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DOI: 10.3791/55403-v
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La perte inégale de milieu à partir de plaques de microtitrage affecte la reproductibilité des multicellulaire formation sphéroïde tumorale uniforme. L'amélioration des conditions de culture pour réduire la perte moyenne significative permettra d'améliorer la reproductibilité de la formation sphéroïde et les résultats des essais à base de sphéroïde-en utilisant la technique de liquide overlay.
L’objectif global de cette procédure est d’améliorer l’évolutivité et la reproductibilité de la formation uniforme de sphéroïdes à l’aide d’une technique de recouvrement liquide dans des plaques à 384 puits. Le principal avantage de cette technique est qu’elle réduit la réopération excessive du milieu à partir de plusieurs plaques, améliorant ainsi la reproductibilité de la formation de sphéroïdes. Nous avons développé et validé la méthode de culture de sphéroïdes 3D pour les tests de dépistage d’arthropodes dans notre laboratoire et notre étude a consisté à évaluer quel est l’effet de bord dans les plaques des cultures multicellulaires.
Aujourd’hui, je vais faire une démonstration de la procédure avec Sona, une affiche du laboratoire. Commencez cette procédure en pesant zéro virgule sept cinq grammes d’agarose à bas point de fusion et ajoutez-le à 100 millilitres de milieu mccoy’s 5a avec ou sans rouge de phénol et sans sérum. Faites chauffer la solution au micro-ondes et faites-la tourner toutes les une à deux minutes pour dissoudre complètement l’agarose.
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