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JoVE Journal Cancer Research
Evaporation-reducing Culture Condition Increases the Reproducibility of Multicellular Spheroid Formation in Microtiter Plates

L'évaporation de réduction Culture Condition Augmente la reproductibilité de la formation multicellulaire Spheroid en plaques de microtitration

Full Text
7,362 Views
11:24 min
March 7, 2017

DOI: 10.3791/55403-v

Viswanath Das1, Tomáš Fürst1, Soňa Gurská1, Petr Džubák1, Marián Hajdúch1

1Institute of Molecular and Translational Medicine,Palacky University in Olomouc

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

La perte inégale de milieu à partir de plaques de microtitrage affecte la reproductibilité des multicellulaire formation sphéroïde tumorale uniforme. L'amélioration des conditions de culture pour réduire la perte moyenne significative permettra d'améliorer la reproductibilité de la formation sphéroïde et les résultats des essais à base de sphéroïde-en utilisant la technique de liquide overlay.

L’objectif global de cette procédure est d’améliorer l’évolutivité et la reproductibilité de la formation uniforme de sphéroïdes à l’aide d’une technique de recouvrement liquide dans des plaques à 384 puits. Le principal avantage de cette technique est qu’elle réduit la réopération excessive du milieu à partir de plusieurs plaques, améliorant ainsi la reproductibilité de la formation de sphéroïdes. Nous avons développé et validé la méthode de culture de sphéroïdes 3D pour les tests de dépistage d’arthropodes dans notre laboratoire et notre étude a consisté à évaluer quel est l’effet de bord dans les plaques des cultures multicellulaires.

Aujourd’hui, je vais faire une démonstration de la procédure avec Sona, une affiche du laboratoire. Commencez cette procédure en pesant zéro virgule sept cinq grammes d’agarose à bas point de fusion et ajoutez-le à 100 millilitres de milieu mccoy’s 5a avec ou sans rouge de phénol et sans sérum. Faites chauffer la solution au micro-ondes et faites-la tourner toutes les une à deux minutes pour dissoudre complètement l’agarose.

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