Name: Ouvrir trachéotomie acide gastrique Aspiration modèle murin de lésion pulmonaire aiguë Résultats dans Maximal aiguë non létaux Lung Injury (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-02-26T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 16 s
Description: Apprenez à induire une lésion pulmonaire aiguë stérile chez la souris par aspiration acide gastrique via trachéotomie ouverte. Ce modèle murin reproduit fidèlement la pneumopathie acide humaine pour explorer des stratégies thérapeutiques.

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Ravi Alluri et Hilliard L. Kutscher sont soutenus par la bourse de formation en recherche institutionnelle Ruth L. Kirschstein National Research Service Award (NRSA) 1T32GM099607.

Tous les matériaux et l&#39;équipement doivent être recueillies et adéquatement organisée avant l&#39;intervention. La procédure doit être conduite avec des transitions en douceur d&#39;une étape à l&#39;autre afin de fournir des données reproductibles cohérentes. Ce protocole fait suite à des politiques institutionnelles établies par le Comité soin et l&#39;utilisation des animaux institutionnels au Buffalo Veterans Affairs Medical Center. NOTE: C57BL / 6 mâles et femelles ont été utilisés pour ce protocole. Il n&#39;y a pas de différence significative de fuite d&#39;albumine entre les sexes. 1. Préparation d&#39;acide chlorhydrique <ol><li> HCl 56,2 mM rendre stérile , en ajoutant 281 pi de HCl 1 à 4,72 ml de solution saline normale stérile (SNS). Titrer à pH 1,25 avec HCl 1 N (≈ 0-50 ul). </li><li> Faire de cette préparation fraîche avant l&#39;accident. Comme un pH bas SNS ne tamponné il assure la chlorhydrique blessure d&#39;acide insulte est transitoire. </li></ol> 2. Anesthésie et trachéale Exposition Technique REMARQUE:Veiller à ce que la procédure de blessure est réalisée dans une hotte avec un filtrage de charbon de bois pour évacuation des gaz anesthésiques. Maintien des conditions stériles est essentiel car cela est une chirurgie de survie. Utiliser des gants stériles et stériliser tous les instruments dans une perle de verre instrument chirurgical avant l&#39;intervention chirurgicale stérilisant sur chaque animal. L&#39;utilisation de rideaux pour isoler le site chirurgical est recommandé de maintenir la stérilité. Utilisez isoflurane comme gaz anesthésique car il fournit une solubilité des gaz du sang relativement faible permettant une induction rapide de l&#39;anesthésie, ainsi que la récupération rapide après la blessure. <ol><li> Commencer par induction dans une chambre d&#39;anesthésie avec 2,75% d&#39;isoflurane dans de l&#39;oxygène avec un taux de 2 L / min. </li><li> Une fois que la souris est correctement anesthésié (ne répondant pas aux pieds pincer assez fort pour ne pas casser la peau ou causer des dommages aux tissus profonds), suspendre la souris par les incisives supérieures avec une longueur de 15 cm de 1-0 suture tressée en soie dans une position couchée sur un 60 o bord incliné de dissection. &lt;/ Li&gt; <li> Veiller à ce que l&#39;anesthésie est maintenue tout au long de la chirurgie en livrant isoflurane à travers un cône de nez. Appliquer une pommade vétérinaire sur l&#39;oeil de la souris pour prévenir la sécheresse. </li><li> Rasez la partie ventrale du cou avec une tondeuse électrique et appliquer une solution antiseptique topique (ie, povidone-iode). Enlever l&#39;excès antiseptique avec de la gaze et laisser sécher (~ 15 - 30 s). </li><li> Infiltrez la ligne médiane du cou de la fourchette sternale à la partie inférieure de la mâchoire avec 100 pi bupivacaïne à 0,5% (pour fournir une analgésie pré-, péri- et post-opératoire). </li><li> Faire 1 - 1,5 cm ligne médiane longitudinale incision dans le cou avec un scalpel ou des ciseaux fins courbes. Pénétrer la membrane aponévrotique entre les glandes salivaires par dissection avec 2 pinces dentelées incurvées pour exposer la trachée (identifiée par les anneaux cartilagineux blancs). </li><li> Toujours en utilisant les 2 pinces dentelées, saisir un