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DOI: 10.3791/56829-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol outlines a surgical procedure to create a reliable animal model of cochlear implantation using guinea pigs. It aims to facilitate research on pharmaceutical interventions and electrode performance in preserving hearing thresholds.
Le but du présent protocole est de fournir un modèle animal d’implantation cochléaire, qui peut être utilisé pour traiter une multitude de questions de recherche. Les applications potentielles incluent l’évaluation des interventions pharmaceutiques ou stimulation électrique pour des effets bénéfiques sur les seuils d’audition ou d’impédance de l’électrode.
L’objectif global de cette intervention chirurgicale est de fournir un modèle animal fiable et polyvalent d’implantation cochléaire à l’aide du cobaye. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine des implantations cochléaires, par exemple si les interventions pharmaceutiques ou les électrodes nouvellement développées ont des effets bénéfiques sur la préservation résiduelle de l’audition ou l’impédance des électrodes. Le principal avantage du cochon d’Inde est l’accès rapide à l’oreille interne relativement grande, ce qui permet d’obtenir un modèle animal d’implantation cochléaire sûr, fiable et polyvalent.
Pour cette procédure, il est important d’avoir un microscope chirurgical, une perceuse, une plaque chauffante et un oxymètre de pouls positionnés autour de l’expérimentateur pour une manipulation facile pendant l’opération. Réglez le coussin chauffant à 38 degrés Celsius. Suivez la technique stérile.
Enfilez un chapeau, un masque et des gants. Disposez ensuite les outils chirurgicaux stérilisés pour l’implantation cochléaire. Ensuite, préparez un morceau de fil d’or isolé au téflon de 3,5 centimètres de long en retirant soigneusement trois millimètres d’isolant d’une extrémité et cinq millimètres d’isolant de l’autre extrémité.
Ensuite, coupez une deuxième longueur de fil d’or de 2,5 centimètres de long et retirez cinq millimètres d’isolant aux deux extrémités. Stérilisez ensuite les deux fils avec de l’alcool. Ensuite, anesthésie un cobaye à l’aide d’un cocktail anesthésique comme indiqué dans le protocole textuel.
Rasez-lui ensuite la tête et placez-le sur le ventre sur la plaque chauffante. Ensuite, ouvrez soigneusement la bouche du cochon d’Inde avec un petit laryngoscope et retirez tous les débris alimentaires de la cavité buccale par aspiration. Ensuite, insérez soigneusement un tube gastrique dans l’œsophage en poussant lentement vers l’estomac jusqu’à ce qu’une résistance se fasse sentir.
Vérifiez les niveaux de saturation en oxygène pour vous assurer que le tube n’est pas dans la trachée. Ensuite, injectez un mélange de solution saline physiologique, de glucose à 5 % et d’enrofloxacine dans le coussinet adipeux du cou à l’aide d’une aiguille de calibre 23. Préparez le champ opératoire en utilisant une alternance de gommages de povidone iodé et d’éthanol à 70 %, puis drapez l’animal.
Pour une utilisation analgésique, la lidocaïne redose également l’animal avec un anesthésique si nécessaire. Commencez la chirurgie par une incision cutanée de deux à trois centimètres, de trois à cinq millimètres en arrière du pavillon de l’oreille à l’aide d’un scalpel. Pour faire face aux saignements, utilisez la cautérisation bipolaire.
Ensuite, palpez la proéminence de la bulle auditive et utilisez un scalpel chirurgical numéro 15 ou des ciseaux chirurgicaux pour couper soigneusement les muscles de la région rétro-auriculaire. Pour disséquer les muscles de la bulle, écartez doucement les muscles et utilisez un écarteur pour exposer toute la longueur de l’incision afin d’accéder sans entrave à la bulle. Utilisez maintenant la pointe du scalpel numéro 15 pour faire un trou dans la bulle.
Lorsque l’os est perforé, agrandissez le trou au besoin pour inspecter les structures de l’oreille moyenne. Mettez l’animal en position fléchie et inspectez l’ouverture. La rotation basale de la cochlée et la niche ronde de la fenêtre doivent être visibles.
Gardez un œil sur les niveaux d’oxygène de l’animal lorsqu’il est en position fléchie. Pour continuer, repositionnez l’animal sur le ventre et exposez le vertex à l’aide d’une incision rectangulaire. Ensuite, retirez la peau d’accise, disséquez le périoste et nettoyez le périoste à l’aide d’un scalpel.
