Ingénierie « Golden » Fluorescence par l’Incorporation de la pression sélective d’amino-acides Non canoniques et analyse des protéines par spectrométrie de masse et de Fluorescence

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11:51 min

27 avril 2018

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Biologie synthétique permet l’ingénierie des protéines avec des propriétés sans précédent à l’aide de l’insertion précurseur des aminoacides non canonique. Ici, nous avons présenté comment une variante spectralement décalée vers le rouge d’un fluorophore GFP-type avec des propriétés spectroscopiques de fluorescence roman, appelée protéine fluorescente « or » (GdFP), est produite par e. coli par incorporation de pression sélective (SPI).

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Protéine fluorescente à l'or

Chapters in this video

0:05

Titre

1:46

Expression de protéines recombinantes

4:05

Purification de la protéine cible par chromatographie d'affinité sur ions métalliques immobilisés

5:20

Analyse de la masse de la protéine intacte par chromatographie liquide haute performance couplée à la spectrométrie de masse à ionisation par électrospray et temps de vol

6:38

Mesures de la durée de vie de fluorescence et spectres associés à la décroissance de la GdFP

7:59

Résultats : Analyse de la protéine fluorescente dorée par spectrométrie de masse et fluorescence

10:13

Conclusion

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