Génération d'Intégration-libres induits des cellules souches pluripotentes à partir de cellules mononucléaires sang périphérique humain utilisant épisomique Vecteurs

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1 janvier 2017

10.3791/55091-v

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Wei Wen¹ , Jian-Ping Zhang¹ , Wanqiu Chen² , Cameron Arakaki² , Xiaolan Li¹^,² , David Baylink² , Gary D. Botimer³ , Jing Xu¹ , Weiping Yuan¹ , Tao Cheng¹^,⁴^,⁵^,⁶^,⁷ , Xiao-Bing Zhang¹^,²

¹State Key Laboratory of Experimental Hematology, Institute of Hematology and Blood Disease Hospital, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, ²Division of Regenerative Medicine, Department of Medicine, Loma Linda University, ³Department of Orthopaedic Surgery, Loma Linda University, ⁴Center for Stem Cell Medicine, Chinese Academy of Medical Sciences, ⁵Department of Stem Cell & Regenerative Medicine, Peking Union Medical College, ⁶Collaborative Innovation Center for Cancer Medicine, ⁷Tianjin Key Laboratory of Blood Cell Therapy and Technology

Ce protocole décrit une méthode détaillée pour la génération efficace d’iPSC sans intégration à partir de cellules sanguines périphériques humaines adultes. Grâce à l’utilisation de quatre vecteurs épisomaux basés sur oriP/EBNA pour exprimer les facteurs de reprogrammation, KLF4, MYC, BCL-XL ou OCT4 et SOX2, des milliers de colonies d’iPSC peuvent être obtenues à partir de 1 mL de sang périphérique.