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DOI: 10.3791/55234-v
Gurpreet Kaur1,2, Jaimo Ahn1, Kurt D. Hankenson1,3, Jason W. Ashley1,4
1Department of Orthopaedic Surgery,Perelman School of Medicine, University of Pennsylvania, 2Department of Biological Sciences,University of the Sciences, 3The Department of Small Animal Clinical Sciences,College of Veterinary Medicine, Michigan State University, 4Department of Biology,College of Science, Technology, Engineering, & Mathematics, Eastern Washington University
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La signalisation Notch est une forme de communication cellulaire qui repose sur le contact direct entre les cellules. Pour induire correctement la signalisation Notch in vitro, les ligands Notch doivent être présentés aux cellules dans un état immobilisé. Ce protocole décrit des méthodes de stimulation in vitro de la signalisation Notch chez les précurseurs d’ostéoclastes de souris.
L’objectif global de cette procédure est d’observer les effets de la stimulation de la signalisation de l’encoche à différents points du processus de différenciation des ostéoclastes. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine de la biologie cellulaire, telles que : Comment le rôle de la signalisation de l’encoche change-t-il au cours d’un processus cellulaire ? Le principal avantage de cette technique est sa marginalité, qui lui permet de s’adapter à d’autres cellules ou ligands d’entaille.
Bien que cette méthode puisse donner un aperçu de la différenciation des ostéoclastes, elle peut également être appliquée à d’autres processus tels que la survie cellulaire, la prolifération ou la différenciation d’autres types de cellules. Commencez la procédure en fixant une souris en position couchée et en désinfectant la peau avec de l’éthanol à 70 %. Ensuite, faites une incision le long de la surface antérieure d’un membre postérieur pour exposer le tibia et le fémur.
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