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Purification de l’ADN Viral pour l’Identification des protéines virus et cellulaires associées
Purification de l’ADN Viral pour l’Identification des protéines virus et cellulaires associées
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JoVE Journal Immunology and Infection
Purification of Viral DNA for the Identification of Associated Viral and Cellular Proteins

Purification de l’ADN Viral pour l’Identification des protéines virus et cellulaires associées

Full Text
14,185 Views
08:26 min
August 31, 2017

DOI: 10.3791/56374-v

Jill A. Dembowski1, Neal A. Deluca1

1Department of Microbiology and Molecular Genetics,University of Pittsburgh School of Medicine

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Le but du présent protocole est de marquer spécifiquement et sélectivement isoler l’ADN virale des cellules infectées pour la caractérisation des protéines de génome viral lié.

L’objectif global de cette méthode est de purifier l’ADN du virus de l’herpès simplex de type un à partir de cellules infectées pour l’analyse protéomique des protéines associées au génome viral. Cette méthode fournit des informations clés sur l’implication des facteurs cellulaires et de l’infection par le virus de l’herpès. Le principal avantage de cette technique est qu’elle peut être adaptée pour purifier directement différentes populations d’ADN viral à partir de cellules infectées, ce qui permet d’analyser de multiples aspects de l’infection.

Commencer cette procédure par la culture de cinq cellules MRC comme décrit dans le protocole texte. Ensuite, diluez le HSV-1 dans une solution saline froide tris-tamponnée ou TBS. Pour les étapes suivantes, il est important d’éteindre le ventilateur et le capot de culture tissulaire pour éviter que les cellules ne se dessèchent.

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Immunologie numéro 126 herpès simplex virus (HSV) isolement des protéines sur l’ADN naissante (iPOND) accélérés native iPOND (aniPOND) microbiologie biologie moléculaire virologie isolement d’ADN cliquez sur réplication de l’ADN génome viral spectrométrie de masse chimie isolement des noyaux

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