Name: Une méthode danesthésie, de chirurgie et de récolte pour lévaluation des vis transpediculaires en utilisant un In vivo Modèle de la colonne lombaire porcine (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-05-31T12:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 7 s
Description: Découvrez une méthode chirurgicale pour évaluer les vis transpédiculaires sur un modèle porcin in vivo. Cette technique permet de comparer la stabilité à long terme de différents types de vis et d'étudier les complications comme le desserrage.

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Cette étude a été soutenue par une subvention (CNUH-BRI-2012-02-005) financée par l&#39;Institut de recherche biomédicale de l&#39;hôpital universitaire national de Chonbuk (CNUH-BRI), République de Corée.

Le comité institutionnel pour les soins et l&#39;utilisation des animaux de l&#39;Université nationale de Chonbuk a approuvé cette étude. Le traitement, l&#39;utilisation et la manipulation des animaux ont suivi toutes les directives et les politiques. Maintenir la salle d&#39;opération à 24 ° C. 1. Anesthésie <ol><li> Acclimater les porcs miniatures, âgés de 12 mois, dans l&#39;unité expérimentale pendant au moins une semaine. Effectuer un examen clinique mesurant la fréquence respiratoire, le cœur et la température corporelle. Ne pas nourrir chaque porc miniature pendant 12 h avant la procédure d&#39;anesthésie. </li><li> Injecter de l&#39;atropine (0,05 mg / kg) et de la ktatamin (20 mg / kg) / xylaxine (2 mg / kg) dans la région du muscle cervical latéral, derrière l&#39;oreille, pour la prémédication. </li><li> Après la sédation, appliquez fermement une bande de caoutchouc autour de la base de l&#39;oreille et nettoyez l&#39;oreille avec de l&#39;alcool topique. </li><li> Placez un cathéter en plastique à l&#39;aiguille dans la veine de l&#39;oreille et retirez la bande élastique. Confirmez que le cathéter est correctement placé. GrippeJetez le cathéter avec une solution salée héparinée et corrigez-les avec du ruban adhésif. </li><li> Pour l&#39;intubation endotrachéale, positionnez le porc miniature dans le recule sternal. Avec l&#39;aide d&#39;un assistant, tenez la mâchoire du cochon avec une élingue appropriée et ouvrez sa bouche. <ol><li> Passez la pointe du laryngoscope dans la cavité du pharynge pour déplacer l&#39;épiglotte du palais mou. Utilisez la pointe de la lame du laryngoscope pour rendre les cordes vocales visibles et faire avancer le tube endotrachéal dans la trachée pendant l&#39;expiration. </li><li> Sentez-vous un passage libre de l&#39;air pour une intubation appropriée et vérifiez l&#39;auscultation de la poitrine pour les sons de respiration dans les deux côtés gauche et droit du porc miniature. </li></ol></li><li> Remplir le brassard avec un volume d&#39;air approprié du tube endotrachéal avec de l&#39;air à l&#39;aide d&#39;une seringue de 10 ml et fixer le tube au museau à l&#39;aide d&#39;un ruban adhésif. </li><li> Fournir une concentration de 2,0% d&#39;isoflurane, un anesthésique par inhalation pour une anesthésie prolongée, par l&#39;endotrTube d&#39;intubation transversale. Testez les réflexes cornéens et palpébrales pour confirmer l&#39;anesthésie et utilisez une onguent sur les yeux pour éviter la sécheresse. </li><li> Surveiller le système cardiovasculaire, le système respiratoire et la température corporelle pendant l&#39;anesthésie au moins toutes les 5 minutes jusqu&#39;à ce que le cochon miniature se rétablisse. </li><li> 30 min avant la chirurgie de la colonne vertébrale, appliquer 30 mg / kg de cefazoline IV lentement, la 1ère génération d&#39;antibiotiques de céphalosporine. </li><li> Administrer 5 à 10 ml / kg / h de solution saline chaude (37 ° C) en utilisant une ligne IV pour maintenir l&#39;homéostasie et fournir 50 μg / kg / min de fentanyl pour contrôler la douleur. </li><li> Après la chirurgie de la colonne vertébrale, effectuer une extubation lorsqu&#39;un réflexe de déglutition élevé apparaît. </li><li> Prenez le cochon miniature dans une pièce et surveillez jusqu&#39;à ce qu&#39;il récupère de l&#39;anesthésie. Fournir de la nourriture et de l&#39;eau lorsque le porc miniature est totalement conscient. </li><li> Appliquer 3 mg / kg d&#39;antibiotique d&#39;enrofloxacine avec 4,4 mg / kg de carprofène par jour pour le contrôle de la douleur pendant les 3 premiers jours. </li><li> MoniPour le cochon