Name: Murine Transplantation de peau pleine épaisseur (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-01-02T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 59 s
Description: Découvrez la transplantation de peau pleine épaisseur chez la souris pour étudier les réponses alloimmunes et le rejet de greffe. Cette méthode simple permet de surveiller efficacement la vascularisation et la tolérance donneur-spécifique.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ce travail a été financé par le NIH subvention R01AI077610.

Toutes les procédures ont été menées en conformité avec le Guide pour le soin et l&#39;utilisation des animaux de laboratoire de l&#39;Institut national de la santé (NIH) et ont été approuvés par le Comité de l&#39;Université Johns Hopkins et l&#39;utilisation des soins aux animaux (JHUACUC). Les procédures spécifiques ont été réalisées dans le cadre du protocole ACUC approuvé MO13M292 et MO13M370. Récolte de la peau 1. Donateur <ol><li> Anesthésier la souris donneuse avec de l&#39;isoflurane (induction vaporiseur à 4%, la maintenance à 1 - 2% à travers le cône de la souris). Utilisez l&#39;orteil retrait de pincement réflexe pour contrôler la profondeur de l&#39;anesthésie. </li><li> L&#39; utilisation d&#39; un rasoir électrique, de se raser le dos de l&#39;animal et la désinfecter avec 10% de povidone iode (par exemple, Betadine). </li><li> Avec des ciseaux stériles, des gants et une technique aseptique, récolte donneur peau du dos de la hanche au cou, avec dissection au niveau du tissu conjonctif aréolaire. </li><li> Euthanasier l&#39;animal par dislocation cervicale après la récolte desgreffe de peau. </li><li> Sous un microscope, séparer le tissu conjonctif, le tissu adipeux, et pannicule carnosus de la peau du dos en utilisant des ciseaux fins de ténotomie. Le carnosus pannicule est une mince musculaire transparente responsable des mouvements saccadés de la peau. </li><li> En utilisant la technique des instruments stériles, découper 15 mm x 15 mm greffes de la peau du dos pour un 10 mm x 10 mm à 15 mm lit de greffe x 15 mm. </li><li> Stocker les greffes sur des gazes imbibées avec une solution saline tamponnée au phosphate stérile (PBS) dans une boîte de Pétri sur de la glace. NOTE: 8 - 10 greffes peuvent être obtenues à partir d&#39;une souris donneuse. </li></ol> Transplant de la peau 2. Destinataire <ol><li> Anesthésier la souris receveuse avec isoflurane (induction vaporiseur à 4%, la maintenance à 1 - 2% à travers le cône de la souris). Utilisez l&#39;orteil retrait de pincement réflexe pour contrôler la profondeur de l&#39;anesthésie. </li><li> Administrer 0,02 mg / kg de poids corporel de la