Name: RMN Spectroscopie comme outil robuste pour lévaluation rapide du profil des suppléments Lipid huile de poisson (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-05-01T11:45:00.000+00:00
Duration: 8 min 54 s
Description: Découvrez l'analyse du profil lipidique des huiles de poisson par spectroscopie RMN 1H et 13C. Cette méthode rapide et robuste permet de quantifier les acides gras sans étapes de séparation.

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Ce travail a été soutenu par les aliments pour thème Découverte de la santé à l&#39;Ohio State University et le Département des sciences de l&#39;alimentation et de la technologie à l&#39;Ohio State University. Les auteurs tiennent à remercier l&#39;installation de RMN à l&#39;Ohio State University et l&#39;installation de RMN à l&#39;Université Penn State.

<ol><li>Simopoulos, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+importance+of+the+ratio+of+omega-6%2Fomega-3+essential+fatty+acids%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed.+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">The importance of the ratio of omega-6/omega-3 essential fatty acids.</a> Biomed. Pharmacother. 56 (8), 365-379 (2002).</li>
<li>Goodnight, S. H. Jr, Harris, W. S., Connor, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+dietary+omega+3+fatty+acids+on+platelet+composition+and+function+in+man%3A+a+prospective%2C+controlled+study%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">The effects of dietary omega 3 fatty acids on platelet composition and function in man: a prospective, controlled study.</a> Blood. 58 (5), 880-885 (1981).</li>
<li>Harper, C., Jacobsen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Usefulness+of+omega-3+fatty+acids+and+the+prevention+of+coronary+heart+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Usefulness of omega-3 fatty acids and the prevention of coronary heart disease.</a> Am. J. Cardiol. 96 (11), 1521-1529 (2005).</li>
<li>Kremer, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+high-dose+fish+oil+on+rheumatoid+arthritis+after+stopping+nonsteroidal+antiinflammatory+drugs.+Clinical+and+immune+correlates%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+and+Rheumatol%22%5BJournal%5D)">Effects of high-dose fish oil on rheumatoid arthritis after stopping nonsteroidal antiinflammatory drugs. Clinical and immune correlates.</a> Arthritis and Rheumatol. 38 (8), 1107-1114 (1995).</li>
<li>Malasanos, T., Stackpoole, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+effects+of+omega-3+fatty+acids+in+diabetes+mellitus%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Care%22%5BJournal%5D)">Biological effects of omega-3 fatty acids in diabetes mellitus.</a> Diabetes Care. 14, 1160-1179 (1991).</li>
<li>Han, Y., Wen, Q., Chen, Z., Li, P. <a target="_blank" href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1876610211019503">Review of Methods Used for Microalgal Lipid-Content Analysis.</a> Energ. Procedia. 12, 944-950 (2011).</li>
<li>Guillén, M., Ruiz, A. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/ejlt.200300799/abstract">1H nuclear magnetic resonance as a fast tool for determining the composition of acyl chains in acylglycerol mixtures.</a> Eur. J. Lipid Sci. Technol. 105, 502-507 (2003).</li>
<li>Sacchi, R., Medina, I., Aubourg, S. P., Addeo, F., Paolillo, L. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/237943502_Proton_Nuclear_Magnetic_Resonance_Rapid_and_Structure-Specific_Determination_of_o-3_Polyunsaturated_Fatty_Acids_in_Fish_Lipids">Proton nuclear magnetic resonance rapid and structure specific determination of ω-3 polyunsaturated fatty acids in fish lipids.</a> J. Am Oil Chem Soc. 70, 225-228 (1993).</li>
