Digestion des protéines, Ultrafiltration et chromatographie d’Exclusion afin d’optimiser l’isolement des Exosomes de sérum et de Plasma sanguin humain

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13 avril 2018

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Nous présentons ici un protocole visant à purifier les exosomes de plasma et de sérum réduit co purification de protéines sanguines non-exosomal. Le protocole optimisé inclut l’ultrafiltration, le traitement de la protéase et chromatographie d’exclusion. Améliorée de purification des exosomes des analyses en aval avantages, y compris la quantification plus précise des vésicules et la caractérisation de la protéomique.

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Isolement d'exosomes

Chapters in this video

0:04

Titre

1:06

Préparation de l'échantillon brut (plasma ou sérum) par sédimentation des vésicules de grande taille et des débris cellulaires

2:04

Digestion des protéines sanguines non exosomales et élimination des petites protéines/peptides par ultrafiltration sur centrifugeuse

4:21

Purification des vésicules par chromatographie d'exclusion stérique (SEC)

5:45

Concentration des exosomes purifiés/quantification des protéines totales et quantification/dimensionnement des exosomes par analyse de suivi de nanoparticules (NTA)

7:09

Résultats : Augmentation du rendement des vésicules et des marqueurs spécifiques aux exosomes après purification

8:15

Conclusion

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