Name: Pré-clinique Orthotopique modèle murin de cancer de la prostate humaine (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-08-29T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 1 s
Description: Apprenez à établir un modèle murin orthotopique de cancer de la prostate humaine pour étudier les événements moléculaires de la tumeur primaire et les phases initiales de la métastase. Cette méthode permet l'évaluation préclinique de nouvelles approches thérapeutiques.

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Nous remercions le Dr Roger Erickson pour son soutien et son aide dans la préparation du manuscrit. Ce travail a été soutenu par le National Cancer Institute des National Institutes of Health par le biais des subventions RO1CA160079, RO1CA138642, UO1CA184966 et du projet de programme financé par VA numéro 1P1 BX001604.

Protocoles pour toutes les procédures impliquant des animaux doivent être examinés et approuvés par un comité de protection et d&#39;utilisation institutionnelle des animaux (IACUC). Suivre les procédures approuvées officiellement pour le soin et l&#39;utilisation des animaux de laboratoire. L&#39;injection intra-prostatique nécessite une intervention chirurgicale ouverte abdominale et les animaux doivent être conservés dans un environnement exempt d&#39;agents pathogènes avec une pièce désignée de chirurgie où les techniques aseptiques chirurgicales appropriées sont utilisées pendant toute la procédure. 1. Préparation des cellules pour implantation REMARQUE: Selon les besoins de recherche, toute lignée cellulaire de cancer de la prostate peut être utilisé. Les lignées cellulaires sont cultivées selon les instructions du fournisseur. <ol><li> Pour la lignée cellulaire PC3M-Luc-C6 qui exprime de façon stable le gène de la luciférase de luciole, des cellules de culture en milieu essentiel minimum (MEM) supplémenté avec 10% de sérum bovin fœtal (FBS), des acides aminés 1x non essentiels, 1x phléomycine D1 et 1 mM de pyruvate de sodium . Maintenir les cellules dans un incubateur wvec une atmosphère humidifiée de 95% d&#39; air et 5% de CO 2 à 37 ° C. cellules PC3M-Luc-C6 ont été achetés auprès de l&#39;installation de base UCSF. </li><li> Récolte des cellules par trypsinisation. Laver les plaques de culture une fois avec du tampon phosphate salin (PBS). Ajouter 2 ml de trypsine à 0,05% dans une boîte de 10 cm et laisser incuber pendant 3-5 min dans un incubateur avec une atmosphère humidifiée de 95% d&#39; air et 5% de CO2 à 37 ° C jusqu&#39;à ce que les cellules se détachent. <ol><li> Pour éviter l&#39;agglutination, ne pas agiter les cellules en frappant ou en secouant le plat en attendant les cellules pour détacher. Recueillir les cellules dans 5 ml de milieu complet et centrifuger pendant 5 minutes à 200 x g. Laver le culot cellulaire avec du PBS pour éliminer la trypsine. </li></ol></li><li> Énumérer les cellules vivantes par essai d&#39;exclusion au bleu trypan. Mélanger 10 ul de la suspension cellulaire dans du PBS avec 10 ul de 0,4% (poids / volume) de solution de bleu trypan. Chargez le mélange dans une diapositive hémocytomètre ou chambre de comptage et de compter les cellules immédiatement sous un microscope ou lire la diapositive de chambre dans un cou cellulairenter. <ol><li> Préparer une suspension de cellules contenant 2,5 x 10 5 cellules dans 10 ul de milieux. Mélanger la suspension cellulaire avec 10 ul de la membrane basale, comme l&#39;extrait de matrice extracellulaire et de placer les cellules sur de la glace. Ajouter luciférine à la suspension cellulaire (1: 200 pi; stocks 30 mg / ml concentration) avant d&#39;injecter à des souris. NOTE: Cela permet immédiatement bio-imagerie des animaux pour vérifier la cohérence des injections de cellules entre les différents groupes expérimentaux. Injecter cellules aussi rapidement que possible, de préférence dans les 30 minutes après trypsinisation depuis la viabilité cellulaire diminue rapidement après le détachement. </li></ol></li></ol> 2. Préparation de la zone chirurgicale <ol><li> Effectuer la chirurgie dans, une zone épurée désinfectée qui favorise l&#39;asepsie. </li><li> Désinfectez le compteur / banc de laboratoire avec une solution d&#39;eau de Javel avant la chirurgie. NOTE: La consommation d&#39;alcool est déconseillée en raison de temps de contact nécessaire