<li>Igarashi, T., Aursand, M., Hirata, Y., Gribbestad, I. S., Wada, S., Nonaka, M. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/226798699_Nondestructive_Quantitative_Acid_and_n-3_Fatty_Acids_in_Fish_Oils_by_High-Resolution_1H_Nuclear_Magnetic_Resonance_Spectroscopy">Nondestructive quantitative acid and n-3 fatty acids in fish oils by high-resolution 1H nuclear magnetic resonance spectroscopy.</a> J. Am. Oil Chem. Soc. 77, 737-748 (2000).</li>
<li>Plans, M., Wenstrup, M., Saona, L. <a target="_blank" href="http://link.springer.com/article/10.1007/s11746-015-2666-8">Application of Infrared Spectroscopy for Characterization Dietary Omega-3 Oil Supplements.</a> J. Am. Oil Chem. Soc. 92, 957-966 (2015).</li>
<li>Jian-hua, C. I. A. <a target="_blank" href="http://pubs.sciepub.com/jfnr/2/2/1/">Near-infrared Spectrum Detection of Fish Oil DHA Content Based on Empirical Mode Decomposition and Independent Component Analysis.</a> J Food Nutr Res. 2 (2), 62-68 (2014).</li>
<li>Millen, A. E., Dodd, K. W., Subar, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+vitamin%2C+mineral%2C+nonvitamin%2C+and+nonmineral+supplements+in+the+United+States%3A+The+1987%2C+1992%2C+and+2000+National+Health+Interview+Survey+results%5BTitle%5D)+AND+%22J.+of+Am.+Diet+Assoc%22%5BJournal%5D)">Use of vitamin, mineral, nonvitamin, and nonmineral supplements in the United States: The 1987, 1992, and 2000 National Health Interview Survey results.</a> J. of Am. Diet Assoc. 104 (6), 942-950 (2004).</li>
<li>Dwyer, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progress+in+developing+analytical+and+label-based+dietary+supplement+databases+at+the+NIH+office+of+dietary+supplements%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Food+Compos.+Anal%22%5BJournal%5D)">Progress in developing analytical and label-based dietary supplement databases at the NIH office of dietary supplements.</a> J. Food Compos. Anal. 21, S83-S93 (2008).</li>
<li>Monakhova, Y. B., Ruge, I., Kuballa, T., Lerch, C., Lachenmeier, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+determination+of+coenzyme+Q10+in+food+supplements+using+1H+NMR+spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Vitam.+Nutr.+Res%22%5BJournal%5D)">Rapid determination of coenzyme Q10 in food supplements using 1H NMR spectroscopy.</a> Int. J. Vitam. Nutr. Res. 83 (1), 67-72 (2013).</li>
<li>Monakhova, Y. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standardless+1H+NMR+determination+of+pharmacologically+active+substances+in+dietary+supplements+and+medicines+that+have+been+illegally+traded+over+the+internet%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Test.+Anal%22%5BJournal%5D)">Standardless 1H NMR determination of pharmacologically active substances in dietary supplements and medicines that have been illegally traded over the internet.</a> Drug Test. Anal. 5 (6), 400-411 (2013).</li>
<li>Berger, S., Braun, S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBerger%2C+S+%22200+and+more+NMR+experiments%3A+a+practical+course%22">200 and more NMR experiments: a practical course</a>. , Wiley-VCH. Weinheim. (2004).</li>
<li>Knothe, G., Kenar, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+the+fatty+acid+profile+by+1H-NMRspectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Lipid+Sci.+Technol%22%5BJournal%5D)">Determination of the fatty acid profile by 1H-NMRspectroscopy.</a> Eur. J. Lipid Sci. Technol. 106, 88-96 (2004).</li>