côté de la musculature paratrachéale et tirez sur le côté tout en disséquant entre le musfibres longitudinalement à côté de la trachée de cle. </li><li> Une fois que la dissection plan est établi, poursuivre la rétraction du muscle paratrachéal que la seconde paire de pinces est travaillé sous la trachée. Utilisez ces pinces pour placer un 15 cm brin de 1-0 suture tressée en soie dans la pointe de la pince et tirez à travers de placer la suture derrière la trachée. </li></ol> Procédure instillation 3. intra-trachéale <ol><li> Préparer la seringue blessure instillation par remplissage d&#39;une seringue 0,5 ml fixée à une aiguille 22 G avec 0,2 ml d&#39;air, puis de 3,6 ml / kg d&#39;acide chlorhydrique. L&#39;air va agir pour faciliter la dispersion du véhicule, ainsi qu&#39;une manoeuvre de recrutement alvéolaire pour les alvéoles qui peuvent avoir subi une atélectasie lors de l&#39;administration d&#39;anesthésie. REMARQUE: Suivez les directives du IACUC locales concernant l&#39;analgésie post-opératoire et consulter votre vétérinaire local. Soyez prudent sur l&#39;utilisation des analgésiques avec des propriétés anti-inflammatoires avant emploiment ce modèle de lésion pulmonaire stérile. </li><li> Pour administrer la blessure, arrêtez première administration isoflurane. Laisser profondeur de l&#39;anesthésie de la souris à la hausse pendant environ 10-15 s jusqu&#39;à ce qu&#39;il commence à réagir à un pincement de l&#39;orteil forceps. </li><li> commencer immédiatement des mesures d&#39;instillation de blessure. Si profondeur de l&#39;anesthésie est trop profonde l&#39;animal ne respire pas spontanément après une blessure instillation, ce qui est particulièrement vrai pour les acides contenant blessures chlorhydrique. </li><li> Demander à un assistant presser la cage thoracique pour expulser la capacité vitale. </li><li> Utilisez la suture de soie 1-0 tressé placé précédemment autour de la trachée pour assurer la traction en le tirant supérieurement puis insérez l&#39; aiguille de la seringue dans la trachée entre le 1 er et 2 anneaux cartilagineux en dessous du larynx. Le biseau de l&#39;aiguille doit être dirigée vers le chirurgien et l&#39;avance jusqu&#39;à ce que le biseau est juste après la trachée avec l&#39;aiguille en parallèle avec la trachée que possible. </li><li> Relâchez la poitrine juste avant l&#39;administration d&#39;un bolus del&#39;acide chlorhydrique afin d&#39;assurer la dispersion et le dépôt dans les voies aériennes et les alvéoles distale. Déposer le bolus dans environ 0,5 à 0,75 s. Maintenir l&#39;aiguille dans la trachée jusqu&#39;à ce que la première respiration spontanée est prise pour garantir que la totalité du volume des lésions bol est inhalée dans les poumons. </li><li> Fermer l&#39;incision en utilisant soit 1 - 2 agrafes de la peau ou des sutures. </li></ol> 4. Récupération <ol><li> En utilisant une seringue de 5 ml avec une aiguille de 26 G, injecter 1 mL SNS sous-cutanée dans le cou peau du réanimation fluide. Bien qu&#39;il y ait perte de fluide minimale durant la procédure, après la chirurgie de la souris a tendance à boire et peut potentiellement déshydrater. Vous pouvez également fournir SNS via une injection intrapéritonéale. </li><li> Placer la souris dans une chambre chauffée à 37 ° C perfusée avec 100% de O 2. Assurez-vous que la souris est récupéré de façon adéquate avant d&#39;être replacé dans le logement. Surveiller les animaux et ne pas laisser sans surveillance pendant cette période jusqu&#39;à ambulatoire et entièrement recovered. </li></ol> 5. lavage broncho-alvéolaire et de traitement du poumon <ol><li> Provoquer et maintenir une anesthésie isoflurane comme décrit à l&#39;étape 2.1 et l&#39;étape 2.2. Confirmez plan adéquat d&#39;anesthésie en utilisant la méthode toe de pincement décrite à l&#39;étape 2.2. </li><li> Fixer en position couchée sur une planche de dissection et utiliser une boucle de 1-0 suture tressée en soie accroché les incisives supérieures pour étendre le cou. Appliquer une pommade vétérinaire