pour prendre effet (15 min). </li><li> Utilisez des champs stériles,nettoyer des tampons ou des serviettes résorbables, et remplacer ces matériaux après chaque session chirurgicale. Stériliser tous les instruments avant de les utiliser. Les procédés préférés sont un autoclave à vapeur, perle de verre stérilisateur, gaz d&#39;oxyde d&#39;éthylène, ou le peroxyde d&#39;hydrogène stérilisation à la vapeur. </li><li> Utiliser un microscope à dissection aseptique nettoyé pour effectuer la procédure chirurgicale ou des chercheurs expérimentés peuvent effectuer sans un microscope. </li></ol> 3. L&#39;implantation des cellules tumorales <ol><li> Utilisez homme de 6-8 semaines immunodéprimés Balb / c ou des souris NOD / SCID. NOTE: Il est plus difficile d&#39;opérer sur des animaux plus petits et plus grands animaux ont tendance à avoir une cinétique plus lente de la croissance tumorale et les métastases. </li><li> Injecter des médicaments contre la douleur pré-opératoire selon les instructions de l&#39;installation animale. Par exemple, la buprénorphine intrapéritonéale à une dose de 0,1 mg / kg de poids corporel peut être utilisé. </li><li> Anesthésier les animaux en les plaçant dans une chambre d&#39;isoflurane avec 1-3% d&#39;isoflurane dans de l&#39;oxygène et wajusqu&#39;à ce que les animaux sont complètement anesthésiés. Assurez-vous qu&#39;il n&#39;y a pas toe réflexe du tonus musculaire à ce stade. Utilisez vétérinaires appropriés pommade ophtalmique lubrifiante pour prévenir la cécité due à la xérophtalmie pendant l&#39;anesthésie générale. NOTE: Anesthetize les animaux par la méthode préférée , par exemple de l&#39;enquêteur, pour pentobarbital de sodium, 0,05 mg par poids corporel de gramme est administré intra-péritonéale ou kétamine / solution de Xylazine (concentration: 17,16 mg / ml) à une dose de 65 mg / kg de poids corporel est utilisé sous-cutanée. par inhalation d&#39;isoflurane est un procédé préféré de l&#39;anesthésie. La pommade oculaire doit être appliquée doucement sans frotter contre la cornée. </li><li> Retirer l&#39;animal de la chambre isoflurane et le placer dans un appareil de cône de nez avec un flux continu de 1-2% d&#39;isoflurane dans de l&#39;oxygène pour assurer que l&#39;animal est sous anesthésie générale avant de poursuivre. <ol><li> Enlever les poils de souris par le rasage ou utiliser une crème épilatoire avant de commencer la procédure. NOTE: Il serait préférable de placer la souris sur un coussin chauffant stérile pendant la chirurgie. </li></ol></li><li> Placez la souris dans une position couchée. Nettoyer l&#39;abdomen inférieur à 10% en poids / poids solution de povidone-iode suivi par 70% des prélèvements d&#39;éthanol. </li><li> Avec une paire de pinces fines, soulever une zone de peau 2 mm au-dessus de la glande préputiale, environ 1-2 cm au-dessus de la gaine du pénis, et environ 2-3 cm en dessous du bas de la cage thoracique. </li><li> Faire une incision de 1 cm de la ligne médiane de la longueur, tout d&#39; abord à travers la peau avec un scalpel, puis à travers la couche musculaire avec une paire de ciseaux (figure 1). </li><li> Localiser la vessie dans la cavité du corps. Il est un organe sphérique jaune brun-clair, situé directement sous l&#39;incision (Figure 1). </li><li> Avec une paire de pinces fines saisir la vessie et soulever vers le haut puis vers le bas de la cavité du corps vers la gaine du pénis. Cela permettra d&#39;exposer les deux vésicules séminales qui sont une paire de blancs organes en forme de sac et clairement distincts. </li><li> Avec uncoton - tige dans chaque main, extériorisent les vésicules séminales, un par un, et les sortir de la cavité du corps et se trouvait face cachée sur la surface extérieure de l&#39;abdomen avec la vessie au milieu (Figure 2). </li><li> En utilisant les tampons de coton, inclinez doucement les vésicules séminales au point d&#39;insertion à proximité du col de la vessie, vers la gaine du pénis, de sorte que les deux lobes de la prostate dorsale sont clairement visibles. Utilisez des cotons - tiges humides pour éviter des dommages aux tissus (figure 3). </li><li> Agiter la suspension cellulaire avec une micropipette avant le chargement dans la seringue. </li><li> En plaçant les vésicules séminales en position avec un coton - tige, insérer l&#39;aiguille de la seringue dans le