<li>Sacchi, R., Medina, J. I., Aubourg, S. P., Paolillo, I. G. L., Addeo, F. <a target="_blank" href="http://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/jf00032a016">Quantitative High-Resolution 13C NMR Analysis of Lipids Extracted from the White Muscle of Atlantic Tuna (Thunnus alalunga).</a> J. Agric. Food Chem. 41 (8), 1247-1253 (1993).</li>
<li>Dais, P., Misiak, M., Hatzakis, E. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/277335832_Analysis_of_marine_dietary_supplements_using_NMR_spectroscopy">Analysis of marine dietary supplements using NMR spectroscopy.</a> Anal. Methods. 7 (12), 5226-5238 (2015).</li>
<li>Pickova, J., Dutta, P. C. <a target="_blank" href="http://link.springer.com/article/10.1007/s11746-003-0809-7">Cholesterol Oxidation in Some Processed Fish Products.</a> J. Anal. Oil Chem. Soc. 80 (10), 993-996 (2003).</li>
<li>Siddiqui, N., Sim, J., Silwood, C. J. L., Toms, H., Iles, R. A., Grootveld, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multicomponent+analysis+of+encapsulated+marine+oil+supplements+using+high-resolution+1H+and+13C+NMR+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22J.+of+Lipid+Rsrch%22%5BJournal%5D)">Multicomponent analysis of encapsulated marine oil supplements using high-resolution 1H and 13C NMR techniques.</a> J. of Lipid Rsrch. 44 (12), 2406-2427 (2003).</li>
<li>Sua´rez, E. R., Mugford, P. F., Rolle, A. J., Burton, I. W., Walter, J. A., Kralovec, J. A. <a target="_blank" href="http://link.springer.com/article/10.1007/s11746-010-1638-2">13C-NMR Regioisomeric Analysis of EPA and DHA in Fish Oil Derived Triacylglycerol Concentrates.</a> J. Am. Oil Chem. Soc. 87, 1425-1433 (2010).</li>
<li>Youlin, X. A., Moran, S., Nikonowiczband, E. P., Gao, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Z-restored+spin-echo+13C+1D+spectrum+of+straight+baseline+free+of+hump%2C+dip+and+roll%5BTitle%5D)+AND+%22Magn.+Reson.+Chem%22%5BJournal%5D)">Z-restored spin-echo 13C 1D spectrum of straight baseline free of hump, dip and roll.</a> Magn. Reson. Chem. 46, 432-435 (2008).</li>
<li>Tengku-Rozaina, T. M., Birch, E. J. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/ejlt.201300357/abstract">Positional distribution of fatty acids on hoki and tuna oil triglycerides by pancreatic lipase and 13C NMR analysis.</a> Eur. J. Lipid Sci. Technol. 116 (3), 272-281 (2014).</li>
<li>Berry, S. E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Triacylglycerol+structure+and+interesterification+of+palmitic+and+stearic+acid-rich+fats%3AAn+overview+and+implications+for+cardiovascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nutr.+Res.+Rev%22%5BJournal%5D)">Triacylglycerol structure and interesterification of palmitic and stearic acid-rich fats:An overview and implications for cardiovascular disease.</a> Nutr. Res. Rev. 22 (1), 3-17 (2009).</li>
<li>Hunter, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+on+effects+of+dietary+fatty+acids+as+related+to+their+position+on+triglycerides%5BTitle%5D)+AND+%22Lipids%22%5BJournal%5D)">Studies on effects of dietary fatty acids as related to their position on triglycerides.</a> Lipids. 36, 655-668 (2001).</li>
<li>Vlahov, G. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/(SICI)1097-458X(199805)36:5%3C359::AID-OMR274%3E3.0.CO;2-Z/abstract">Regiospecific analysis of natural mixtures of triglycerides using quantitative 13C nuclear magnetic resonance of acyl chain carbonyl carbons.</a> Magnetic Res. in Chem. 36, 359-362 (1998).</li>
</ol>