quotidiennement jusqu&#39;à l&#39;enlèvement des sutures. </li></ol> 2. Chirurgie de la colonne vertébrale <ol><li> Enclenchez automatiquement les vis transpediculaires et les systèmes fixateurs postérieurs pour la stérilisation, conformément aux directives du fabricant. </li><li> Raser le dos du porc miniature, à environ 10 cm du centre vers la gauche ou vers la droite, en utilisant un rasoir pendant que le porc est en position couchée. Nettoyez la peau avec une solution de povidone-iode et 70% d&#39;alcool. </li><li> Faire une incision longitudinale longitudinale du deuxième processus épineux de la colonne lombaire jusqu&#39;à la première crête sacrale médiane à l&#39;aide d&#39;un scalpel. Dissection à travers le tissu sous-cutané et le fascia jusqu&#39;à la pointe des processus épineux. </li><li> Augmenter les muscles paraspales sous les stades sous-périmétiques à partir des lames sous-jacentes à l&#39;aide d&#39;un ascenseur Cobb. Dissectez le long du processus épineux et des lames limitées aux articulations facettes. </li><li> Ouvrir le cortex superficiel du point d&#39;entrée (qui est juste inférieur au processus mammifère de L3À L5 des deux côtés) avec une bavure ou un rongeur. </li><li> Insérez la goupille de guidage sur un site ouvert, parallèlement à la plaque d&#39;extrémité supérieure et à un angle de 20 ° par rapport au processus épineux. Définissez le point de départ idéal en utilisant des rayons X postéro-antérieurs / latéraux portables en C-bras ou portables. </li><li> Insérez une sonde pédiculaire jusqu&#39;à 25 mm selon la radiographie. Confirmer la trajectoire intra-osseuse complète par palpation du pédicule et du corps à l&#39;aide d&#39;un dispositif de sonde pédiculaire. </li><li> Insérez six vis pédiculaires dans le pédicule préparé de L3 à L5 jusqu&#39;à ce que la tête de vis soit bien assise. Pointez l&#39;ouverture latérale de la tête d&#39;implant dans la direction désirée et alignez la position horizontale avec la trajectoire de la tige. </li><li> Insérez deux tiges dans les deux côtés de la tête de vis pédiculaire, respectivement. Mettez le manchon et l&#39;écrou à la tête de la tête du pédicule à l&#39;aide d&#39;une poignée universelle. </li><li> Serrez légèrement l&#39;écrou à l&#39;aide d&#39;une clé à douille droite et serrez fermement l&#39;écrou à l&#39;aide d&#39;une clé dynamométrique compacte. </li><li> Confirmer les positions oF les vis pédiculaires utilisant des rayons X postero-antérieurs / latéraux portables. REMARQUE: Attendez que le cochon miniature se réveille et vérifie les patrons de marche et la fonction motrice du membre postérieur pour déterminer si une vis a été mal implantée. </li><li> Irriger le site de chirurgie avec 3 L de solution saline normale à l&#39;aide d&#39;une seringue d&#39;irrigation à bulbe avec aspiration. </li><li> Placez un drain de silicone dans le site de la chirurgie et retirez la pointe de silicone. Fermer les muscles paraspinal et sous-cutané en utilisant des sutures absorbables métriques. Fermez la peau avec des sutures de nylon métriques non absorbables 2,0. </li><li> Désinfectez le site de suture avec de la povidone-iode et appliquez un pansement à l&#39;aide de gaze stérilisée et d&#39;un ruban adhésif. </li></ol> 3. Procédure de récolte <ol><li> À 12 semaines postopératoires, injectez de la xylazine (2 mg / kg) et de la kétamine (10 mg / kg) dans la région du muscle cervical latéral, derrière l&#39;oreille, pour la prémédication. </li><li> Après la sédation, administrer 15 mg / kg de KCl directement dans la veine de l&#39;oreilleCathéter pour l&#39;euthanasie. </li><li> Effectuer une incision longitudinale longitudinale lors de la lésion de la cicatrice chirurgicale précédente. Dissectez les tissus mous et les muscles paraspales. </li><li> Exposer le processus épineux des épines lombaires, des lamelles, des tiges, des noix et des processus transversaux de L3 à L5. </li><li> Retirez les écrous à l&#39;aide d&#39;une clé dynamométrique et des tiges. Couper l&#39;espace disque L2-3 et l&#39;espace disque L5-S1 à l&#39;aide d&#39;une scie oscillante. </li><li> Dissectionnez les deux côtés de la colonne médiane et antérieure de la colonne vertébrale L3-5 avec un crochet Cobb et une pince à tourillon. Après la récolte, si la colonne vertébrale ne peut pas être testée immédiatement, enveloppez-la dans une gaze imprégnée de solution saline et conservez à -20 ° C. </li></ol>