sur les yeux pour prévenir la sécheresse. </li><li> Après avoir enlevé les agrafes de peau du cou, faire une incision longitudinale médiane à travers la peau de la paroi abdominale inférieure à travers le col incision précédente à la mandibule avec des ciseaux. </li><li> Faire une incision médiane dans la musculature péritonéale avec des ciseaux et rétracter les organes abdominaux avec des éponges pour exposer l&#39;espace rétropéritonéal. Si le sang est nécessaire, recueillir de l&#39;aorte abdominale ou la veine cave inférieure à ce point. </li><li> Euthanasier l&#39;animal via exsanguination par sectionnant le abdomaorte inal et la veine cave inférieure. En utilisant une thoracotomie bilatérale dans l&#39;étape suivante une méthode de confirmation secondaire de l&#39;euthanasie sera complétée humainement établie par les directives IACUC. </li><li> Perforer la membrane pour provoquer l&#39;effondrement du poumon. Ensuite, en utilisant les os des ciseaux de coupe, couper la membrane et couper à travers la cage thoracique parallèle et sur les deux côtés du sternum. Utilisez une pince hémostatique de verrouillage pour rétracter le rabat sternal pour faciliter l&#39;injection de 5 ml chaud (37 ° C) une solution saline équilibrée de Hank avec le calcium et le magnésium dans le ventricule droit pour vider la vascularisation pulmonaire. <ol><li> Comme le sang de l&#39;aorte est obtenue pour évaluer les niveaux de cytokine périphériques avant la procédure décrite dans cet article, faire une petite incision dans le ventricule gauche pour fournir des sorties nécessaires pour le sang de quitter la circulation à ras adéquate la vascularisation des poumons en cas de ne pas obtenir le sang . </li></ol></li><li> Prop la planche de dissection à une inclinaison de 60 ° et d&#39;utiliser the procédure décrite à l&#39;étape 2.2 pour faciliter l&#39;insertion d&#39;une G 20 x ½ &quot;canule en acier inoxydable dans la trachée-artère et sécurisé avec une suture 1-0. </li><li> Placez la planche de dissection horizontalement et effectuer un lavage broncho - alvéolaire (BAL). <ol><li> Pour effectuer la BAL attacher deux 5 seringues mL à un robinet 3 voies. Remplir une seringue avec 5 mL de SNS et visser dans le port de robinet. Attachez un vide 5 ml seringue à un port 2 e et enfin attacher port ouvert du robinet à canule intra-trachéale placé à l&#39; étape 5.6. Instiller 1 mL de NS dans les poumons et le lavage avec seconde seringue. </li><li> Répétez l&#39;opération pour un total de 1 5 instillations NS mL en faisant attention que la canule trachéale reste sécurisé et parallèle à la trachée de sorte qu&#39;il ne se déchire pas la trachée. </li></ol></li><li> Pour l&#39;analyse histologique, cathétériser la trachée comme à l&#39;étape 5.7. Fixer les poumons en insufflant avec 10% de formol tamponné neutre à 20 cm H 2 O pendant 24 h. </li><li> Retirer chaque lobe CAREF du poumonutilisant ully ciseaux et des pinces par sectionnant bronchus près du hile. Placer chaque lobe pulmonaire (5 au total) dans une cassette d&#39;histologie avant d&#39;être inclus dans la paraffine. Couper 5 um sections de tissu avec un microtome, et tacher avec de l&#39;hématoxyline et de l&#39;éosine en utilisant des techniques histologiques standard. 6 Morphométrie peuvent également être effectuées sur les lames histologiques pour quantifier l&#39;inflammation sévérité. 4 </li><li> Traiter le BAL récupéré par centrifugation à 1500 g pendant 3 min à 4 ° C. Aliquoter les surnageants de BAL exempts de cellules dans des quantités équivalentes dans 2,0 ml microtubes pour une analyse future. Conserver à -80 ° C. </li><li> Analyser le BAL de la concentration d&#39;albumine par la méthode ELISA, ou tout autre produit biologique présentant un intérêt. 11 Les cellules sédimentées de la BAL peuvent être comptées, les spécimens de cytoslide générés, et colorées avec teinture à base Wright-Giemsa pour le blanc détermination du sang de comptage différentiel des cellules pour évaluer les poumons &#39;réaction inflammatoire. </li></ol>

