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Utilisation des Biocapteurs pour quantifier enzymatique endogène ATP ou H 2 O 2
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JoVE Journal Biology
Use of Enzymatic Biosensors to Quantify Endogenous ATP or H2O2 in the Kidney

Utilisation des Biocapteurs pour quantifier enzymatique endogène ATP ou H 2 O 2 Dans le rein

Full Text
12,319 Views
10:00 min
October 12, 2015

DOI: 10.3791/53059-v

Oleg Palygin1, Vladislav Levchenko1, Louise C. Evans1, Gregory Blass1, Allen W. Cowley Jr.1, Alexander Staruschenko1

1Department of Physiology,Medical College of Wisconsin

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Les biocapteurs enzymatiques à microélectrodes permettent de mesurer en temps réel la signalisation cellulaire extracellulaire à des concentrations biologiquement pertinentes. Les protocoles suivants étendent les applications des biocapteurs à la détection ex vivo et in vivo de l’ATP et du H2O2 dans le rein.

L’objectif global de ces procédures est de mesurer en temps réel les concentrations interstitielles endogènes d’un TP et de peroxyde d’hydrogène dans des reins entiers. Ceci est accompli en réhydratant et en étalonnant d’abord des capteurs pour des applications ex vivo et in vivo à des concentrations connues d’un TP et de peroxyde d’hydrogène. Pour l’installation du capteur ex vivo, le rein a été instrumenté chirurgicalement et nettoyé du sang.

Cette procédure est réalisée en rinçant le rein à travers l’aorte. Ensuite, le rein du rat est isolé chirurgicalement, placé dans une chambre d’enregistrement et perfusé avec une solution saline. Un TP et du peroxyde d’hydrogène sont mesurés à l’aide de capteurs ex vivo pour la procédure in vivo.

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Biologie Moléculaire Numéro 104 Biocapteur du rein de l'ATP H 2 O 2 Le rat l'ampérométrie la signalisation purinergique

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