Les auteurs n&#39;ont rien à dévoiler.

Modifications et stratégies de dépannage Qualité spectrale. La largeur de raie du signal RMN et donc la résolution du spectre RMN est fortement dépendante de calage, qui est un procédé pour l&#39;optimisation de l&#39;homogénéité du champ magnétique. Pour une analyse de routine, 1D est shimming n&#39;est pas nécessaire et suffisante d&#39;une 3D shimming, étant donné qu&#39;il est réalisé par le personnel de RMN sur une base régulière. Si cela est le cas, il faut effectuer un c...

La consommation de n -3 acides gras dans le régime alimentaire est avérée être bénéfique contre plusieurs maladies telles que des troubles cardiaques 1, 2, 3, 4 maladies inflammatoires et le diabète 5. Le régime alimentaire occidental est considéré comme pauvre en n -3 acides gras et donc la consommation de suppléments d&#39;huile de poisson est recommandé d&#39;améliorer la n -6 / -3 n équilibre dans la nutrition des consommateurs 1. Malgré la récente augmentation de la consommation de suppléments d&#39;huile de poisson, des questions demeurent sur la sécurité, l&#39;authenticité et la qualité de certains de ces produits. L&#39;analyse de la composition rapide et précise des suppléments d&#39;huile de poisson est essentiel d&#39;évaluer correctement la qualité de ces produits commerciaux et d&#39;assurer la sécurité des consommateurs. Les méthodes les plus communes pour l&#39;évaluation du supplément d&#39;huile de poissons sont chromatographie en phase gazeuse (GC) et la spectroscopie infrarouge (IR). Bien que ces méthodes sont très sensibles, ils souffrent de plusieurs inconvénients 6. L&#39; analyse GC prend beaucoup de temps (4-8 h) parce que la séparation et la dérivatisation des composés individuels est requis 7 et l&#39; oxydation des lipides peuvent se produire lors de l&#39;analyse 8, 9. Bien que la spectroscopie IR peut être quantitative, un modèle de prédiction doit être construit en utilisant la régression des moindres carrés partiels (PLSR), bien qu&#39;il y ait des exceptions dans lesquelles bandes IR peut être attribué à un seul composé 10. PLSR nécessite l&#39;analyse d&#39;un grand nombre d&#39;échantillons, ce qui augmente le temps de l&#39;analyse 11. Pour cette raison, il y a un intérêt croissant pour le développement de nouvelles méthodes d&#39;analyse qui permettent une analyse précise et rapide d&#39;un grand nombre d&#39;échantillons d&#39;huile de poisson. Des organisations telles que l&#39;OffiCE des compléments alimentaires (ODS) aux National Institutes of Health (NIH) et la Food and Drug Administration (FDA) ont collaboré avec l&#39;Association of Official Analytical Chemists (AOAC) pour développer ces nouvelles méthodes 12, 13. L&#39; une des méthodes d&#39; analyse les plus prometteurs pour le dépistage et l&#39;évaluation des matrices à plusieurs composants, tels que les suppléments alimentaires, est la spectroscopie par résonance magnétique (RMN) nucléaire 14, 15. spectroscopie RMN présente plusieurs avantages: il est une technique non destructive et quantitative, il faut un minimum d&#39;aucune préparation de l&#39;échantillon, et il se caractérise par une excellente précision et la reproductibilité. En outre, la spectroscopie RMN est une méthode respectueuse de l&#39;environnement car il utilise seulement de petites quantités de solvants. Le principal inconvénient de la spectroscopie de RMN est sa sensibilité relativement faible par rapport à d&#39;autres analytiméthodes cal Cependant, les progrès technologiques récents dans l&#39;instrumentation tels que des champs magnétiques forts, des sondes cryogéniques de différents diamètres, le traitement de données de pointe et polyvalents séquences d&#39;impulsions et de techniques ont augmenté la sensibilité jusqu&#39;à la plage des nM. Bien que l&#39;instrumentation RMN est le coût élevé, la longue durée de spectromètres RMN et les nombreuses applications de RMN réduisent le coût de l&#39;analyse à long terme. Ce protocole vidéo détaillé est destiné à aider les nouveaux praticiens dans le domaine éviter les pièges associés à 1 H et 13 C RMN analyse spectroscopique des suppléments d&#39;huile de poisson.

<table><tbody><tr><td>Instrument RMN Avance III 850</td><td>Bruker</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Instrument RMN Avance III 500</td><td>Sonde Bruker</td><td></td><td></td></tr><tr><td>TCI 5 mm Sonde</td> RMN <td>Bruker</td><td></td> Sonde <td>RMN à hélium refroidie à l’hélium (proton deetected) à trois canaux indépendants (1H, 13C, 15N)</td></tr><tr><td>BBO prodigy Sonde 5 mm</td><td>Bruker</td><td></td><td>Sonde d’observation refroidie à l’azote (noyaux X détectés), dotée de deux canaux ; un pour la détection 1H et 19F et un pour les noyaux X (couvrant de 15N à 31P)</td></tr><tr><td>Les</td> cônes RMN <td>Bruker</td><td></td><td>sont fabriqués à partir de matériaux polymères et sont dotés d’un joint torique en caoutchouc pour maintenir le tube RMN solidement en place</td></tr><tr><td>Topspin 3.5</td><td>Bruker</td><td></td><td></td></tr><tr><td>chloroforme deutéré</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>&nbsp ; 865-49-6</td><td>99,8 atome % D, contient 0,03 TMS</td></tr><tr><td>2,6-Di-tert-butyl-4-méthylphénol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>&nbsp ; 128-37-0</td><td>pureté >99 %</td></tr><tr>Échantillons <td></td><td></td><td></td><td>d’huile de poisson</td></tr><tr><td>Tubes RMN</td><td>New Era</td><td>NE-RG5-7</td><td>5mm OD Routine " R&rdquo; Série RMN Sample Tube</td></tr><tr><td>BSMS</td><td>Bruker Bruker</td><td></td><td>Systems Système de gestion ; dispositif de système de contrôle</td></tr></tbody></table>

rmn spectroscopie comme outil robuste pour l&#39;évaluation rapide du profil des suppléments lipid huile de poisson

