Une nouvelle utilisation d’échographie en trois dimensions de haute fréquence pour la caractérisation de grossesse précoce chez la souris

L’objectif global de cette procédure d’imagerie par ultrasons est de détecter, de surveiller et de caractériser la grossesse précoce chez la souris. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine de la biologie de la reproduction murine et à établir la croissance, le développement et la viabilité des grossesses précoces de souris. Le principal avantage de cette technique est que ces grossesses peuvent être caractérisées et phénotypées in vivo, sans interruption de la grossesse de la souris, ce qui permet une collecte longitudinale des données.

En général, les personnes qui ne connaissent pas cette méthode auront du mal à obtenir toutes les images dans un seul plan. Cela est dû aux petits mouvements incrémentiels de la sonde à ultrasons qui sont nécessaires. Commencez par préparer l’appareil à ultrasons.

Allumez le transducteur, puis fixez l’étage du moteur 3D au transducteur. Ensuite, fixez la sonde à la pince du transducteur. Maintenant, positionnez la souris, en décubitus dorsal, sur la plate-forme de surveillance.

Fournissez-lui un anesthésique via le cône nasal et collez doucement toutes ses pattes aux coussinets de surveillance de la fréquence cardiaque sur la plate-forme. Ensuite, frottez environ un ou deux millilitres de gel de transmission d’ultrasons sur l’abdomen. Positionnez ensuite la sonde à ultrasons sur le bas-ventre à l’aide de la platine motrice manuelle.

À l’aide de l’échographie, localisez la vessie, qui devrait apparaître comme un cercle noir rempli de nourriture juste céphalade à l’ouverture vaginale. Une fois la vessie localisée, déplacez très lentement la sonde pour visualiser l’utérus enceinte, qui devrait apparaître sous la forme d’un cylindre avec des zones rondes sur les sites de grossesse. Cela peut être décrit comme ressemblant à des perles sur une chaîne.

Maintenant, passez à l’imagerie 2D. Une fois que l’utérus enceinte a été identifié, commencez par le site de grossesse le plus proche de la vessie et déplacez lentement et séquentiellement les céphalades pour déterminer l’emplacement de tous les sites de grossesse. Enregistrez l’image.

Si le rein, la rate ou le foie peuvent être vus, alors le scanner est trop loin de la céphalie. Repositionnez la sonde plus près de la vessie et enregistrez l’image. Ensuite, imagez la corne utérine controlatérale de la même manière.

Figez l’image lorsque le cadre de l’échographie se trouve au centre du site de grossesse ou d’implantation et enregistrez l’image pour l’analyse. Maintenant ou plus tard, utilisez les images enregistrées pour mesurer les positions d’implantation en utilisant la réaction de décidualisation hyperéchogène comme marqueur. Cliquez manuellement sur l’outil de mesure et cliquez sur l’emplacement d’un site d’implantation.

Ensuite, faites glisser le curseur sur le site d’implantation suivant et cliquez à nouveau pour tracer une ligne. Le logiciel signale ensuite la longueur de la ligne. Une fois que tous les sites d’implantation ont été mesurés, utilisez la même technique et procédez à la mesure de la taille du sac gestationnel et de la taille du pôle fœtal.

Après l’imagerie 2D, positionnez la sonde dans une zone qui se trouve à peu près au milieu de l’image 3D souhaitée. Par exemple, si l’on imageait une pomme en 3D, positionnez la sonde au cœur. Une fois la sonde correctement positionnée, obtenez une acquisition 3D.

L’étage moteur 3D parcourra cette distance à travers l’utérus en une série d’étapes ou de cadres. Au fur et à mesure que le balayage est obtenu, assurez-vous que les structures prévues sont complètement capturées dans le balayage. Après avoir collecté le scan, chargez-le pour le traitement de l’image.

Choisissez les méthodes de traitement parallèles et rotatives, qui chargeront toutes les images 3D dans une seule boîte 3D. Ensuite, choisissez la taille du pas de 0,08 millimètre, puis commencez à une extrémité du bloc d’image et faites défiler tous les cadres pour vous familiariser avec les données. Ensuite, commencez à une extrémité de la pile et tracez manuellement le contour d’un objet d’intérêt.

Ensuite, passez à l’image suivante et tracez à nouveau manuellement le contour de l’objet. Continuez ce processus jusqu’à ce que tous les cadres aient été annotés manuellement. Une fois terminé, cliquez sur terminer pour obtenir une image 3D et un calcul du volume de l’objet.

Pour l’image, choisissez entre un maillage ou une superposition solide. Ensuite, choisissez de conserver ou de supprimer les informations de l’image environnante pour plus de clarté. L’échographie à haute fréquence peut détecter le développement d’un site d’implantation dès les 5,5 jours suivant la conception.

En utilisant l’endomètre décidualisé hyperéchogène plus léger comme marqueur des sites d’implantation, le nombre de sites d’implantation et l’espacement de ces sites, à quantifier à 6,5 jours après la conception. Au fur et à mesure que la grossesse progresse jusqu’à 7,5 jours après la conception, un sac gestationnel hypoéchogène plus foncé et un pôle fœtal sont tous deux facilement identifiables. Des reconstructions tridimensionnelles de l’utérus de la souris, 6,5 jours après la conception, ont été réalisées dans des formats de maille et de superposition solide.

À 7,5 jours après la conception, le scan 3D était tout aussi révélateur. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon d’obtenir des images échographiques précises en 2D et en 3D, pour caractériser une grossesse sans interruption. Le temps total nécessaire à l’acquisition d’une échographie, tant en 2D qu’en 3D, est d’environ 10 à 20 minutes entre les mains d’un utilisateur expérimenté.

Lorsque vous tentez cette procédure, il est important de vous rappeler de garder vos mouvements petits et progressifs. Cette technique a ouvert la voie aux chercheurs pour explorer les phénotypes de grossesse normaux et anormaux chez la souris.