<ol><li>Knight, P. R., Rutter, T., Tait, A. R., Coleman, E., Johnson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogenesis+of+gastric+particulate+lung+injury%3A+a+comparison+and+interaction+with+acidic+pneumonitis%5BTitle%5D)+AND+%22Anesth+Analg%22%5BJournal%5D)">Pathogenesis of gastric particulate lung injury: a comparison and interaction with acidic pneumonitis.</a> Anesth Analg. 77 (4), 754-760 (1993).</li>
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</ol>

Les auteurs n’ont aucun intérêt financier concurrent à divulguer.

<html> L&#39;objectif était de développer un modèle animal ALI par aspiration acide gastrique qui ressemble étroitement à la physiopathologie qui se produit chez l&#39;homme au cours du développement de pneumopathie acide et SDRA ultérieures. Lors de l&#39; élaboration d&#39; un modèle, nous avons choisi une espèce animale qui offre l&#39; acquisition élevée de données de débit en raison de son faible coût, cycle de reproduction court, et un système immunologique bien compris avec une abondance d&#39;outils d&#39; enquêt...

SDRA est caractérisée par une inflammation pulmonaire répandue et est cliniquement considéré comme l&#39;essoufflement aigu de souffle avec hypoxémie. Ces symptômes se produisent souvent moins de 24 h après un événement d&#39;incitation telles que les traumatismes, la septicémie, transfusionnelle réactions de sang ou d&#39;aspiration. Elle se caractérise histopathologique par alvéolite neutrophile (ie, une inflammation généralisée) localisée à l&#39; épithélium alvéolaire et l&#39; endothélium vasculaire entraînant une fuite de protéines et de formation de la membrane hyaline ultérieurement. Aspiration est classé comme une pneumonie chimique ou d&#39;une pneumonie d&#39;aspiration. 1 Le composant acide de l&#39;aspiration gastrique contribue à la fois la pneumonite et la prédilection pour développer une pneumonie bactérienne secondaire. La pneumonie par aspiration est l&#39;un des principaux facteurs de risque pour ALI et le développement ultérieur du SDRA. 2 aspiration gastrique est un événement aigu défini comme l&#39;inhalation de matières de til estomac avec ou sans flore oropharyngée dans les voies aériennes au-delà des cordes vocales. Les teneurs en aspirés peuvent contenir un fluide à faible pH de l&#39;estomac, des bactéries, le sang ou les particules alimentaires. aspiration gastrique se produit souvent chez les patients de l&#39;unité de soins intensifs (USI), qui sont généralement dans un état de jeûne et donc placés sur un inhibiteur de la pompe à protons pour limiter l&#39;aspiration du contenu gastrique acidifiés. L&#39;incidence de l&#39;ALI dans la population des soins intensifs aux Etats-Unis est de 2,5 - 5 fois plus élevé par rapport à la population générale des patients. 3 Malheureusement, ces conditions prédisposant conduisent souvent à un état de prolifération bactérienne dans l&#39;estomac qui peuvent conduire à des séquelles plus graves dans les poumons suite à un événement d&#39;aspiration, comme une aspiration gastrique est un facteur de risque indépendant pour le développement de la pneumonie bactérienne secondaire (SBP) , ALI et SDRA. aspiration gastrique a deux composantes principales: l&#39;acide chlorhydrique et le contenu gastrique, ce qui peut ou non contenir des bactériesou de particules de nourriture. Dans le modèle de rongeur le composant acide seul d&#39;aspiration gastrique produit une réponse inflammatoire initiale en raison de la blessure caustique directe de faible pH sur épithélium des voies respiratoires. Ceci est suivi d&#39;une infiltration neutrophile et une réponse inflammatoire de 4 - 6 heures. 4 Ces deux facteurs conduisent finalement à la destruction de l&#39; intégrité microvasculaire pulmonaire conduisant ainsi à une extravasation de liquide et de protéines dans les alvéoles et les voies respiratoires. Pour comprendre ce physiopathologie et d&#39;étudier plus avant les interventions thérapeutiques possibles, il est important de développer et caractériser un modèle animal qui élucide les mécanismes sous-jacents impliqués. seule une aspirée acide doit être volumineux ou avec un pH suffisamment bas pour contourner la capacité tampon de l&#39;arbre respiratoire et atteindre les alvéoles. Si cela ne se produit pas, seule une partie supérieure, la conduite des blessures des voies respiratoires transitoire se produit qui est moins susceptible de conduire à des séquelles graves du SDRA. 5 &lt;/ Sup&gt; Émuler un événement d&#39;aspiration avec précision l&#39;épithélium alvéolaire lésée, il est important de contourner les défenses naturelles de l&#39;animal. En utilisant un modèle d&#39;aspiration de la souris pour produire un ALI qui imite la blessure d&#39;acide gastrique observée chez l&#39;homme, il faut tenir compte des différences dans l&#39;arbre de la trachée-bronchique. La technique de trachéotomie ouverte que cette méthode utilise contourne les différences entre les souris et les arbres respiratoires humaines et modèles, la blessure d&#39;une manière qui reproduit ALI fois physiologiquement et histologiquement. Historiquement, intubation trachéale a été utilisé pour générer ALI, mais il est considéré comme difficile à réaliser chez les souris sans blessure laryngé. Par conséquent, cette méthode offre une alternative potentielle qui a donné des résultats cohérents entre plusieurs chercheurs et avec la procédure mortalité attribuée minime.

