Stimulation du nerf caverneux et enregistrement de la pression intracaverneuse chez un Rat

Les objectifs généraux de cette méthode sont de décrire une technique chirurgicale simplifiée de canulation de crus péniens pour l’enregistrement de la pression intracaverneuse et la dissection et l’isolement du nerf caverneux pour l’électrostimulation. Ce protocole expérimental peut être utilisé pour étudier la physiopathologie de la dysfonction érectile et tester de nouvelles thérapies. Le principal avantage de cette technique est qu’elle est reproductible, rapide et fiable.

Il a abordé et éliminé les principaux pièges décrits dans ce tutoriel. Bien que cette méthode puisse donner un aperçu de la dysfonction érectile, l’isolation du complexe d’électrodes nerveuses avec de la colle de silicone biocompatible est applicable à l’électrostimulation de tout nerf périphérique, permettant des tests physiologiques d’autres organes. Pour commencer cette procédure, après avoir anesthésié l’animal, rasez la moitié inférieure de son abdomen et de son périnée.

Frottez l’animal avec de l’alcool à 70 % et de la povidone iodée trois fois en alternance. Après cela, placez le rat sur un coussin chirurgical chauffé en position couchée. Appliquez une pommade sur les yeux et maintenez le rat anesthésié via un cône nasal avec 2,5 % d’isoflurane.

Ensuite, effectuez l’ensemble de l’intervention chirurgicale sous un microscope opératoire sur un champ opératoire. Par la suite, faites une incision cutanée d’un centimètre sur cinq millilitres latéralement à la ligne médiane en commençant au niveau de la base du pénis et en s’étendant vers le bas. Utilisez un coton-tige pour séparer soigneusement le fascia latéral au scrotum.

Après avoir disséqué le fascia, utilisez une paire d’écarteurs pour tirer les bords de la peau et le testicule vers l’arrière et localiser la tubérosité ischiatique à l’aide d’une palpation à l’aide d’un coton-tige. Disséquez le tissu adipeux médialement jusqu’à ce que le muscle ischiocaverneux soit visible. Utilisez une paire de pinces pour séparer le muscle longitudinalement et exposer la tunique albuginée.

La tunique albuginée apparaîtra sous la forme d’une structure blanche brillante. Après avoir calibré les paramètres du système, insérez le tube à travers la peau du périnée, en vous assurant qu’il est parallèle aux crus du pénis. Ensuite, laissez la ligne en place et gardez l’incision humide avec une solution saline.

Dans cette procédure, faites une incision abdominale médiane inférieure de deux centimètres à travers la peau. Créez une incision correspondante à travers le fascia le long de la ligne blanche pour exposer la vessie et la prostate. Utilisez les écarteurs pour obtenir une bonne exposition.

Ensuite, utilisez des cotons-tiges pour séparer la prostate du tissu adipeux. Ajustez les écarteurs et terminez la dissection jusqu’à ce que l’on obtienne une visualisation claire du MPG et du CN circulant sur la face latérale dorsale de la prostate. Après avoir localisé le MPG et le CN, incisez soigneusement le fascia recouvrant le nerf de deux à cinq millimètres distal du MPG.

Ensuite, étalez le tissu de chaque côté du nerf et en dessous pour libérer une portion de quatre millimètres de long, puis glissez une suture sous le nerf. Élevez légèrement le nerf à l’aide de la suture pour faciliter le placement des crochets de l’électrode bipolaire autour du nerf. Laissez un assistant mélanger la colle silicone à deux composants avec la pointe d’une aiguille à insuline pendant cinq secondes.

Séchez le nerf et appliquez la colle sur la zone autour des crochets et du nerf. Gardez le nerf élevé en tirant légèrement sur l’électrode pendant environ une minute pour permettre à la colle de sécher. Ensuite, retirez les enrouleurs, à l’exception des enrouleurs du côté droit pour éviter toute traction ou torsion de l’électrode.

Par la suite, mouillez les organes exposés avec une solution saline et appliquez de la gaze imbibée de solution saline sur l’incision. Dans cette procédure, rétablissez la visualisation de la tunique albuginée à l’aide d’écarteurs. Assurez-vous de ne pas attacher les écarteurs au muscle ischiocaverneux, car cela déformerait les crus.

Ensuite, fixez l’aiguille à la tubulure PE50 et rincez la tubulure avec une solution saline héparinée avant de l’introduire dans la tunique albuginée. Gardez la tunique albuginée étirée et tenez le muscle sus-jacent distal jusqu’au point d’insertion avec votre main dominante. Ensuite, tenez l’aiguille dans votre main non dominante et insérez-la dans le corps caverneux.

Rincez la conduite pour confirmer le bon placement dans les corps caverneux sans fuite. L’insertion de l’aiguille dans le corps caverneux pour l’enregistrement de la pression constitue une étape critique. Lors du déploiement de l’aiguille dans les crus, il est important que les crus soient étirés et que l’aiguille soit déployée parallèlement à sa course.

Rincez le tube et appuyez sur les crus pour tester la ligne. Assurez-vous qu’il n’y a pas de fuites. Après cela, fixez le tube à la table avec du ruban adhésif pour éviter de tirer accidentellement sur la ligne.

Ensuite, retirez les écarteurs. Réglez les paramètres d’un stimulateur et appliquez la stimulation pendant 50 secondes avec un minimum d’une minute de repos entre les stimulations. Cette figure montre une première réponse diminuée avec une stimulation de 50 millimètres de mercure, qui est suivie d’une deuxième et d’une troisième stimulation de 66 millimètres de mercure.

Ensuite, les mesures ultérieures ont été enregistrées au niveau normal à 73 millimètres de mercure. Et voici la stabilité des résultats en utilisant ce protocole avec 10 stimulations consécutives entre 75 et 78 millimètres de mercure. Cette figure montre les doses d’anesthésie efficaces sur la pression intracaverneuse.

Une réponse diminuée et plus fluctuante à l’augmentation de l’isoflurane par rapport à la réponse stable à 2 % dans les deux premières et les trois dernières stimulations a été observée. La trace bleue en haut montre la pression artérielle principale constante. Cette figure montre l’effet du type d’anesthésie sur la pression intracaverneuse.

Les stimulations initiales effectuées sous anesthésie à l’isoflurane ont montré une augmentation de la pression de 80 millimètres de mercure. Une fois que le fentanyl midazolam a été administré, il y a eu une augmentation de la réponse à 110 millimètres de mercure. Cette figure montre l’effet de l’administration d’oxygène par le cône nasal.

L’arrêt de l’administration d’oxygène par le cône nasal a entraîné une réduction significative de l’augmentation de la pression caverneuse avec la stimulation nerveuse caverneuse. Aucun effet sur la pression artérielle principale n’a été noté. Une fois maîtrisée et si elle est effectuée correctement, cette procédure peut être complétée en 30 minutes.

Lors de l’exécution des stimulations, il est important de se rappeler que le type et le niveau d’anesthésie et d’oxygénation ont un impact majeur sur la pression intracaverneuse. À la suite de cette procédure, différents agents peuvent être testés pour répondre aux questions liées à la physiopathologie de la dysfonction érectile et à l’introduction de nouveaux traitements. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une compréhension approfondie de la façon d’effectuer la stimulation nerveuse de la canule, y compris l’isolement de l’électrocomplexe nerveux avec de la colle d’étanchéité et l’enregistrement de la pression intracaverneuse après une dissection mini-invasive et une canulation des parties caverneuses.