buprénorphine pour le soulagement de la douleur postopératoire. </li><li> Rasez le côté du dos de l&#39;animal, où la greffe will être inséré et désinfecter avec 10% de povidone iode. </li><li> Avec des ciseaux, couper 10 mm x 10 mm à 15 mm x 15 mm carré de peau. La taille du défaut devrait être légèrement plus grande (10%) que le greffon. Coupez aussi superficiellement que possible. Prenez soin de préserver la carnosus pannicule et les vaisseaux. Le panniculus carnosus peut être distinguée de la planche de bord sous-jacent, par sa mobilité et les vaisseaux sanguins superficiels qui courent à lui. </li><li> Positionner le greffon sur le lit de greffe, ce qui évite des plis le long des bords. </li><li> Placez 8 sutures sur les coins et sur le milieu de chaque bord. Pour chaque suture, passer l&#39;aiguille à travers le greffon et ensuite à travers l&#39;carnosus pannicule du greffon lit sous la peau bénéficiaire environnante. </li><li> Retirer le masque d&#39;anesthésie et de laisser l&#39;animal récupérer partiellement de l&#39;anesthésie avant d&#39;appliquer le pansement adhésif. </li><li> Envelopper la souris receveuse dans un pansement adhésif avec de la gaze repliée sur la greffe. Faire le bandage en combinant deux bandages, coupela partie adhésive de l&#39;une et de placer les deux tampons absorbants ensemble. </li><li> Surveiller la souris lors de la récupération de près pour assurer que le bandage ne limite pas le thorax excursion et de respirer. Retirez le bandage si la fréquence respiratoire diminue ou l&#39;animal commence à haleter ou souffle faiblement. </li></ol> 3. Soins postopératoires <ol><li> Administrer enrofloxacine 5 mg / kg après une intervention chirurgicale pour la prophylaxie de l&#39;infection. </li><li> Placez la souris transplantées dans une cage propre sur un coussin chauffant au micro-ondes jusqu&#39;à ce qu&#39;il récupère complètement de l&#39;anesthésie. </li><li> Observez la souris pendant 1 h après l&#39;opération avant de le retourner à l&#39;installation de logements. </li><li> Sept jours après la chirurgie, anesthésier la souris comme dans l&#39;étape 2.1. Retirez le bandage en coupant seulement par la face ventrale du bandage. </li><li> Observer et palper la greffe le jour suivant pour des signes de scabbing, la contraction ou la dureté. Si elle est présente, la greffe peut ne pas avoir atteint vasculariza bontion et devrait être considérée comme une défaillance technique. </li><li> Surveillez quotidiennement les signes de rejet. Prendre en considération les greffes rejetée lorsque ≥90% du tissu greffé devient nécrotique. </li><li> Euthanasier les animaux rejetés et les récolter pour l&#39;analyse. </li></ol>