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<li>Giavaresi, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+preclinical+evaluation+of+the+influence+of+osteoporosis+on+the+anchorage+of+different+pedicle+screw+designs%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Spine+J%22%5BJournal%5D)">In vivo preclinical evaluation of the influence of osteoporosis on the anchorage of different pedicle screw designs.</a> Eur Spine J. 20 (8), 1289-1296 (2011).</li>
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</ol>

Les auteurs n&#39;ont rien à voir avec ce document à divulguer.

L&#39;évaluation des vis transpediculaires dans la colonne vertébrale nécessite beaucoup de temps et d&#39;effort. Tout d&#39;abord, le cochon miniature est un gros animal. Pour les soins aux animaux et l&#39;anesthésie, le chercheur a besoin d&#39;un protocole spécialisé. Deuxièmement, la chirurgie devrait maintenir un environnement similaire à celui de la chirurgie humaine. Le but de l&#39;évaluation des vis du pédicule dans la colonne vertébrale du porc est de développer une vis efficace qui peut être appliquée aux h...

La fixation par vis transpédiculaire est un traitement de référence pour la fracture dégénérative de la colonne lombaire et l’éclatement, car elle implique trois colonnes de la colonne vertébrale et permet d’obtenir une stabilisation1,2. Cependant, la plupart des patients qui subissent une telle chirurgie souffrent également d’ostéoporose3,4. De nombreuses études ont évalué la force de fixation et l’état d’ostéointégration des vis transpédiculaires, car le desserrage des vis pédiculaires actuellement utilisées a été rapporté chez des patients atteints d’ostéoporose5,6.
La colonne porcine est similaire à la colonne vertébrale humaine en termes de taille. Il est moins cher par rapport à un modèle de primate7. De plus, une étude mécanique in vivo a démontré que la colonne porcine quadrupède est essentiellement chargée de la même manière que celle de la colonne vertébrale humaine 8, c’est pourquoi de nombreux chercheurs utilisent les épines porcines pour des études sur la prévention du desserrage des vis pédiculaires. Cependant, il faut plusieurs mois pour étudier les vis pédiculaires dans la colonne porcine, car l’identification de la stabilité à long terme des vis pédiculaires prend du temps. Afin de comparer différents types de vis dans le corps vertébral, il est nécessaire d’insérer les vis dans des positions similaires. Par conséquent, les chercheurs doivent bien connaître les techniques d’anesthésie appropriées, les protocoles chirurgicaux standardisés et les procédures de prélèvement avant d’effectuer toute expérience. Ici, nous décrivons une méthode détaillée d’anesthésie, de chirurgie et de prélèvement pour l’évaluation de la fixation de la vis pédiculaire à l’aide d’un modèle de colonne vertébrale porcine, y compris l’imagerie ex vivo, l’histologie et les tests de force.

