reconstruits par l’application de lambeaux de tissus autologues ou de tissus modifiés. Dans ce protocole, nous présentons une nouvelle méthode d’ingénierie d’un lambeau de tissu vascularisé portant un pédicule autologue, pour servir de substitut aux lambeaux autologues.

Conçu vascularisé Muscle Flap

One of the main factors limiting the thickness of a tissue construct and its consequential viability and applicability in vivo, is the control of oxygen ...

L'objectif général de cette procédure est de créer un lambeau tissulaire bien vascularisé destiné à la reconstruction de défauts pariétaux abdominaux en full-thickness. Cela est réalisé en préparant d'abord une matrice biodégradable en acide polylactique poly acide lactique-co-glycolique. Ensuite, des cellules endothéliales, des cellules musculaires et des fibroblastes sont ensemencées, et la greffe est cultivée in vitro afin de permettre aux cellules de s'auto-assembler.Ensuite, le tissu génétiquement conçu est implanté autour de l'artère fémorale et des veines de la souris, où il subit une anastomose avec les vaisseaux de l'hôte et devient fortement vascularisé. Enfin, le tissu est transféré sous forme de lambeau pédiculé vers un défaut de la paroi abdominale de pleine épaisseur. Finalement, la vascularisation de la greffe est confirmée par échographie, l'injection de dextran marqué T et une immunomarquage pour CD31, tandis que la rigidité du lambeau est évaluée à l'aide d'un instrument d'essai biodynamique.Les principaux avantages de cette méthode par rapport aux méthodes existantes sont une mobilité réduite du site donneur et une viabilité élevée du lambeau modifié, qui peut êt

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Bioingénierie

Ici, nous présentons un protocole pour générer de l'ingénierie tissulaire greffes de vaisseaux qui sont fonctionnels pour le greffage dans des souris en double ensemencement partiellement induite sur les cellules souches pluripotentes (IPFPC) - dérivé des cellules musculaires lisses et l'IPFPC - cellules endothéliales dérivées sur une décellularisée navire échafaudage bioréacteur.

Génération et greffage des navires par ingénierie tissulaire dans un modèle de souris

Il s’agit d’une ligne directrice pour la construction de tissus vascularisés in vivo à l’aide d’une boucle artérioveineuse microchirurgicale ou d’une configuration pédiculaire à écoulement continu à l’intérieur d’une chambre d’ingénierie tissulaire. Les tissus vascularisés générés peuvent être utilisés pour la régénération des organes et le remplacement des défauts tissulaires, ainsi que pour les tests de médicaments et la modélisation des maladies.

Génie tissulaire par Intrinsic vascularisation dans un<em&gt; In Vivo</em&gt; Tissue Chambre Ingénierie

Cet article décrit les étapes nécessaires pour lever un lambeau libre épigastrique fasciocutané et le transférer vers le cou chez le rat.

Un modèle de transfert de tissu libre: Le Rat épigastrique Flap gratuit

Nous présentons ici un protocole pour l’utilisation du lambeau perforant cochon Artère épigastrique supérieure comme un module d’apprentissage pour la tête et du cou reconstruction microvasculaire.

Porcine comme un Module de formation pour la tête et du cou Reconstruction microvasculaire

Le présent protocole décrit le modèle du lambeau fascio-cutané porcin et son utilisation potentielle dans la recherche sur les tissus composites vascularisés.

Un modèle fiable de lambeau fascio-cutané porcin pour les études de bio-ingénierie des allogreffes composites vascularisées

Les volets d’ingénierie nécessitent un réseau vasculaire fonctionnel intégré. Dans ce protocole, nous présentons une méthode de fabrication d’un lambeau de tissu imprimé en 3D contenant un réseau vasculaire hiérarchique et ses anastomoses microchirurgicales directes à l’artère fémorale du rat.

Fabrication de volets vasculaires artificiels à l’aide de technologies d’impression 3D

Le protocole décrit l’obtention chirurgicale et la décellularisation ultérieure des lambeaux porcins vascularisés par perfusion du détergent au dodécylsulfate de sodium à travers le système vasculaire du lambeau dans un bioréacteur de perfusion personnalisé.

Acquisition et perfusion-décellularisation de lambeaux vascularisés porcins dans un bioréacteur de perfusion personnalisé

Ce protocole décrit la technique chirurgicale de prélèvement d’un modèle de lambeau perforateur humain basé sur le pédicule de l’artère épigastrique inférieure profonde, destiné à la recherche expérimentale.

Un modèle expérimental de lambeau DIEP humain pour étudier les stratégies de préservation des allograftes composites vascularisées et des lambes libres

Il ya eu un regain d'intérêt dans le développement de valves polymères. Ici, les objectifs sont de démontrer la faisabilité de la modification d'un duplicateur d'impulsion commerciale pour accueillir géométries tri-leaflet et de définir un protocole de présenter des données hydrodynamiques de soupape polymères par rapport aux données de valve native et prothétique recueillies dans des conditions quasi-identiques.

Protocole pour l&#39;évaluation hydrodynamique relative de Vannes polymères tri-leaflet

Nous décrivons un protocole in vivo pour mesurer la dorsiflexion du pied suite à la stimulation du nerf péronier et à la contraction du compartiment crural antérieur de la patte postérieure du rat. De telles mesures sont un outil translationnel indispensable pour évaluer la pathologie des muscles squelettiques et les approches d’ingénierie tissulaire de la réparation et de la régénération musculaires.

des applications de<em&gt; In Vivo</em&gt; Tests fonctionnels du Rat jambier antérieur pour l&#39;évaluation de l&#39;ingénierie tissulaire Skeletal Muscle Repair

Apprenez à créer un lambeau musculaire vascularisé pour la reconstruction de la paroi abdominale complète en utilisant un modèle murin. Cette technique d'ingénierie tissulaire améliore la viabilité du greffon grâce à une vascularisation optimale.

Conçu vascularisé Muscle Flap

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