Le séquençage de l'usine mur hétéroxylanes Utilisation enzymatique, chimique (méthylation) et physiques (spectrométrie de masse, résonance magnétique nucléaire) Techniques

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24 mars 2016

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Ce protocole décrit les techniques spécifiques utilisées pour la caractérisation structurale de l’extrémité réductrice (RE) et de la (les) séquence(s) glycosylique(s) de la région interne des hétéroxylanes en marquant l’ER avec 2 aminobenzamides avant l’hydrolyse enzymatique (endoxylanase), puis en analysant les oligosaccharides résultants à l’aide de la spectrométrie de masse (MS) et de la résonance magnétique nucléaire (RMN).

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Séquençage d'hétéroxylanes

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0:05

Titre

0:53

Marquage du résidu saccharidique de l'extrémité réductrice (RE) des AX solubles dans l'eau avec le 2-aminobenzamide (2AB)

2:11

Génération de xylo-oligosaccharides à partir d'AX solubles dans l'eau marqués au 2AB

3:34

Spectrométrie de masse à ionisation laser assistée par matrice avec analyseur à temps de vol (MALDI-TOF MS)

4:48

Spectrométrie de masse à ionisation par électrospray avec analyseur quadripôle à temps de vol (ESI-QTOF MS)

6:20

ESI-MSn

7:30

Spectroscopie de résonance magnétique nucléaire (RMN) du H1

8:45

Résultats : Séquence(s) glycosylique(s) de l'extrémité réductrice (RE) et de la région interne des hétéroxylanes

10:34

Conclusion

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