NMR Spectroscopy as a Robust Tool for the Rapid Evaluation of the Lipid Profile of Fish Oil Supplements

Le régime alimentaire occidental est pauvre en n -3 acides gras, donc la consommation de suppléments d&#39;huile de poisson est recommandé d&#39;augmenter l&#39;apport de ces nutriments essentiels. L&#39;objectif de cette étude est de démontrer l&#39;analyse qualitative et quantitative des suppléments d&#39;huile de poisson encapsulées en utilisant une haute résolution H et spectroscopie RMN 13 C en utilisant deux instruments différents de RMN; 500 MHz et un instrument de 850 MHz. Les deux protons (1 H) et du carbone (13 C) Les spectres de RMN peuvent être utilisées pour la détermination quantitative des constituants majeurs des suppléments d&#39;huile de poisson. Quantification des lipides dans les suppléments d&#39;huile de poisson est atteint grâce à l&#39;intégration des signaux de RMN appropriés dans les spectres 1D pertinents. Les résultats obtenus par 1 H et 13 C - RMN sont en accord avec l&#39;autre, malgré la différence de résolution et de sensibilité entre les deux noyaux et les deux instruments. 1 H RMN offreSA analyse plus rapide par rapport à 13 C - RMN, comme le spectre peut être enregistré en moins de 1 min, par opposition à l&#39; analyse 13 C - RMN, qui dure de 10 minutes à une heure. Le 13 spectre de RMN C, cependant, est beaucoup plus informative. Il peut fournir des données quantitatives pour un plus grand nombre d&#39;acides gras individuels et peut être utilisé pour déterminer la distribution de position des acides gras sur le squelette glycerol. Les deux noyaux peuvent fournir des informations quantitatives en une seule expérience sans la nécessité d&#39;étapes de purification ou de séparation. La force du champ magnétique affecte principalement les 1 H spectres RMN en raison de sa résolution inférieure par rapport à 13 C RMN, cependant, même les instruments de RMN à plus faible coût peuvent être efficacement appliquées en tant que méthode standard par les laboratoires de l&#39; industrie alimentaire et de contrôle de la qualité.

1 H et 13 C Les spectres de RMN ont été recueillies pour des suppléments d&#39;huile de poisson disponibles dans le commerce en utilisant deux instruments de RMN; 850 MHz et un spectromètre de 500 MHz. Ces spectres peuvent être utilisés pour la détermination quantitative de composants d&#39;huile de poisson, comme l&#39;acide docosahexaénoïque (DHA) et l&#39; acide eicosapentaénoïque (EPA), ainsi que d&#39; autres composés tels que n - 1 des chaînes acyle e...

Ici, à haute résolution du 1 H et 13 C spectroscopie de résonance magnétique nucléaire (RMN) a été utilisé comme outil rapide et fiable pour l&#39; analyse quantitative et qualitative des suppléments d&#39;huile de poisson encapsulées.

RMN Spectroscopie comme outil robuste pour l&#39;évaluation rapide du profil des suppléments Lipid huile de poisson

The western diet is poor in n-3 fatty acids, therefore the consumption of fish oil supplements is recommended to increase the intake of these essential ...