<ol><li>Furtmuller, G. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+Hind+Limb+Transplantation+in+the+Mouse%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Orthotopic Hind Limb Transplantation in the Mouse.</a> J Vis Exp. , (2016).</li>
<li>Oh, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Novel+Microsurgical+Model+for+Heterotopic%2C+En+Bloc+Chest+Wall%2C+Thymus%2C+and+Heart+Transplantation+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">A Novel Microsurgical Model for Heterotopic, En Bloc Chest Wall, Thymus, and Heart Transplantation in Mice.</a> J Vis Exp. , (2016).</li>
<li>Oberhuber, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+cervical+heart+transplantation+model+using+a+modified+cuff+technique%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Murine cervical heart transplantation model using a modified cuff technique.</a> J Vis Exp. , e50753(2014).</li>
<li>Jones, T. R., Shirasugi, N., Adams, A. B., Pearson, T. C., Larsen, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravital+microscopy+identifies+selectins+that+regulate+T+cell+traffic+into+allografts%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Intravital microscopy identifies selectins that regulate T cell traffic into allografts.</a> J Clin Invest. 112, 1714-1723 (2003).</li>
<li>Celli, S., Albert, M. L., Bousso, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualizing+the+innate+and+adaptive+immune+responses+underlying+allograft+rejection+by+two-photon+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Visualizing the innate and adaptive immune responses underlying allograft rejection by two-photon microscopy.</a> Nat Med. 17, 744-749 (2011).</li>
<li>Medawar, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+behaviour+and+fate+of+skin+autografts+and+skin+homografts+in+rabbits%3A+A+report+to+the+War+Wounds+Committee+of+the+Medical+Research+Council%5BTitle%5D)+AND+%22J+Anat%22%5BJournal%5D)">The behaviour and fate of skin autografts and skin homografts in rabbits: A report to the War Wounds Committee of the Medical Research Council.</a> J Anat. 78, 176-199 (1944).</li>
<li>Billingham, R. E., Brent, L., Medawar, P. B., Sparrow, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+studies+on+tissue+transplantation+immunity.+I.+The+survival+times+of+skin+homografts+exchanged+between+members+of+different+inbred+strains+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+R+Soc+Lond+B+Biol+Sci%22%5BJournal%5D)">Quantitative studies on tissue transplantation immunity. I. The survival times of skin homografts exchanged between members of different inbred strains of mice.</a> Proc R Soc Lond B Biol Sci. 143, 43-58 (1954).</li>
<li>Garrod, K. R., Cahalan, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+skin+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Murine skin transplantation.</a> J Vis Exp. , (2008).</li>
<li>Schmaler, M., Broggi, M. A., Rossi, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplantation+of+tail+skin+to+study+allogeneic+CD4+T+cell+responses+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Transplantation of tail skin to study allogeneic CD4 T cell responses in mice.</a> J Vis Exp. , e51724(2014).</li>
<li>Bergstresser, P. R., Toews, G. B., Gilliam, J. N., Streilein, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unusual+numbers+and+distribution+of+Langerhans+cells+in+skin+with+unique+immunologic+properties%5BTitle%5D)+AND+%22J+Invest+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Unusual numbers and distribution of Langerhans cells in skin with unique immunologic properties.</a> J Invest Dermatol. 74, 312-314 (1980).</li>
<li>Chen, H. D., Silvers, W. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+Langerhans+cells+on+the+survival+of+H-Y+incompatible+skin+grafts+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Invest+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Influence of Langerhans cells on the survival of H-Y incompatible skin grafts in rats.</a> J Invest Dermatol. 81, 20-23 (1983).</li>
<li>Chong, A. S., Alegre, M. L., Miller, M. L., Fairchild, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lessons+and+limits+of+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harb+Perspect+Med%22%5BJournal%5D)">Lessons and limits of mouse models.</a> Cold Spring Harb Perspect Med. 3, a015495(2013).</li>
<li>Mayumi, H., Nomoto, K., Good, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+surgical+technique+for+experimental+free+skin+grafting+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Jpn+J+Surg%22%5BJournal%5D)">A surgical technique for experimental free skin grafting in mice.</a> Jpn J Surg. 18, 548-557 (1988).</li>
<li>McFarland, H. I., Rosenberg, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skin+allograft+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Immunol%22%5BJournal%5D)">Skin allograft rejection.</a> Curr Protoc Immunol. Chapter 4, (2009).</li>
<li>Lee, C. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preventing+Allograft+Rejection+by+Targeting+Immune+Metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+reports%22%5BJournal%5D)">Preventing Allograft Rejection by Targeting Immune Metabolism.</a> Cell reports. 13, 760-770 (2015).</li>
<li>Pollizzi, K. N., Powell, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrating+canonical+and+metabolic+signalling+programmes+in+the+regulation+of+T+cell+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Integrating canonical and metabolic signalling programmes in the regulation of T cell responses.</a> Nat Rev Immunol. 14, 435-446 (2014).</li>
<li>Pearce, E. L., Poffenberger, M. C., Chang, C. H., Jones, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fueling+immunity%3A+insights+into+metabolism+and+lymphocyte+function%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Fueling immunity: insights into metabolism and lymphocyte function.</a> Science. 342, 1242454(2013).</li>
</ol>