<table><tbody><tr><td>Porc miniature</td><td>OrientBio</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Atropine</td><td>Jeil</td><td>A04900241</td> pharmaceutique <td>Anesthésie</td></tr><tr><td>Cathéter en plastique sur l’aiguille</td><td>BD</td><td>REF382412</td><td>Entretien de la ligne IV</td></tr><tr><td>Kétamine</td><td>Yuhan</td><td>A04502441</td><td>Anesthésie</td></tr><tr><td>Xylazine</td><td>Bayer Corée</td><td>A00800071</td><td>Anesthésie</td></tr><tr><td>Laryngoscope</td><td>Karl storz</td><td></td><td>Intubation</td></tr><tr><td>Sonde endotrachéale</td><td>Covidien</td><td></td><td>Intubation</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>JW pharmaceutical Co</td><td>A02104781</td><td>Anesthésie</td></tr><tr><td>Pommade oculaire</td><td>Hanlim pharma</td><td>A37851721</td><td>Protection de l’œil de porc</td></tr><tr><td>Cefazolin</td><td>Donga pharma</td><td>A01503951</td><td>Antibiotiques</td></tr><tr><td>Saline</td><td>JW pharmaceutical Co A02151392</td><td></td><td>Maintien de l’homéostasie liquidienne</td></tr><tr><td>Fentanyl</td><td>Hana pharm</td><td>C03200032</td><td>Contrôle de la douleur</td></tr><tr><td>Enrofloxacine</td><td>Bayer</td><td>93106-60-6&nbsp ;</td><td>Antibiotiques</td></tr><tr><td>Morphine</td><td>Myungmoon pharma</td><td>C03700091</td><td>Contrôle de la douleur</td></tr><tr><td>Meloxicam</td><td>Boehringer Ingelheim</td><td>A07600711</td><td>Antibiotiques</td></tr><tr><td>Povidone iodée</td><td>Hyundai pharma</td><td></td><td>Pansement</td></tr><tr><td>Lame de scalpel taille 15</td><td>Braun</td><td>&nbsp ; I1 BB515</td><td>Incision cutanée</td></tr><tr><td>Élévateur Cobb Codman</td><td></td><td>65-2546</td><td>Dissection de</td></tr><tr><td>la bavure</td><td>musculaire Medtronic</td><td></td><td>Fabrication du point de départ de la vis</td></tr><tr><td>Rongeur</td><td>Aesculap</td><td>FO515R</td><td>Réalisation du point de départ de la vis</td></tr><tr><td>Goupille de guidage (fil K)</td><td>CE</td><td>01067803</td><td>Guidage de la trajectoire de la vis</td></tr><tr><td>Bras en C</td><td>GE</td><td>OEC 9800 plus</td><td>Guidage de la trajectoire de la vis</td></tr><tr><td>Appareil portable à rayons X</td><td>Siemens</td><td>Mobile XP hybrid</td><td>Guidage de la trajectoire de la vis</td></tr><tr><td>Sonde pédiculaire</td><td>OtisBiotech</td><td>SPI-02-01</td><td>Guidage de la trajectoire de la vis</td></tr><tr><td>Dispositif de sondage pédiculaire</td><td>OtisBiotech</td><td>SPI-03-01</td><td>Guidage de la trajectoire de la vis</td></tr><tr><td>Vis pédiculaire</td><td>OtisBiotech</td><td>MS-40025</td><td></td></tr><tr><td>Systèmes de fixateurs postérieurs</td><td>OtisBiotech</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rod&nbsp ;</td><td>OtisBiotech</td><td>ROD-60140</td><td>Fixation rigide entre vis</td></tr><tr><td>Poignée universelle</td><td>OtisBiotech</td><td>SPI-08-01</td><td>Pour fixer les vis à la tige</td></tr><tr><td>Clé à douille droite</td><td>OtisBiotech</td><td>SPI-06-01</td><td>Pour fixer les vis à la tige</td></tr><tr><td>Clé dynamométrique</td><td>OtisBiotech</td><td>SPI-07-01</td><td>Pour fixer les vis à la tige</td></tr><tr><td>Seringue d’irrigation à bulbe</td><td>Hyupsug medical</td><td>HS-IR-140</td><td>Irrigation</td></tr><tr><td>Drain en silicone</td><td>Sewon medical</td><td>2205-006</td><td>Pour drainer le liquide au niveau du site chirurgical</td></tr><tr><td>3.0 métrique suture résorbable</td><td>Ethicon</td><td>BA1673H</td><td>Suture musculaire</td></tr><tr><td>2.0 métrique non résorbable nylon</td><td>Ethicon</td><td>W1626T</td><td>Suture cutanée</td></tr><tr><td>Gaze</td><td>Kingphar Corée</td><td>KP120-06</td><td></td></tr><tr><td>Pentobarbital</td><td>Hanlim pharma</td><td>645301221</td><td>Euthanasie</td></tr><tr><td>Scie oscillante</td><td>Zimmer</td><td></td><td>Pine Harvest</td></tr><tr><td>Pince à tour</td><td>Aesculap</td><td>BF461R</td><td>Harvest spine</td></tr></tbody></table>