L'objectif général de cette méthode est de déterminer le profil lipidique des suppléments d'huile de poisson à l'aide de la spectroscopie par résonance magnétique nucléaire. Cette méthode permet de répondre à des questions clés concernant l'analyse des lipides, telles que la teneur en lipides des suppléments d'huile de poisson et la distribution positionnelle des divers acides gras sur le squelette de glycérol. Le principal avantage de cette technique réside dans sa capacité à permettre une analyse rapide et robuste de plusieurs molécules différentes en un seul essai, sans étape de séparation ni de purification.Pour préparer les échantillons en vue d'une analyse RMN du proton et du carbone, prélever d'abord 120 microlitres, soit environ 110 milligrammes d'huile de poisson, à partir d'une capsule alimentaire à l'aide d'une seringue, puis placer l'échantillon dans un flacon en verre de 4 mL. Enregistrer la masse de l'huile de poisson. Utiliser 500 microlitres d'une solution mère de BHT pour dissoudre 100 milligrammes plus ou moins 10 milligrammes d'huile de poisson.Après avoir dissous l'huile, transférez toute la solution directement dans un tube RMN de haute qualité de cinq millimètres et fixez un bouchon. Analysez les échantillons dans les 24 heures suivant leur préparation. Insérez le tube RMN dans une turbine de rotation.Placer le rotor et le tube sur la partie supérieure d’un palmer gradué et pousser doucement le haut du tube jusqu’à ce que sa partie inférieure entre en contact avec le fond du palmer. Ensuite, placer le tube RMN dans un emplacement libre de la boîte à échantillons. Noter le numéro de l’emplacement où l’échantillon est placé.Pour charger l'échantillon dans l'appareil RMN, revenir à l'ordinateur de commande et saisir SX-numéro, où numéro correspond à l'emplacement dans le support d'échantillons contenant l'échantillon. Attendre que le signal du deutérium du chloroforme deutéré apparaisse à l'écran. Dès que le signal du deutérium est visible, taper verrouiller sur la ligne de commande et sélectionner le chloroforme deutéré dans la liste des solvants afin de verrouiller l'échantillon à l'aide de sa résonance deutérium.Saisissez « bsmsdisp » dans la ligne de commande pour vous assurer que la rotation n'est pas active. Si le bouton de rotation est vert, cliquez dessus pour désactiver la rotation. Après avoir saisi la commande « new » pour créer un nouvel ensemble de données, entrez un nom pour l'ensemble de données dans l'onglet nom et le numéro d'expérience dans l'onglet intitulé EXPNO.Utilisez le numéro un dans l'onglet numéro de processus intitulé PROCNO. Rédigez le titre de l'expérience dans l'onglet TITLE. Dans l'onglet Expérience, cliquez sur Sélectionner et choisissez le fichier de paramètres C13IG.Ensuite, cliquez sur « Définir l'élément sélectionné dans l'éditeur » et appuyez sur OK. Saisissez « getprosol » dans la ligne de commande pour obtenir les paramètres standards de la sonde RMN actuelle et du solvant. Puis, saisissez la commande « atma » pour effectuer le réglage automatique d'accord et d'adaptation d'impédance de la sonde pour les noyaux de carbone et de proton. Ensuite, effectuez un shimage par gradient unidimensionnel afin d'obtenir un champ magnétique hautement homogène et, par conséquent, une forme de raie optimale pour les signaux RMN.Pour ce faire, utilisez la procédure automatique standard de shim en 1D en exécutant simplement de manière séquencée les commandes « qu topshim 1dfast ss » ; « qu topshim tuneb ss » ; et « qu topshim report » dans la ligne de commande. Après l'optimisation des paramètres décrite dans le protocole, acquérez des spectres RMN du carbone en une dimension. Pour ce faire, accédez au jeu de données carbone et utilisez une séquence d'impulsions à découplage inverse par la commande « pulprog zgig » dans la ligne de commande.Saisissez des commandes sur la ligne de commande pour configurer le spectre avec nppm, le centre du transmetteur RF, le nombre d'analyses, le nombre d'analyses factices, le nombre de points de données et la durée d'impulsion pour un angle d'impulsion de quatre-vingt-dix degrés. Saisissez digmod baseopt dans la ligne de commande pour acquérir un spectre avec une ligne de base améliorée. Ensuite, réglez un délai de relaxation