Les auteurs n&#39;ont rien à dévoiler.

Depuis son introduction par Medawar, d&#39; abord dans des études humaines, puis chez les lapins et les souris, la transplantation de la peau a été un modèle précieux pour l&#39;étude des réponses immunitaires allogéniques 6,7. Dans ce manuscrit, nous présentons un modèle de grande échelle, non-vascularisées, la transplantation de peau totale en utilisant la peau supérieure et inférieure du dos. Diverses méthodes alternatives, y compris en utilisant la peau de la queue ou la peau de l&#39; oreille de la souri...

La transplantation d&#39;organes est le traitement de choix pour les patients souffrant d&#39;insuffisance d&#39;organes en phase terminale, et les résultats se sont améliorés remarquablement avec les progrès des interventions chirurgicales et des protocoles d&#39;immunosuppression. Cependant, immunosuppression à long terme est associée à des effets secondaires importants, et le développement de nouvelles stratégies qui promeuvent la tolérance demeure l&#39;objectif de la recherche en transplantation moderne. De nombreux modèles animaux ont été développés pour la recherche fondamentale en transplantation, pour étudier les mécanismes de rejet d&#39;allogreffe et de tester immunosuppression approches pour prévenir le rejet de greffe et pour la promotion de la tolérance à long terme 1-3. Des modèles de souris sont devenus le pilier de la recherche immunologique due à la disponibilité exclusive et vaste d&#39;anticorps diagnostiques et thérapeutiques et les souches consanguines et transgéniques bien définies. la transplantation de la peau est une procédure simple qui ne nécessite pas de compétences particulières de microchirurgie et peutêtre facilement contrôlé postopératoires. Pris ensemble, la transplantation de la peau de la souris a été un outil exceptionnel pour étudier de nombreux aspects impliqués dans la réponse allo, y compris la livraison de l&#39; antigène, le trafic cellulaire, et la destruction des tissus pendant le rejet de greffe 4,5. Ici, nous montrons la procédure étape par étape pour la transplantation de la peau de pleine épaisseur en utilisant le modèle de la souris, et nous décrivons les étapes importantes nécessaires pour une prise de greffe réussie de la peau transplantée.

<table><tbody><tr><td>Micro pince droite</td><td>Sigma</td><td>F4017</td><td></td></tr><tr><td>Micro pince courbe</td><td>Aesculap</td><td>BD333R</td><td></td></tr><tr><td>Ciseaux de ténotomie Stevens courbés</td><td>Aesculap</td><td>BC905R</td><td></td></tr><tr><td>Mayo ciseaux de dissection</td><td>Sigma</td><td>S3146</td><td></td></tr><tr><td>Porte-micro aiguille</td><td>Aesculap</td><td>BM563R</td><td></td></tr><tr><td>Gaze stérile</td><td>Covidien</td><td></td><td></td>441218</tr><tr><td>6-0 Suture en nylon</td><td>MWI</td><td>31849</td><td></td></tr><tr><td>Bandes de plastique Bande&#45 ; Aidez</td><td>Johnson & Johnson</td><td></td><td>Obtenu de la pharmacie</td></tr><tr><td>10 cm Boîte de Pétri</td><td>Fisherbrand</td><td>FB0875712</td><td></td></tr><tr>Qualité<td>PBS</td><td>Biologique</td><td>119069131</td><td></td></tr><tr><td>Buprénorphine</td><td></td><td></td><td>Numéro DEA requis ; Obtenu de la pharmacie hospitalière</td></tr><tr><td>Enrofloxacine Bayer</td><td>Health Care</td><td>186599</td><td></td></tr></tbody></table>

murine transplantation de peau pleine épaisseur

Murine Full-thickness Skin Transplantation

Murine transplantation pleine épaisseur peau est un modèle in vivo bien établi pour étudier la réponse allo et le rejet de greffe. En dépit de son application limitée à l&#39;homme, la transplantation de la peau chez la souris a été largement utilisé pour la recherche sur la transplantation. La procédure est facile à apprendre et à exécuter, et il ne nécessite pas de techniques de microchirurgie délicates, ni une formation approfondie. De plus, le rejet de greffe dans ce modèle se produit dans une réaction immunologique très reproductible et est aisément contrôlée par inspection directe et palpation. En outre, la transplantation de la peau secondaire avec des greffes de donneurs appariés ou de la peau par des tiers peut être effectuée sur des modèles plus complexes de transplantation comme une méthode alternative et simple pour évaluer la tolérance spécifique du donneur. Les complications sont faibles et sont en général limités à une surdose d&#39;anesthésie ou de détresse respiratoire après la procédure. échec de la greffe, d&#39;autre part, se produit fréquemment par suite d&#39;une mauvaise préparation du grà l&#39;arrière, un mauvais positionnement dans le lit de greffe, ou un emplacement inapproprié de la bande. Dans cet article, nous présentons un protocole de pleine épaisseur transplantation de la peau chez la souris et de décrire les étapes importantes nécessaires à une procédure réussie.