une méthode d&#39;anesthésie, de chirurgie et de récolte pour l&#39;évaluation des vis transpediculaires en utilisant un<em&gt; in vivo</em&gt; modèle de la colonne lombaire porcine

An Anesthesia, Surgery, and Harvest Method for the Evaluation of Transpedicular Screws Using an In Vivo Porcine Lumbar Spine Model

La fixation par vis pédiculaire est l&#39;étalon-or pour le traitement des maladies de la colonne vertébrale. Cependant, de nombreuses études ont rapporté la question du desserrage des vis pédiculaires après une chirurgie de la colonne vertébrale, ce qui est une préoccupation sérieuse. Pour résoudre ce problème, divers types de vis pédiculaires ont été examinés pour identifier ceux qui ont une bonne résistance à la fixation et une ostéointégration dans l&#39;os de la colonne vertébrale. La colonne vertébrale porcine est une bonne alternative pour la colonne vertébrale humaine dans l&#39;évaluation des vis pédiculaires en raison de la taille anatomique, des caractéristiques mécaniques et des coûts. Bien que plusieurs études aient indiqué que les vis pédiculaires sont efficaces dans le modèle porc, aucune étude n&#39;a décrit les protocoles détaillés pour l&#39;évaluation d&#39;une vis pédiculaire à l&#39;aide du modèle porcin. Ici, nous décrivons une méthode détaillée pour évaluer les vis transpediculaires en utilisant un modèle de colonne lombaire porcine in vivo . Les détails techniques pour l&#39;anesthésie, la chirurgie de la colonne vertébrale et les récoltes fournies ici faciliteront l&#39;évaluation de la tModèle de fixation à vis ranspedic.

Un protocole détaillé pour l&#39;anesthésie, la chirurgie et la récolte pour l&#39;évaluation des vis transpediculaires utilisant un modèle de colonne lombaire porcine in vivo est décrit ici. Ce protocole est adapté à un certain nombre d&#39;analyses en aval, y compris les essais mécaniques ( Figure 1 ), l&#39;évaluation quantitative par micro-CT ( Figure 2 ) et l&#39;histologie ( Figure 3 ). Les essais mécaniques représentatifs...

Ici, nous introduisons une méthode pour évaluer les vis transpediculaires en utilisant un modèle de colonne lombaire porcine in vivo .

Une méthode d&#39;anesthésie, de chirurgie et de récolte pour l&#39;évaluation des vis transpediculaires en utilisant un<em&gt; In vivo</em&gt; Modèle de la colonne lombaire porcine

Pedicle screw fixation is the gold standard for the treatment of spinal diseases. However, many studies have reported the issue of loosening pedicle ...

L'objectif général de cette intervention chirurgicale est d'évaluer des vis transpédonculaires à l'aide d'un modèle in vivo de colonne lombaire porcine. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés concernant certaines complications de la colonne vertébrale, telles que le desserrage de la vis pédonculaire. Le principal avantage de cette technique est que nous pouvons comparer la stabilité à long terme de différents types de vis.Conserver des porcs miniatures âgés de 12 mois dans l'unité expérimentale pendant au moins une semaine. Après cette période d'acclimatation, effectuer un examen clinique chez chaque porc, mesurer la fréquence respiratoire, la fréquence cardiaque et la température corporelle. Avant l'anesthésie, priver les porcs de nourriture pendant 12 heures.Pour séder un porc, injecter de l'atropine dans la région musculaire cervicale latérale située derrière l'oreille. Une fois le porc sédaté, appuyer une main à la base de l'oreille, puis nettoyer l'oreille avec de l'alcool. Ensuite, introduire un cathéter plastique avec aiguille dans la veine auriculaire.Ensuite, rincer le cathéter avec une solution saline héparinée et le fixer avec du ruban adhésif. Induire