de 60 secondes pour l'instrument de 850 mégahertz en tapant di 60s dans la ligne de commande.Réglez le gain du récepteur à une valeur appropriée en utilisant la commande rga" pour le calcul automatique du gain du récepteur. Enfin, démarrez l'acquisition en tapant la commande d'impulsion zg" dans la ligne de commande. Pour traiter les données, tapez d'abord si 64K" dans la ligne de commande afin d'appliquer un remplissage par zéro et de définir la taille du spectre final à 64K.Ensuite, réglez le paramètre d'élargissement de raie à 1,0 hertz en saisissant lb 1.0 dans la ligne de commande pour appliquer une fonction de pondération avec un facteur d'élargissement de raie de 1,0 hertz avant la transformation 4ea. Exécutez la transformation 4ea en saisissant efp dans la ligne de commande. Puis effectuez la correction de phase automatique en tapant la commande apk dans la ligne de commande.Si des réglages de phase supplémentaires sont nécessaires pour améliorer davantage le spectre, cliquez sur l'onglet Traitement. Ensuite, cliquez sur l'icône de réglage de phase et sur les icônes de correction de phase pour la correction de phase d'ordre zéro et d'ordre un. En cliquant sur les icônes de correction de phase d'ordre zéro et d'ordre un, déplacez la souris jusqu'à ce que tous les signaux soient en mode absorption positive.Appliquez et enregistrez les valeurs de correction de phase en cliquant sur le bouton Retour et Enregistrer pour quitter le mode de correction de phase. Appliquez une fonction polynomiale d'ordre quatre pour la correction de la ligne de base lors de l'intégration en tapant la commande abs n"dans la ligne de commande. Pour exprimer les déplacements chimiques en ppm par rapport au TMS, zoomez sur le signal du TMS, puis cliquez sur l'icône d'étalonnage et placez le curseur avec la ligne rouge au sommet du signal RMN à référencer, dans ce cas le TMS.Pour ajuster l'intensité du seuil, utilisez le bouton central de la souris si nécessaire. Cliquez sur le bouton gauche et saisissez 0. Lorsque vous utilisez le BHT comme étalon interne, intégrez le pic à delta 151,45 en étendant de cinq hertz de chaque côté du pic.Ensuite, fixez l'intégrale égale au nombre de micromoles de BHT par 0,5 millilitre de la solution mère. Intégrez les pics d'intérêt en étendant cinq hertz de chaque côté du pic. S'il est nécessaire de se concentrer sur une région, cliquez sur l'icône de surbrillance pour la désactiver.Ensuite, cliquez avec le bouton gauche et faites glisser pour effectuer un zoom sur la région. Cliquez à nouveau sur l'icône de surbrillance pour activer la fonction d'intégration et passer au pic suivant. Cliquez avec le bouton gauche et faites glisser le curseur à travers l'intégrale.Cliquez sur le bouton Retourner les régions enregistrées. Voici un spectre représentatif de l'analyse RMN du carbone dans la région du carbone carbonyle. Les signaux de RMN de l'EPA et de la DHA aux positions sn-1, 3 et sn-2 sont indiqués.Ces signaux peuvent être utilisés pour la détermination quantitative de l'EPA et du DHA. On voit ici un spectre représentatif de l'analyse par RMN du proton. Les signaux de RMN de l'EPA et du DHA qui peuvent être utilisés pour leur détermination sont indiqués.Le spectre RMN du proton se caractérise par une largeur spectrale plus étroite par rapport au spectre RMN du carbone, et donc par une résolution spectrale plus faible. Une fois maîtrisée, cette technique peut être réalisée en moins de 30 minutes si elle est effectuée correctement. Après son développement, cette méthode a permis aux chercheurs dans le domaine de l'analyse des lipides d'analyser rapidement divers composants lipidiques présents dans des matrices multiphasiques, telles que les compléments alimentaires, les huiles végétales et les biocarburants.Après avoir visionné cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la manière d'appliquer la spectroscopie RMN du proton et du carbone à l'analyse du profil lipidique des suppléments d'huile de poisson. N'oubliez pas que le travail avec les champs magnétiques puissants produits par les spectromètres RMN peut présenter un danger extrême pour les stimulateurs cardiaques, les prothèses chirurgicales, ainsi que pour les objets électroniques tels que les cartes bancaires et les montres.