Le placement du bandage sur la souris receveuse est une étape importante de la procédure. La greffe de peau est positionné sur le tronc du destinataire, entre l&#39;épaule, la hanche et la colonne vertébrale (Figure 1). Le bandage est réalisée avec de la gaze pliée et la combinaison de deux bandes adhésives en plastique. La souris receveuse est placé avec le greffon vers le bas au-dessus de la toile métallique sur le centre de la bande. L&#39;utilisation de deux micro pi...

Murine transplantation pleine épaisseur peau est un modèle bien établi pour étudier le rejet dans un cadre de allo. Ici, nous vous proposons un tutoriel de chaque étape impliquée dans la réalisation d&#39;une / c BALB -&gt; C57BL / 6 de pleine épaisseur greffe de peau.

Murine Transplantation de peau pleine épaisseur

Murine full-thickness skin transplantation is a well-established in vivo model to study alloimmune response and graft rejection. Despite its limited ...

L'objectif général de cet article vidéo est de réaliser une greffe de peau en épaisseur totale et de décrire les étapes importantes nécessaires à la réussite de cette procédure. La greffe de peau en épaisseur totale chez la souris est un modèle bien établi pour l'étude des réponses allo-immunes et du rejet de greffe. La procédure est facile à réaliser et ne nécessite pas de techniques microchirurgicales délicates.Le rejet de greffe, dans ce modèle, survient selon une réaction immunologique très reproductible et peut être facilement surveillé par inspection directe et palpation. En outre, une greffe cutanée secondaire avec des greffons cutanés provenant du même donneur ou d'un tiers peut être réalisée pour des modèles de transplantation plus complexes, offrant ainsi une méthode alternative et simple pour évaluer la tolérance spécifique au donneur. Après avoir anesthésié une souris donneur conformément au protocole décrit, utilisez un rasoir électrique pour raser le dos de l'animal.Et, avec de la povidone-iodée à 10 %, désinfecter la peau. À l’aide de ciseaux et d’une dissection émoussée, prélever la peau dorsale du donneur de la hanche jusqu’au cou au niveau du tissu conjonctif aréolaire. Placer la peau dorsale sous un microscope et utiliser des ciseaux à ténotomie fins pour séparer le tissu conjonctif et le pannicule carnosus de la peau.Découper des greffons de 15 par 15 millimètres dans la peau du dos pour un lit de greffe de 10 par 10 à 15 par 15 millimètres. Conserver les greffons sur une gaze imprégnée de PBS dans une boîte de Pétri, puis placer celle-ci sur de la glace. Anesthésier la souris receveuse conformément au protocole indiqué dans le texte.Raser le flanc du dos de l'animal, là où la greffe sera insérée, puis administrer 0,02 milligramme par kilogramme de buprénorphine pour le soulagement de la douleur postopératoire. Utiliser de la povidone-iodine à 10 % pour désinfecter la zone. À l’aide de ciseaux, et de manière aussi superficielle que possible, découper un carré de peau de 10 × 10 à 15 × 15 millimètres.Veillez à préserver le panniculus carnosus et les vaisseaux sanguins qui courent en superficie par rapport à celui-ci. Ensuite, positionnez la greffe sur le lit de greffe en évitant les plis sur les bords. Puis, placez huit points de suture aux coins de la greffe et à mi-chemin le long de chaque bord, en passant l'aiguille à travers la greffe, puis à travers le panniculus carnosus du lit de greffe, sous la peau réceptrice environnante.Placer un tampon de gaze plié sur un pansement doublé, puis positionner l'animal sur le pansement, côté greffe vers le bas, en retirant le masque anesthésique pour permettre à l'animal de récupérer partiellement. Ensuite, enrouler le pansement autour de l'animal. Le facteur le plus critique dans