lobe dorsal de la prostate sous le microscope (figure 4). Injecter lentement 20 ul de suspension cellulaire jusqu&#39;à une formation de bulle est identifiée. Une bulle bombée indique que l&#39;injection est correcte. </li><li> Alors que la rétraction de l&#39;aiguille, appuyez légèrement sur le site d&#39;injection avecun coton-tige et maintenez pendant quelques secondes pour éviter les fuites. </li><li> Soulevez délicatement les vésicules séminales avec des cotons-tiges et insérez-les dans la cavité du corps, un par un suivi de la vessie. Évitez &#39;virevoltant&#39; les organes internes pendant cette procédure. </li><li> Après avoir placé les organes dans la cavité du corps, le fil de suture de la couche musculaire d&#39;abord dans un motif interrompu par 4-0 absorbable catgut chromique suivie par la fermeture de la peau non absorbable suture chirurgicale de nylon 4-0. La peau peut également être tiré ensemble et fermé avec des pinces chirurgicales pour fermer l&#39;incision complètement. NOTE: Les souris ont l&#39;habitude de se gratter et mordre à leur blessure, ce qui peut conduire à la réouverture de la plaie, d&#39;où l&#39;utilisation de colle tissulaire est également recommandée avec sutures. animaux de l&#39;image immédiatement pour assurer qu&#39;il y ait une intensité bioluminescente égale entre tous les groupes expérimentaux. </li><li> Remettre les animaux pour nettoyer les cages et les garder sous une lampe chauffante ou à la chaleuring pad. Surveiller les animaux en permanence jusqu&#39;à ce qu&#39;ils récupèrent complètement de l&#39;anesthésie et de maintenir décubitus sternale. </li></ol> 4. Surveillance des animaux <ol><li> Surveiller les animaux régulièrement jusqu&#39;à la fin de l&#39;essai, selon des protocoles institutionnels. Si vous utilisez des clips métalliques chirurgicales, retirer après une à deux semaines. Durée de l&#39;expérience dépend de la nécessité de recherche spécifique. REMARQUE: Cette expérience a été menée pendant 21 jours pour examiner la mise en place réussie des cellules cancéreuses de la prostate implantées dans la souris. </li><li> Administrer des médicaments de la douleur sur la base des instructions de l&#39;installation des animaux. Par exemple, la buprénorphine intrapéritonéale à une dose de 0,1 mg / kg de poids corporel peut être utilisé au moment de l&#39;opération avec une seconde dose après 6 h et toutes les doses supplémentaires de 8 à 12 h selon les besoins. </li><li> Surveiller le poids des animaux, la consommation alimentaire, la couleur de la peau et la texture, l&#39;activité et la fréquence de la miction et la défécation. Euthanasier animaux immediately s&#39;il y a une perte significative de poids corporel supérieur à 15%. <ol><li> Pour l&#39; euthanasie, livrer CO 2 à partir d&#39; un réservoir sous pression dans une cage non encombrée à un débit pour déplacer 10-30% de la chambre ou de la cage de volume / minute, ce qui permet de CO 2 pour entrer dans la chambre lentement pour que narcotisation inconscience et complète se produit avant la mort. </li><li> Maintenir CO 2 flux pendant au moins une minute après l&#39; arrêt respiratoire et de laisser les animaux dans la chambre pendant un temps suffisant pour que la mort se produit avant d&#39;effectuer une méthode physique. </li><li> Effectuer la décapitation, la dislocation cervicale ou tout autre IACUC approuvé la méthode physique après euthanasier les animaux chimiquement. REMARQUE: le poids corporel significativement réduite indique souvent une condition léthargique. Tumoraux animaux porteurs doivent être en bonne santé, sauf pour la présence de tumeurs jusqu&#39;à la fin de l&#39;expérience. Euthanasie devrait être conforme aux lignes directrices de l&#39;AVMA sur l&#39;euthanasie et doit être listed dans le protocole IACUC approuvé. </li></ol></li></ol> Bio-imagerie 5. Non-invasive des animaux <ol><li> Surveiller les animaux chaque semaine à l&#39;aide d&#39;une technique d&#39;imagerie non invasive pour suivre la colonisation des cellules cancéreuses, la croissance tumorale et des métastases à distance. NOTE: modalités d&#39;imagerie telles que la GFP-imagerie, l&#39; imagerie de la luciférase, les rayons X ou 3D micro-tomographie par ordinateur (UCT) , etc. , peuvent être utilisés en fonction de la recherche spécifique ont besoin 12-15. </li></ol>

