Digestion des protéines, Ultrafiltration et chromatographie d’Exclusion afin d’optimiser l’isolement des Exosomes de sérum et de Plasma sanguin humain

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09:22 min

13 avril 2018

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Nous présentons ici un protocole visant à purifier les exosomes de plasma et de sérum réduit co purification de protéines sanguines non-exosomal. Le protocole optimisé inclut l’ultrafiltration, le traitement de la protéase et chromatographie d’exclusion. Améliorée de purification des exosomes des analyses en aval avantages, y compris la quantification plus précise des vésicules et la caractérisation de la protéomique.

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Isolement d exosomes

Chapters in this video

0:04

Title

1:06

Preparation of Crude Sample (Either Plasma or Serum) by Pelleting Larger Vesicles and Cellular Debris

2:04

Digestion of Non-exosomal Blood Proteins and Removal of Small Proteins/Peptides by Centrifuge Ultrafiltration

4:21

Purification of Vesicles by Size Exclusion Chromatography (SEC)

5:45

Concentration of Purified Exosomes/Total Protein Quantification and Quantification/Sizing of Exosomes by Nanoparticle Tracking Analysis (NTA)

7:09

Results: Increased Vesicle Yield and Exosome-specific Markers After Purification

8:15

Conclusion

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