le processus de greffe est la révascularisation du tissu greffé par l'envahissement des vaisseaux de l'hôte vers la greffe.La dissection du panniculus carnosus et le positionnement correct du pansement sont les étapes les plus importantes. Immédiatement après la chirurgie, administrer 5 milligrammes par kilogramme d'enrofloxacine pour la prophylaxie des infections. Placer la souris transplantée dans une cage propre jusqu'à ce qu'elle se rétablisse complètement de l'anesthésie.Observer la souris pendant une heure après l'intervention chirurgicale, avant de la ramener au lieu d'hébergement. Surveiller attentivement la souris pendant la période de récupération afin de s'assurer que le pansement n'entrave pas l'excursion thoracique et la respiration. Huit jours plus tard, observer et palper la greffe à la recherche de signes de croûte, de rétraction ou de rigidité.Si l'un de ces signes est présent, la greffe n'aura peut-être pas atteint une vascularisation adéquate et devra être considérée comme un échec technique. Surveiller la greffe quotidiennement pour détecter les signes de rejet. Considérer qu'une greffe est rejetée lorsque plus de 90 % du tissu greffé devient nécrotique.Dans les modèles de disparité complète, les greffes de peau en pleine épaisseur sont généralement rejetées entre huit et douze jours. Dans les modèles de légère disparité, les réponses de rejet sont plus lentes, plus variables, et l'apparence de la greffe de peau se caractérise par des modifications moins nettes, telles que la contraction ou la perte de poils. Le rejet aigu de la greffe commence généralement par un gonflement et une érythème de la greffe.Ces événements sont suivis par la dessiccation de la greffe, la formation d'une croûte et un rétrécissement, comme on le voit ici. Selon le degré d'incompatibilité du CMH et le protocole d'immunosuppression, le rejet peut survenir selon un processus subaigu marqué par des changements subtils, tels que la perte de poils, de pigmentation, des crêtes dermiques et du volume de la greffe. Dans ces cas, une greffe rejetée apparaît luisante, blanche et sans poils, avec des bords irréguliers.En utilisant des souris BALB/c comme donneurs et des souris C57 black 6 comme receveurs, on a observé que l'inhibition de la glycolyse et de la phosphorylation oxydative, ou du métabolisme du glutamine seul, prolongeait la survie des greffes cutanées. Toutefois, le blocage simultané des trois voies entraînait une augmentation significative de la survie de la greffe. De plus, la triple thérapie métabolique s'est révélée plus efficace que la cyclosporine conventionnelle ou la rapamycine.En outre, l'histologie des greffes de peau provenant du groupe ayant reçu la thérapie métabolique a révélé un alignement tissulaire plus intact et un infiltrat inflammatoire lymphocytaire réduit, par comparaison avec le tissu non traité. Les résultats des transplantations d'organes se sont considérablement améliorés grâce aux progrès réalisés dans les techniques chirurgicales et les protocoles d'immunosuppression. Toutefois, l'immunosuppression à long terme est associée à des effets secondaires importants, et le développement de nouvelles stratégies favorisant la tolérance constitue toujours l'objectif de la recherche moderne en transplantation.On connaît bien l'importance du métabolisme dans la régulation des lymphocytes T. En inhibant la glycolyse, la phosphorylation oxydative et le métabolisme de la glutamine, nous avons pu augmenter significativement la survie des greffes allogéniques. Cette approche novatrice s'est révélée plus efficace que le traitement conventionnel et représente un changement de paradigme dans les stratégies potentielles de régulation immunitaire et de transplantation.