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</ol>

Les auteurs déclarent qu&#39;ils ont aucun intérêt financier concurrents.

Ce manuscrit décrit une procédure détaillée pour établir un modèle de xénogreffe de souris humaine orthotopique de cancer de la prostate. Ce modèle a été mis en place par implantation directe de la lignée cellulaire du cancer de la prostate humain PC3M-Luc-C6 dans les lobes prostatiques dorsale de souris immunodéprimées. Les tumeurs ont été autorisés à se développer au cours de l&#39;expérience. La croissance tumorale a été surveillée toutes les semaines par un système d&#39;imagerie par bioluminescence non invasive au ...

Le cancer de la prostate est la deuxième cause la plus fréquente de décès par cancer (9%) chez les hommes aux États-Unis, à côté d&#39; un cancer du poumon et des bronches (28%) 1. Selon des données récentes, on estime que 220 ​​800 cas de cancer de la prostate nouvellement diagnostiqués et 27 540 décès auront lieu en 2015 1. Le taux de survie relative à cinq ans du début de cancer de la prostate stade est&gt; 99% tandis que celle de la maladie métastatique avancé est seulement 28% 1. Un défi majeur pour le traitement de la maladie métastatique avancé est le manque de compréhension des mécanismes moléculaires qui sous-tendent la propension de cette maladie à métastaser à d&#39;autres organes, en particulier à l&#39;os, qui est un site fréquent pour le cancer de la prostate. Par conséquent, il existe un besoin évident d&#39;étudier la composition moléculaire de ces tumeurs de la prostate afin de développer des schémas thérapeutiques efficaces contre la progression à avancé 2,3 de la maladie métastatique. Prostate tumeurs présentent high hétérogénéité biologique sans une voie bien définie à la progression. Métastases se produisent souvent sans indication préalable de l&#39; invasivité tumorale 4. Cette hétérogénéité clinique est attribuée à la diversité moléculaire du cancer de la prostate. Comprendre la composition moléculaire de ces tumeurs mortelles est la clé pour concevoir de meilleures stratégies diagnostiques et thérapeutiques pour cette maladie. Par conséquent, la recherche sur le cancer de la prostate est actuellement axé sur la compréhension et la prévention des métastases. Modèles de souris pré-cliniques in vivo offrent une variété d&#39;options pour comprendre les mécanismes moléculaires de la progression du cancer de la prostate à la maladie métastatique avancé. En outre, ces modèles sont importants pour les évaluations précliniques de nouvelles stratégies thérapeutiques contre cette maladie. Les modèles animaux les plus couramment utilisés comprennent des modèles transgéniques de souris, l&#39;injection de queue veineuse, l&#39;implantation intra-cardiaque et des modèles de souris orthotopique humains. Les études transgéniques sont consumi de tempsng et la corrélation du développement du cancer de la prostate chez les souris avec celle de l&#39; homme ont montré une variabilité 11. Dans les modèles spontanés de souris métastatiques, les cellules sont injectées directement dans la circulation et bien, ils ont le temps de réponse rapide, ils ne peuvent pas être utilisés pour étudier la tumeur primaire ou les premières étapes de la cascade métastatique 5. des modèles de xénogreffes orthotopiques ont la limitation du développement de lésions métastatiques osseuses, le site commun de métastases du cancer de la prostate. Néanmoins, le modèle orthotopique humain du cancer de la prostate de xénogreffe de souris est bien caractérisé et largement utilisé pour étudier les événements moléculaires du développement de la tumeur primaire, diaphonie entre tumeur et microenvironnement d&#39;organes, de la phase initiale de la maladie métastatique et l&#39; utilisation de médicaments expérimentaux pour une intervention thérapeutique 6 , 7,8-11.