<table><tbody><tr><td>seringue, 1 cc</td><td>Seringue 309628</td><td></td><td></td>Becton Dickinson</tr><tr><td>, 5 cc</td><td>Becton Dickinson</td><td>309646</td><td></td></tr><tr><td>aiguille, 22 G x 1 1/2 « </td><td>Becton Dickinson</td><td>305159</td><td></td></tr><tr><td>aiguille, 26 G x 1 1/2 »</td> <td>Becton Dickinson</td><td>305111</td><td></td></tr><tr><td>1-O Suture en soie tressée</td><td>Harvard Apparatus</td><td>517730</td><td></td></tr><tr><td>3 » Courbé pince dentelée pour tissus</td><td>Fine Science Tools</td><td>11065-07</td><td></td></tr><tr><td>Pince à tissus incurvés « dentée » de 3 po, 1 x 2 dents</td><td>Fine Science Tools</td><td>11067-07</td><td></td></tr><tr><td>Ciseaux de micro-dissection incurvés de 4 po</td><td>Fine Science Tools</td><td>14061-10</td><td></td></tr><tr><td>ciseaux à ressort pour couper les os</td><td>Fine Science Tools</td><td>16144-13</td><td></td></tr><tr><td>Hémostat verrouillable incurvée de 3 1/2 po</td><td>Fine Science Tools</td><td>13021-12</td><td></td></tr><tr><td>Agrafeuse cutanée jetable</td><td>3M</td><td>DS-25</td><td></td></tr><tr><td>canule trachéale (adaptateur de tube en acier inoxydable de calibre 20 x 1/2 po)</td><td>Becton Dickinson</td><td>408210</td><td></td></tr><tr><td>Planche</td><td></td><td></td><td></td>de dissection inclinée à 60</tr><tr><td>degrés 0,5 % de bupivacaïne</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>isoflurane</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr>Applicateur <td></td><td></td><td></td><td>en coton bétadine et coton-tige « Q-tip »</td></tr></tbody></table>

ouvrir trachéotomie acide gastrique aspiration modèle murin de lésion pulmonaire aiguë résultats dans maximal aiguë non létaux lung injury

Open Tracheostomy Gastric Acid Aspiration Murine Model of Acute Lung Injury Results in Maximal Acute Nonlethal Lung Injury

