Le modèle du lapin d’athérosclérose accélérée : un point de vue méthodologique de la blessure de ballon artère iliaque

L’objectif global de cette procédure est d’induire la formation de plaques d’athérosclérose chez les lapins en perturbant chirurgicalement l’endothélium de leurs artères iliaques gauches et en les nourrissant avec un régime athérogène. Par l’individu, une blessure chez les lapins est souvent effectuée dans l’aorte pour étudier la composition de la plaque. Cependant, l’artère iliaque est très similaire à l’artère coronaire humaine, ce qui en fait un endroit attrayant pour la modélisation des plaques d’athérosclérose.

Le contenu musculaire, les lésions uniformes, l’activité du tissu oculaire et les dimensions constantes des vaisseaux de l’artère iliaque du lapin sont tous comparables à ceux de l’artère coronaire humaine. En fin de compte, cela permet d’évaluer les dispositifs fabriqués commercialement en fonction des critères morphométriques et angiographiques. La démonstration de la procédure sera assurée par Aurélien Frobert, un collaborateur de mon laboratoire.

Assurez-vous de stériliser tous les outils chirurgicaux à l’aide, par exemple, d’un stérilisateur à billes de verre. Ensuite, préparez et vérifiez les deux ensembles de cathéter à ballonnet. Sur chacun d’eux, fixez une seringue Luer lock d’un millilitre remplie de solution saline normale, puis vérifiez qu’il n’y a pas d’embliques coincés à l’aide du mécanisme de gonflage du ballon.

Ensuite, réglez le coussin thermique sur la plate-forme chirurgicale à 37 degrés Celsius. Pesez ensuite le lapin. Ensuite, injectez de la buprénorphine et anesthésiez le lapin à l’aide de 5 % d’isofluorane à raison de cinq litres par minute pendant 10 à 15 minutes.

Maintenant, placez le lapin anesthésié sur le coussin chauffant d’une plate-forme chirurgicale. Fixez des capteurs pour surveiller la température et la respiration du lapin et pour collecter des électrocardiogrammes. Ensuite, fixez un masque facial pour délivrer 4 % d’isofluorane à 2,5 litres par minute.

Confirmez ensuite un niveau d’anesthésie approprié en testant une perte de réflexes nauséeux et mesquins. Un tonus musculaire universellement détendu est également un indicateur d’anesthésie profonde. Ensuite, appliquez une pommade abtonique sur les deux yeux.

Ensuite, retirez les poils de la région ventrale juste en dessous des articulations du genou à l’aide d’une tondeuse à poils d’animaux. Ensuite, retirez les poils lâches et nettoyez la peau exposée avec trois gommages alternés à 70 % d’éthanol et de bétadine et drapez l’animal en ne laissant que le membre inférieur exposé. Pour commencer l’opération, localisez l’artère saphène et faites une incision de 1,5 centimètre.

Ensuite, à l’aide de petites pinces incurvées, exposez soigneusement une petite partie de l’artère saphène. Veillez à ne pas endommager la veine fémorale ou le nerf fémoral. Il est très important de bien nettoyer l’artère pendant cette exposition.

Ensuite, placez deux boucles de ligature lâches sous l’artère saphène et attachez une boucle de ligature près de l’extrémité distale de l’artère. Placez ensuite une pince microvasculaire le long de l’artère au-dessus de la ligature et fermez la pince pour arrêter le flux sanguin. Appliquez immédiatement une goutte de papavérine pour dilater l’artère et prévenir les spasmes de phase.

Ensuite, à l’aide de la ligature, soulevez l’artère saphène et faites une petite incision d’artériotomie à l’aide d’une aiguille de calibre 24. Soulevez ensuite les lambeaux d’incision et insérez lentement un cure-veine ou une aiguille de guidage dans la lumière de l’artère. Maintenant, insérez soigneusement un cathéter d’embolectomie artérielle dans l’artère saphène.

Soyez doux pour éviter de faire des ruptures. Retirez ensuite le cure-veine et relâchez la pince micro-vasculaire sur l’artère. Pour créer la blessure, avancez d’abord le cathéter à ballonnet jusqu’à la troisième marque.