<table><tbody><tr><td>Lignée cellulaire du cancer de la prostate PC3</td><td>ATCC</td><td>CRL-1435</td><td></td></tr><tr><td>Support essentiel minimum (MEM)&nbsp ;</td><td>GIBCO,Life Technology</td><td>11095-080</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>GIBCO,Life Technology</td><td>10010-023</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>GIBCO,Life Technology</td><td>10437-028</td><td></td></tr><tr><td>Zeocin</td><td>Invitrogen,Life Technology</td><td>R250-01</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin&nbsp ;</td><td>GIBCO,Life Technology</td><td>25300-54</td><td></td></tr><tr><td>IVIS&nbsp ;</td>Seringues à insuline <td>Xenogen-Caliper</td><td></td><td></td></tr><tr><td>(300 & micro ; l, 28.5 g)</td><td>Becton Dickinson</td><td>309300</td><td></td></tr><tr><td>Souris</td><td>Charles River Laboratories, Inc</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tampons d’alcool</td><td>MEDEquip Depot</td><td>326895 BD</td><td></td></tr><tr><td>PVP Iode Prep Pad</td><td>MEDEquip Depot</td><td>C12400PDI</td><td></td></tr><tr><td>Surgical CatGut Suture chromique</td><td>Demetech</td><td>CC224017F0P</td><td></td></tr><tr><td>Matrigel</td><td>Corning</td><td>354248</td><td></td></tr></tbody></table>

pré-clinique orthotopique modèle murin de cancer de la prostate humaine

Pre-clinical Orthotopic Murine Model of Human Prostate Cancer

Pour étudier la biologie multidimensionnelle du cancer de la prostate, les modèles précliniques in vivo offrent une gamme d’options pour découvrir des informations biologiques essentielles sur cette maladie. Le modèle murin de xénogreffe orthotopique de cancer de la prostate humain offre une approche alternative utile pour comprendre les interactions spécifiques entre les cellules tumorales génétiquement et moléculairement modifiées, leur microenvironnement organique, et pour évaluer l’efficacité des schémas thérapeutiques. Il s’agit d’un modèle bien caractérisé conçu pour étudier les événements moléculaires du développement de la tumeur primaire et il récapitule les premiers événements de la cascade métastatique avant l’embolie et l’entrée des cellules tumorales dans la circulation. Il permet ainsi d’élucider les mécanismes moléculaires sous-jacents à la phase initiale de la maladie métastatique. De plus, ce modèle permet d’annoter des cibles médicamenteuses d’importance clinique et constitue un outil précieux pour étudier la progression du cancer de la prostate. Dans ce manuscrit, nous décrivons une procédure détaillée pour établir un modèle murin de xénogreffe orthotopique de cancer de la prostate humain.

Après l&#39; implantation orthotopique de cellules PC3M-Luc-C6 dans le lobe de la prostate postérieure, les souris ont été hebdomadaire imagés en utilisant un système d&#39;imagerie par bioluminescence d&#39;animaux vivants pour contrôler la colonisation des cellules et la croissance des tumeurs au cours de l&#39; expérience (Figure 5A - B). Quantification du signal bioluminescent a indiqué que les cellules PC3M-Luc-C6 colonisé avec succès les lobes de l...

Le cancer de la prostate est la deuxième cause la plus fréquente de décès liés au cancer aux États-Unis. Un modèle de cancer orthotopique fournit une approche utile pour comprendre la biologie du cancer de la prostate et pour évaluer l’efficacité des schémas thérapeutiques. Ce protocole décrit en détail les étapes nécessaires à l’établissement d’un modèle murin orthotopique de cancer de la prostate.

Pré-clinique Orthotopique modèle murin de cancer de la prostate humaine

To study the multifaceted biology of prostate cancer, pre-clinical in vivo models offer a range of options to uncover critical biological information ...

L'objectif général de cette procédure est d'établir un modèle de xénogreffe orthotopique de cancer de la prostate chez la souris, qui offre une approche utile pour étudier les événements moléculaires du développement tumoral primaire lors des premières étapes de la cascade métastatique. Ce modèle peut aider à répondre à des questions clés concernant les interactions dynamiques entre les cellules tumorales modifiées génétiquement et sur le plan moléculaire et leur microenvironnement au cours de la croissance tumorale. Il peut également être utile pour l'évaluation préclinique de nouvelles approches thérapeutiques contre le cancer de la prostate humain.Le principal avantage de cette technique par rapport aux modèles de métastases spontanées réside dans le fait qu'elle favorise l'étude des événements moléculaires liés au développement de la tumeur primitive, ainsi que la reconstitution de la phase initiale de la métastase avant l'entrée et l'embolie des cellules tumorales dans la circulation. Le modèle orthotopique du cancer de la prostate constitue l'un des meilleurs modèles précliniques permettant de comprendre comment les cellules cancéreuses de la prostate métastasent vers différe

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Tumeurs de la vessie sont établis dans des souris femelles d'une façon minimalement invasive grâce à un cathétérisme, la cautérisation locale, et l'adhésion subséquente des cellules de carcinome des sites brûler.