pneumonite Acid est une cause majeure de lésion pulmonaire aiguë stérile (ALI) chez les humains. pneumonite Acid couvre le spectre clinique asymptomatique au syndrome de détresse respiratoire aiguë (SDRA), caractérisé par alvéolite neutrophile, et des blessures à la fois l&#39;épithélium alvéolaire et l&#39;endothélium vasculaire. Cliniquement, SDRA est définie par l&#39;apparition soudaine d&#39;hypoxémie, infiltrats pulmonaires bilatéraux inégaux et un œdème pulmonaire non cardiogénique. Les études humaines nous ont fourni des informations précieuses sur les changements physiologiques et inflammatoires dans les poumons causées par SDRA, qui a conduit à diverses hypothèses sur les mécanismes sous-fifre. Malheureusement, les difficultés qui déterminent l&#39;étiologie du SDRA, ainsi qu&#39;une large gamme de physiopathologie ont abouti à un manque d&#39;informations critiques qui pourraient être utiles dans l&#39;élaboration de stratégies thérapeutiques. modèles animaux translationnelle sont précieux lorsque leur pathogenèse et la physiopathologie REPRODUC précisele concept ea prouvé à la fois in vitro et les paramètres cliniques. Bien que les modèles de grands animaux (par exemple, les moutons) partagent des caractéristiques de l&#39;anatomie de l&#39; arbre de la trachée-bronchiques humaines, des modèles murins fournissent une foule d&#39;autres avantages , notamment: un faible coût; prêts à court cycle de reproduction lui-même pour l&#39;acquisition de données plus important; un système immunitaire bien compris; et un génome bien caractérisée conduisant à la disponibilité d&#39;une variété de délétion du gène et des souches transgéniques. Un modèle robuste de pH induite par SDRA faible nécessite une murin ALI qui cible principalement l&#39;épithélium alvéolaire, secondairement l&#39;endothélium vasculaire, ainsi que les petites voies respiratoires menant aux alvéoles. En outre, une blessure reproductible avec de larges différences entre les insultes préjudiciables et non préjudiciables est important. Le modèle d&#39;aspiration d&#39;acide gastrique murine présenté ici en utilisant l&#39;acide chlorhydrique emploie une trachéotomie ouverte et recrée un scénario pathogène qui reproduit le faible pneumon pHitis blessures chez les humains. En outre, ce modèle peut être utilisé pour examiner l&#39; interaction d&#39;un faible pH insulte avec d&#39; autres entités pulmonaires dommageables (par exemple, les particules de nourriture, des bactéries pathogènes).

Pulmonaire histopathologie du modèle murin de l'acide Aspiration Pneumopathie Les souris ont été blessés comme décrit ci - dessus et les poumons ont été retirés 24 heures après un pH faible insulte, sectionnés et H &amp; E colorées (Figure 1). Les cellules nécrotiques, la perte de l'architecture du parenchyme pulmonaire, les cellules et les débris dans les espaces aériens et importante infiltration PMN sont clair...

Ce protocole induit une lésion pulmonaire aiguë chez une souris qui est étroitement liée à la pathogenèse de la pneumopathie acide observée chez l’homme. Nous générons une lésion pulmonaire aiguë non létale maximale à faible pH et tenons compte des différences dans la structure respiratoire anatomique entre rongeurs et humains à l’aide d’une trachéotomie ouverte couplée à une libération de la pression circonférentielle.

Ouvrir trachéotomie acide gastrique Aspiration modèle murin de lésion pulmonaire aiguë Résultats dans Maximal aiguë non létaux Lung Injury

Acid pneumonitis is a major cause of sterile acute lung injury (ALI) in humans. Acid pneumonitis spans the clinical spectrum from asymptomatic to acute ...

L’objectif global de ce modèle d’aspiration d’acide gastrique murin est de produire une lésion pulmonaire aiguë stérile chez une souris qui est étroitement liée à la pathogenèse de la pneumonie acide observée chez l’homme. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le cadre des soins intensifs sur l’identification de stratégies thérapeutiques susceptibles de réduire la gravité et d’améliorer l’issue des lésions pulmonaires aiguës stériles. Le principal avantage de cette technique est qu’elle produit un modèle cliniquement pertinent qui peut tirer parti des nombreux animaux génétiquement modifiés disponibles pour disséquer les mécanismes impliqués.Bruce Davidson, Ph. D., collègue et collaborateur du corps professoral, et Barbara Mullen, notre associée principale de recherche commerciale, feront la démonstration de la procédure. Induire l’anesthésie dans une chambre contenant 2,75 % d’isoflurane. Confirmez que l’anesthésie a été obtenue par une absence de réponse à un pincement de l’orteil et l’application d’une pommade sur les yeux de l’animal.Utilisez une tondeuse électrique pour raser la partie ventrale du cou et désinfecter la zone chirurgicale. Ensuite, utilis

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Un modèle murin de blessure ventilateur pulmonaire induite est un outil important pour étudier une lésion pulmonaire...

La ventilation à pression contrôlée pour induire lésion pulmonaire aiguë chez la souris

Cet article présente une méthode rapide et simple pour l'administration de la bléomycine directement dans la trachée de souris par intubation. Les principaux avantages de cette méthode est qu'il est hautement reproductible, facile à maîtriser, et ne nécessite pas d'équipement spécialisé ou de longs temps de récupération.

Une méthode améliorée pour Rapid intubation de la trachée chez la souris

Présenté ici est une procédure étape par étape pour induire des dommages aigus de poumon chez les souris par l'instillation intratracheal directe de lipopolysaccharide et pour effectuer l'analyse FACS des échantillons de sang, du fluide de lavage bronchoalveolar, et du tissu de poumon. L'invasivité minimale, la manipulation simple, la bonne reproductibilité, et la titration de la sévérité de la maladie sont des avantages de cette approche.