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La dégénérescence des disques intervertébraux contribue grandement à la douleur dorsale et à la principale cause d'invalidité dans le monde entier. De nombreux modèles animaux de dégénérescence du disque intervertébral existent. Nous démontrons un modèle ovine de dégénérescence du disque intervertébral, en utilisant un foret, ce qui permet une lésion uniforme du disque et un niveau reproductible de dégénérescence du disque.

Modèle de dégénérescence du disque intervertébral lombaire ovine utilisant une blessure au talage rétropéritonéal latéral

Ce protocole décrit l'implantation d'une fenêtre en verre sur la moelle épinière d'une souris pour faciliter la visualisation par microscopie intravitale.

Laminectomy et implantation de fenêtre de moelle épinière dans la souris

Le protocole décrit un nouveau modèle murin in vivo d’infection par implant rachidien où un implant k-wire en acier inoxydable est infecté par Staphylococcus aureus Xen36 bioluminescent. La charge bactérienne est surveillée longitudinalement par imagerie bioluminescente et confirmée par le nombre d’unités formant colonie après euthanasie.

Modèle murin in vivo d’infection par implant rachidien

Nous avons développé un modèle lombaire de souris de dégénérescence intervertébrale de disque par résection des processus spinous de L3-L5 avec les ligaments supra- et inter-spinous et le détachement des muscles paraspinous.

Un modèle de souris de l’instabilité lombaire de colonne vertébrale

La microcirculation de la moelle épinière joue un rôle central dans les lésions de la moelle épinière. La plupart des méthodes ne permettent pas d’évaluer en temps réel la microcirculation de la moelle épinière, ce qui est essentiel pour le développement de thérapies ciblées par microcirculation. Ici, nous proposons un protocole utilisant des sondes Laser-Doppler-Flow Needle dans un grand modèle animal d’ischémie/reperfusion.

Évaluation en temps réel de la microperfusion de la moelle épinière dans un modèle porcin d’ischémie/reperfusion

L’écran de réalité augmentée, Magic Leap, a été utilisé en combinaison avec un système de navigation conventionnel pour placer des vis pédiculaires dans un modèle porcin en respectant un nouveau flux de travail. Avec un temps d’insertion médian de &lt;2,5 min, une précision technique submillimétrique et une précision clinique de 100 % ont été atteintes selon Gertzbein.

Placement de vis pédiculaires à l’aide d’un visiocasque en réalité augmentée dans un modèle porcin

Détermination de la prise de greffe de cellule donneuse présente un défi dans des modèles de souris moelle osseuse greffe qui n'ont pas bien définis marqueurs phénotypiques. Nous avons décrit une méthodologie pour quantifier les hommes greffe de cellule donneuse dans des souris femelles bénéficiaires de greffes. Cette méthode peut être utilisée dans toutes les souches de souris pour l'étude des fonctions HSC.

Utilisation quantitative PCR en temps réel pour déterminer prise de greffe de donneurs de cellules dans un modèle murin concurrentiel greffe de moelle osseuse

Cet article présente une méthode rapide et simple pour l'administration de la bléomycine directement dans la trachée de souris par intubation. Les principaux avantages de cette méthode est qu'il est hautement reproductible, facile à maîtriser, et ne nécessite pas d'équipement spécialisé ou de longs temps de récupération.

Une méthode améliorée pour Rapid intubation de la trachée chez la souris

Découvrez une méthode chirurgicale pour évaluer les vis transpédiculaires sur un modèle porcin in vivo. Cette technique permet de comparer la stabilité à long terme de différents types de vis et d'étudier les complications comme le desserrage.

Une méthode danesthésie, de chirurgie et de récolte pour lévaluation des vis transpediculaires en utilisant un In vivo Modèle de la colonne lombaire porcine (Vidéo) | JoVE Journal

Une méthode d'anesthésie, de chirurgie et de récolte pour l'évaluation des vis transpediculaires en utilisant un

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