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Une méthode pour l'extraction de métabolite communautés planctoniques microbiens est présenté. Échantillonnage ensemble de la communauté est réalisée par filtration sur des filtres spécialement préparés. Après lyophilisation, aqueuse-solubles métabolites sont extraits. Cette approche permet une application de la métabolomique environnementaux trans-omique enquêtes de communautés microbiennes naturelles ou expérimentales.

Concentration des métabolites issus de communautés planctoniques à faible densité de l&#39;environnement en utilisant métabolomique résonance magnétique nucléaire

Une procédure est décrite colonisation progressive pour mieux évaluer son impact sur le métabolisme hépatique hôte. La colonisation est surveillé non invasive, en évaluant l'excrétion urinaire de métabolites microbiens co-par RMN basée sur le profilage métabolique tandis métabolisme hépatique est évalué par la Haute Résolution angle magique (MAS RH) RMN de profilage intacte biopsie.

Évaluer les changements métaboliques hépatiques pendant la colonisation progressive des axéniques de souris par 1 H NMR Spectroscopy

Procédé pour la détermination de la teneur en acides gras et de la composition en micro-algues sur la base de la rupture mécanique des cellules, le solvant d'extraction à base de lipide, de transestérification, et la quantification et l'identification des acides gras par chromatographie en phase gazeuse est décrit. Un étalon interne tripentadecanoin est utilisé pour compenser les pertes possibles lors de l'extraction et de transestérification incomplète.

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Un protocole simple de déterminer la teneur en lipide neutre de cellules d'algues en utilisant une procédure de coloration rouge Nil est décrite. Cette technique de gagner du temps offre une alternative aux protocoles de quantification des lipides traditionnels à base gravimétriques. Il a été conçu pour une application spécifique de la performance des bioprocédés de surveillance.

Une simple et rapide Protocole de mesure de lipides neutres dans les cellules algales par fluorescence

La neurochimie du cerveau des mammifères est modifiée dans de nombreuses maladies neurologiques et systémiques. Des profils caractéristiques des métabolites cérébraux peuvent être obtenus efficacement à partir d’extraits bruts de tissu cérébral. À cette fin, la spectroscopie RMN à haute résolution est utilisée, permettant une analyse quantitative détaillée des concentrations de métabolites (métabolomique).

Analyse métabolomique de cerveau de rat par la Résolution nucléaire Haute spectroscopie par résonance magnétique d&#39;extraits de tissus

Ce protocole décrit un débit unique pour les techniques analytiques et omiques complémentaires aboutissant à une caractérisation entièrement appariés de la matière organique naturelle et de la protéomique microbienne dans les écosystèmes différents. Cette approche permet des comparaisons robustes pour l’identification des voies métaboliques et les transformations importantes pour décrire la production de gaz à effet de serre et de prédire les réponses aux changements environnementaux.

Single-débit haute résolution analytique des Techniques complémentaires pour caractériser les mélanges complexes de matière organique naturelle

Cet article présente un protocole modulaire pour la lipidomique tissulaire et la transcriptomique, et la lipidomique plasmatique dans des modèles murins de maladies neurologiques ciblant les lipides sous-jacents à l’inflammation et à l’activité neuronale, les lipides membranaires, les messagers en aval et les enzymes/récepteurs codant pour l’ARNm sous-jacents à la fonction lipidique. Les procédures d’échantillonnage, de traitement des échantillons, d’extraction et de quantification sont...

Lipidomique et transcriptomique dans les maladies neurologiques

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Imagerie sans étiquette de la dynamique de stockage des lipides chez Caenorhabditis elegans à l’aide de la microscopie de diffusion Raman stimulée

Ce protocole est destiné à la détermination des lipides dans l’eau de mer et les spécimens biologiques. Les lipides dans les filtrats sont extraits avec du chloroforme ou des mélanges de chloroforme et de méthanol dans le cas des solides. Les classes de lipides sont mesurées par chromatographie sur couche mince de bâtonnets avec détection par ionisation de flamme et leur somme donne la teneur totale en lipides.

Détermination des classes totales de lipides et de lipides dans les échantillons marins

La lipidomique basée sur la spectrométrie de masse Shotgun fournit un instantané quantitatif sensible d’un large spectre de classes de lipides simultanément dans une seule mesure à partir de divers tissus de rongeurs.

Lipidomique de tissus de rongeurs

Découvrez l'analyse du profil lipidique des huiles de poisson par spectroscopie RMN 1H et 13C. Cette méthode rapide et robuste permet de quantifier les acides gras sans étapes de séparation.

RMN Spectroscopie comme outil robuste pour l'évaluation rapide du profil des suppléments Lipid huile de poisson

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