Ensuite, faites un petit crochet sur l’extrémité exposée de trois millimètres du fil de 3,5 centimètres. Guidez ensuite l’autre extrémité du fil d’or par voie sous-cutanée jusqu’au sommet. À l’aide d’un cathéter veineux périphérique de calibre 18 à l’aide d’une micro-pince.
À l’aide d’une deuxième paire de micro-pinces, positionnez soigneusement l’extrémité crochue du fil dans l’oreille moyenne. Ensuite, infléchissez la tête de l’animal pour visualiser la zone de la niche de la fenêtre ronde à travers la bullostomie et accrochez le fil d’or à la proéminence osseuse à l’aide d’une micro-pince. Maintenant, tout en maintenant une légère tension sur le fil d’or, fixez-le au bord crânien de la bullostomie à l’aide de 10 à 15 microlitres de cyanoacrylate délivrés à partir d’une aiguille de calibre 27.
Les mesures de base peuvent maintenant être prises à partir du fil d’or. Ensuite, pour monter l’électrode, mettez l’animal en position couchée. Et à l’aide d’une fraise d’un millimètre, faites deux trous d’un millimètre en avant de la suture lambda.
N’endommagez pas la dure-mère. Ensuite, implantez des vis dans les trous pour exploiter le connecteur de l’électrode. Utilisez maintenant un cathéter veineux périphérique de calibre 18 pour guider l’électrode du connecteur à la bulle dans une couche de tissu aussi près que possible du crâne.
Ensuite, placez 0,5 à 0,7 millilitre de ciment dentaire semi-fluide entre les vis à l’aide d’une spatule et positionnez le connecteur d’électrode entre les vis. Gardez le connecteur stable en position pendant que le ciment dentaire durcit. Avec le repositionnement latéral de l’animal, procédez en perçant soigneusement la cochléostomie à un millimètre de la fenêtre ronde.
Percez à l’aide d’une meule diamantée de 0,5 millimètre à 5000 tr/min. Ensuite, insérez soigneusement l’électrode de quatre millimètres dans la rampe tympanique. Retirez ensuite l’électrode et répétez l’insertion.
Appliquez ensuite du cyanoacrylate pour fixer l’électrode. Une implantation stable permettra un plus grand décalage du seuil auditif. Il est donc important de stabiliser le bras utilisé pour insérer l’électrode contre la table afin de minimiser la probabilité de mouvements saccadés indésirables.
Ensuite, la bullostomie est fermée avec environ 0,3 millilitre de ciment dentaire. Et le déplacement du ciment dentaire dans la bulle doit être évité. Ensuite, fermez l’incision rétroauriculaire à l’aide de sutures résorbables 5-0.
Tournez ensuite l’animal en position couchée. Ensuite, utilisez une pince pour saisir le bord postérieur de l’incision rectangulaire au niveau du sommet. Et avec des ciseaux, faites un tunnel sous-cutané de deux centimètres dans le cou de l’animal.
À travers le tunnel, implantez le fil d’or de 2,5 centimètres à l’aide d’une pince. Positionnez l’extrémité avec le fil le moins exposé sur la broche désignée du connecteur, puis soudez la connexion. Ensuite, soudez l’électrode de la niche de fenêtre ronde à la broche appropriée du connecteur.
Après avoir terminé les soudures, appliquez plus de ciment dentaire pour couvrir entièrement les broches isolées et l’électrode. L’implantation est terminée. Les seuils de CAP spécifiques à la fréquence pré et postopératoire chez l’animal présenté étaient presque inchangés dans les basses fréquences.
Alors qu’un décalage de seuil d’environ 25 à 30 décibels a été atteint dans la zone des hautes fréquences à partir de huit kilohertz. La réaction d’un corps étranger à l’électrode implantée peut varier considérablement. Il ne peut y avoir de réaction visible ou une grande partie de la rampe tympanique peut être remplie de tissu fibreux.
Il est même possible de fracturer la lame spirale osseuse lors de l’insertion de l’électrode CI. Dans ce cas, la fracture a provoqué une perte de cellules ganglionnaires spirales, une fibrose et une ostéogenèse dans le canal vestibulaire et une perte de l’organe de Corti. De telles fractures peuvent expliquer des dépassements de seuil plus élevés que prévu chez certains animaux.
Une fois maîtrisée, cette technique peut être réalisée en deux heures et demie si elle est bien exécutée. Si des mesures auditives peropératoires sont effectuées, le temps nécessaire à l’ensemble de la procédure peut augmenter considérablement. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon de réaliser l’implantation cochléaire chez le cobaye.
À l’aide de ce modèle animal, vous pouvez aborder diverses questions de recherche dans ce domaine.
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