Cela devrait placer environ deux à cinq centimètres au-dessus de la bifurcation iliaque. Ensuite, gonflez le ballon avec 0,1 millilitre de solution saline normale. Maintenant, coupez le cathéter et tirez-le vers l’arrière de six centimètres tout en le faisant pivoter pour endommager les tissus.

Une fois retiré, dégonflez le ballon. Et pour assurer une dilatation complète de l’endothélium, répétez le processus deux fois de plus. Retirez ensuite le cathéter et attachez immédiatement la boucle de ligature juste au-dessus du site de l’artériotomie pour arrêter le saignement.

Ensuite, appliquez un antiseptique approprié autour de la perforation de la plaie et nettoyez les caillots sanguins. Enfin, fermez l’incision cutanée et désinfectez le site de la chirurgie avec une solution de povidone iodée. Répétez ensuite l’ensemble de l’intervention chirurgicale sur l’artère iliaque controlatérale à l’aide du deuxième cathéter.

Après l’opération, nettoyez d’abord la pommade abtonique des côtés du lapin. Administrez ensuite de la sulfadoxine et du triméthoprime. Transférez ensuite le lapin avec le tampon de tête dans une cage de récupération propre et une pièce de surveillance et des clips.

Une fois que l’animal a retrouvé sa position couchée externe et qu’il se promène, retournez-le dans sa cage d’origine. Pour la gestion de la douleur, fournissez de la buprénorphine. Maintenant, commencez à nourrir l’animal avec un régime athérogène aussi longtemps que nécessaire.

Pour récolter tôt le lin mince, deux ou quatre semaines après l’opération, anesthésie d’abord le lapin, puis euthanasie le lapin avec une incision intercardinale. Ensuite, ouvrez l’abdomen et exposez le rétropéritoine. Ensuite, tracez l’aorte vers la bifurcation iliaque et attachez-la au-dessus de la bifurcation.

Poursuivez en enlevant soigneusement les tissus environnants et en isolant les deux artères iliaques. Maintenant, disséquez les deux artères et plongez-les dans du PBS glacé. Retirez les caillots à l’aide d’une pince et divisez chaque artère en 46 segments.

Ensuite, intégrez immédiatement les segments dans un moule contenant du composé OCT et congelez les tissus dans de l’azote liquide. Stockez les mouchoirs à moins 80 degrés Celsius, puis colorez des sections de cinq microns d’épaisseur en utilisant une méthodologie standard. La lésion par ballonnet des artères iliaques a été réalisée avec succès sans complication en moins d’une heure.

Le lapin s’est rétabli en moins d’une heure et/ou semblait en bonne santé sans perte de poids significative. Aucune complication postopératoire n’a été rencontrée. Et après quatre semaines de régime athérogène, les lapins souffraient tous d’hypercholestérolémie.

La combinaison d’une blessure par ballonnet et du régime alimentaire au cholestérol a entraîné des changements structurels dans la paroi des vaisseaux, ce qui a conduit au développement de la plaque d’athéroschlorose en deux semaines. Des artères iliaques non blessées et blessées par ballonnet ont été isolées chez le même animal et comparées. Le lin était caractérisé par l’infiltration de lipides ainsi que par la migration et la prolifération des sons musculaires lisses.

Le lin continue de croître dans les vaisseaux blessés tandis que la taille de la lumière continue de diminuer. Les changements qui en ont résulté ont été très prononcés au bout de quatre semaines. Après deux et quatre semaines, la quantification morphométrique a révélé une augmentation de l’épaisseur de l’intima media, une augmentation de la surface de la plaque, une diminution de la surface de la lumière et enfin une augmentation de l’accumulation de lipides.

La coloration avec l’anticorps anti-actine du muscle lisse alpha réagit avec l’actine musculaire, identifiant ainsi les cellules musculaires lisses vasculaires. Alors que la coloration avec plus d’anticorps monochlonaux 11 révèle le cytoplasme des macrophages. Ensemble, les taches révèlent à quel point les cellules musculaires lisses et les macrophages prolifèrent dans la plaque d’athérosclérose dans les vaisseaux blessés.

Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la sécurité automobile et effectuer facilement une blessure violente sur les artères iliaques du lapin. Cette blessure avec le régime athérogène entraîne le développement de la plaque des artères iliaques de manière homogène à temps.