murine-full-thickness-skin-transplantation

Research

Recherche

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie et infection

La transplantation allogénique de la peau est un modèle standard d'analyse des réponses des cellules T à l'hôte antigènes du donneur MHC-disparates. Cette vidéo-article fournit un tutoriel visuelle de chaque étape à effectuer une greffe BALB/c--&gt; C57BL / 6 peau.

Transplantation de peau murine

Dans ce rapport, nous décrivons la peau en trois dimensions de reconstruire le modèle qui imite la peau humaine dans l'architecture et la composition. La physiologie des mélanocytes, la progression du mélanome et le destin des cellules souches dermiques ont été étudiés en utilisant la peau de reconstruire le modèle. Le modèle est également utile comme outil pour l'évaluation préclinique de médicaments.

La peau Three-Dimensional Human Reconstruire Modèle: un outil pour étudier la peau normale et la progression du mélanome

Cette vidéo montre une méthode de greffe de peau humaine sur une souris immunodéficiente avec une réponse neutrophile supprimée. La méthode consiste à appliquer de la peau humaine d'épaisseur fendue sur le lit de greffe de la souris, à le sceller et à le recouvrir pour la récupération. Finalement, la peau humaine adhère à la peau de la souris, établissant la vascularisation et la circulation, ce qui permet une xénogreffe de peau réussie.

Une technique de greffe de peau humaine dans un modèle murin

La vascularisation est la clé pour les approches en ingénierie tissulaire succès. Par conséquent, des technologies fiables sont nécessaires pour évaluer le développement des réseaux vasculaires dans les tissus-constructions. Nous présentons ici une méthode simple et efficace de visualiser et de quantifier la vascularisation in vivo.

Une peau pleine de défauts modèle pour évaluer la vascularisation des biomatériaux<em&gt; In Vivo</em

La greffe de peau de queue est un modèle puissant pour étudier le rejet dépendant des lymphocytes T et l’induction de la tolérance au cours des réponses immunitaires allogéniques chez la souris. Les avantages de ce protocole sont la chirurgie invasive mineure et la facilité de surveillance sans qu’il soit nécessaire de sacrifier la souris receveuse.

Transplantation de queue peau d&#39;étudier allogéniques CD4 réponses des cellules T chez la souris

Au cours du développement chez les mammifères, les plaies cutanées gestationnelles précoces cicatrisent sans cicatrice. Nous détaillons ici un modèle fiable et reproductible de cicatrisation fœtale sans cicatrice dans le dos cutané d’embryons de souris E16.5 (sans cicatrice) et E18.5 (cicatriciels).

Un modèle de la peau de souris fœtale de Scarless Wound Repair

Le but de cette étude était de développer un modèle murin de la cicatrisation des brûlures. Une brûlure thermique a été induite sur la peau dorsale des souris à l’aide d’un modèle de laiton préchauffé. Le tissu brûlé a été débrided et recouvert d’une greffe de peau récoltée à partir de la queue d’une souris de donneur génétiquement similaire.

Un modèle murine d’une blessure de brûlure reconstruite avec une greffe de peau allogénique

Le présent protocole décrit comment greffer de la peau humaine sur des souris non obèses diabétiques (NOD)-SCID à récepteur de la chaîne gamma (NSG) diabétiques (NOD). Une description détaillée de la préparation de la peau humaine pour la transplantation, de la préparation des souris pour la transplantation, de la transplantation de la peau humaine d’épaisseur fendue et de la procédure de récupération post-transplantation est incluse dans le rapport.

Modèle de peau de xénogreffe pour manipuler les réponses immunitaires humaines in vivo

Le présent article décrit une technique modifiée pour la transplantation cardiaque vascularisée hétérotopique avec une technique aseptique mise à jour, une analgésie et une anesthésie.

Un protocole de transplantation cardiaque hétérotopique murin modifié correspondant aux normes contemporaines de la technique aseptique, de l’anesthésie et de l’analgésie

Nous présentons un modèle murin reproductible d’allotransplantation composite vascularisée hétérotope du membre postérieur au cou. Ce protocole supermicrochirurgical, impliquant des anastomoses de vaisseaux de 0,3 à 0,5 mm, intègre un guidage de filament de nylon et un menottage veineux. Il offre une plateforme fiable pour des études translationnelles sur la tolérance, la lésion ischémie-reperfusion et les mécanismes immunologiques dans l’allotransplantation vascularisée composite.

Transplantation hétérotopique du membre postérieur au cou chez la souris : un modèle supermicrochirurgical d’allotransplantation composite vascularisée

Découvrez la transplantation de peau pleine épaisseur chez la souris pour étudier les réponses alloimmunes et le rejet de greffe. Cette méthode simple permet de surveiller efficacement la vascularisation et la tolérance donneur-spécifique.

Murine Transplantation de peau pleine épaisseur

Explorer plus de vidéos