Un modèle orthotopique de cancer de la vessie murin

Dans cette vidéo, nous montrons la procédure d’administration d’injection intra-prostatique de cellules cancéreuses de la prostate dans un modèle murin. Des modèles murins orthotopiques peuvent être utilisés pour étudier l’origine de la maladie et la réponse aux traitements thérapeutiques dans un environnement non invasif et cliniquement pertinent.

Injection intraprostatique de cellules cancéreuses : une technique d’administration de cellules cancéreuses pour établir un modèle murin de cancer de la prostate orthotopique

Pour démontrer l'imagerie moléculaire du cancer MR avec un petit peptide agent de contraste IRM spécifique aux protéines de plasma coagulé dans le stroma de la tumeur dans un modèle de cancer de la prostate de la souris ciblé.

M. imagerie moléculaire du cancer de la prostate avec un agent de contraste ciblé Petit moléculaire CLT1 Peptide

Ce modèle orthotopique de cancer de la prostate humain permet la quantification de la taille de la tumeur, les cellules tumorales circulantes, et la formation de métastases dans le poumon distinct. Comme les cellules doivent échapper à l'organe principal, entrer dans la circulation sanguine, et implanter dans un site secondaire, ce modèle reprend effectivement le scénario chez les humains.

Un modèle murin orthotopique de cancer de la prostate humain métastases

Ce manuscrit détaille une méthode utilisée pour générer des xénogreffes dérivées de patients atteints d’un cancer de la prostate (PDX) à partir de cellules tumorales circulantes (CTC). La génération de modèles PDX à partir de CTC fournit un modèle expérimental alternatif pour étudier le cancer de la prostate ; La tumeur la plus fréquemment diagnostiquée et une cause fréquente de décès par cancer chez les hommes.

Génération de cancer de la prostate des patients Dérivé modèles de xénogreffe de cellules tumorales circulantes

Ce manuscrit décrit les protocoles de la prostate microdissection et la castration chirurgicale chez la souris de laboratoire. Nous représentons également des résultats représentatifs produits par ces protocoles. Enfin, nous discutons des avantages et de l'utilisation de ces protocoles.

Murine Prostate Micro-dissection et Castration chirurgicale

Ce protocole décrit la génération de tumeurs de la vessie orthotopique de souris femelles de souris C57BL / 6J et le contrôle de la croissance tumorale.

Un système de détection de tumeur modèle et tumeur murine Orthotopique vessie

Le but du présent protocole est de démontrer l’injection intra prostatique de cellules de cancer de la prostate, avec castration ultérieure. Orthotopique des modèles précliniques de cancer de la prostate androgéno-dépendants et résistant à la castration sont essentielles pour étudier la maladie dans le contexte d’un micro-environnement tumeur cliniquement pertinents et un hôte immunocompétent.

Un modèle murin syngénique bioluminescentes et Fluorescent orthotopique du Cancer de la Prostate androgéno-dépendants et résistant à la Castration

Ce protocole décrit une méthode nouvellement créée pour la livraison de virus à la prostate murine. Utilisant la technologie CRISPR/Cas9, surexpression du gène ou livraison recombinase Cre, la technique permet l’orthotopic altération de l’expression génique et implémente un modèle de souris roman pour cancer de la prostate.

Livraison de virus de CRISPR Guides pour la Prostate Murine pour modifications géniques

Souris génétiquement modifiées sont des modèles utiles pour l’étude des mécanismes du cancer de la prostate. Nous présentons ici un protocole en vue d’identifier et de disséquer les lobes de la prostate depuis un système urogénital de la souris, de différencier basé sur l’histologie et d’isoler et de culture primaire de cellules prostatiques in vitro comme sphéroïdes pour analyses en aval.

Identification, Caractérisation histologique et Dissection des Lobes de la Prostate souris pour modèles In Vitro sphéroïde 3D Culture

Ici, nous présentons un protocole pour l’injection intra-cardiaque de cellules cancéreuses de la prostate humaine afin de générer un modèle murin avec des lésions de métastases osseuses.

Injection intracardiaque de cellules cancéreuses de la prostate humaine pour créer un modèle murin de xénogreffe de métastases osseuses

Apprenez à établir un modèle murin orthotopique de cancer de la prostate humaine pour étudier les événements moléculaires de la tumeur primaire et les phases initiales de la métastase. Cette méthode permet l'évaluation préclinique de nouvelles approches thérapeutiques.

Pré-clinique Orthotopique modèle murin de cancer de la prostate humaine

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