Induire une lésion pulmonaire aigue chez la souris par instillation directe du lipopolysaccharide intratrachéal

L'instillation sélective d'acide intra-bronchique au poumon gauche chez les souris a comme conséquence des dommages aigus uniaux et auto-limités de poumon qui modèlele le syndrome aigu humain de détresse respiratoire (ARDS) induit par l'aspiration gastrique d'acide gastrique.

Un modèle de lésions pulmonaires aigues autolimitées par l'instillation unilatérale de l'acide intrabronchique

Nous décrivons un modèle de syndrome de détresse respiratoire aiguë (SDRA) induit par l’acide chlorhydrique chez des porcelets recevant une sédation avec des agents halogénés, l’isoflurane et le sévoflurane, à l’intermédiaire d’un dispositif utilisé pour la sédation inhalée en soins intensifs. Ce modèle peut être utilisé pour étudier les mécanismes biologiques des agents halogénés sur les lésions pulmonaires et la réparation.

Administration d’agents halogénés dans un modèle porcin de syndrome de détresse respiratoire aiguë via un dispositif de type unité de soins intensifs

Le présent protocole décrit un modèle de lésion pulmonaire chez la souris utilisant de l’acide oléique pour imiter le syndrome de détresse respiratoire aiguë (SDRA). Ce modèle augmente les médiateurs inflammatoires de l’œdème et diminue la compliance pulmonaire. L’acide oléique est utilisé sous forme de sel (oléate) car cette forme physiologique évite le risque d’embolie.

Modèle murin du syndrome de détresse respiratoire aiguë induit par l’acide oléique

Ce manuscrit décrit l’établissement d’un modèle infectieux de pneumonie chez la souris et la caractérisation respective de la résolution des lésions ainsi que les méthodes de croissance bactérienne et d’instillation intratrachéale. Une nouvelle approche utilisant la cytométrie en flux de grande dimension pour évaluer le paysage immunitaire est également décrite.

Modèle expérimental pour évaluer la résolution de la pneumonie

Un modèle chirurgical murin pour créer une lésion de reperfusion d’ischémie pulmonaire gauche (IR) tout en maintenant la ventilation et en évitant l’hypoxie.

Un modèle murin d’intubation orotrachéale et de chirurgie de reperfusion d’ischémie pulmonaire ventilée

Ici, nous proposons un protocole pour l’administration intratrachéale de lipopolysaccharides (LPS) via une intubation endotrachéale oropharyngée non invasive. Cette méthode minimise le traumatisme de l’intervention chirurgicale pour l’animal et délivre avec précision le LPS à la trachée, puis aux poumons.

Instillation intratrachéale non invasive de lipopolysaccharides chez la souris

Le protocole décrit une méthode réalisable, fiable et reproductible de clampage hilaire pulmonaire gauche qui peut être utilisée pour étudier les lésions d’ischémie-reperfusion pulmonaire dans des modèles murins.

Modèle murin de pince hilaire pulmonaire gauche de lésion de reperfusion d’ischémie pulmonaire

Dans cette étude, une technique d’instillation endotrachéale non invasive a démontré le développement d’AL chez les rats à l’aide d’un laryngoscope basique pour garantir une livraison précise de LPS aux poumons. Le LPS est injecté via un tube endotrachéal à l’aide d’un laryngoscope. L’ampleur de la lésion pulmonaire est évaluée à plusieurs moments.

Administration endotrachéale non invasive de lipopolysaccharide pour induire une lésion pulmonaire aiguë chez les rongeurs

Apprenez à induire une lésion pulmonaire aiguë stérile chez la souris par aspiration acide gastrique via trachéotomie ouverte. Ce modèle murin reproduit fidèlement la pneumopathie acide humaine pour explorer des stratégies thérapeutiques.

Ouvrir trachéotomie acide gastrique Aspiration modèle murin de lésion pulmonaire aiguë Résultats dans Maximal aiguë non létaux Lung Injury (Vidéo) | JoVE Journal

Ouvrir trachéotomie acide gastrique Aspiration modèle murin de lésion pulmonaire aiguë Résultats dans Maximal aiguë non létaux Lung Injury

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