Protocole pour créer des blessures chroniques chez les souris diabétiques

Ce modèle de souris peut aider à répondre aux questions dans le domaine médical de la chronicité des plaies. L’avantage majeur de ce modèle est que les blessures chroniques chez la souris imitent de nombreux aspects des blessures chroniques chez l’homme. Pour commencer, placez la souris sur une surface propre et maintenez-la en place en pinçant la base de sa queue.

Ensuite, préparez les tondeuses à cheveux et être prêt à les retirer rapidement si la souris fait des mouvements soudains. Raser tout le dos du cou à la queue, y compris tout autour de la queue. Exécutez légèrement la lame contre la direction de la croissance des cheveux pour la coupe la plus efficace.

N’appuyez pas sur les tondeuses profondément dans la peau car cela peut meurtrir ou couper. Ensuite, préparez la peau pour une application de lotion depilatory. Humidifier la peau avec une serviette en papier imbibé d’eau pour prévenir les brûlures chimiques.

Appuyez légèrement avec suffisamment de pression pour mouiller les cheveux coupés contre la peau. Ensuite, pendant que la peau est mouillée, frotter une petite cuillerée de lotion depilatory dans la région rasée pendant 15 à 20 secondes. Une fois appliquée, laisser la lotion réagir avec la peau pendant 20 à 45 secondes.

Avant de rincer la lotion, essuyez légèrement un peu de lotion à divers endroits pour vérifier la réaction. Si la peau est rose et glachée, la réaction est complète. Ensuite, saisir la souris pour la laver.

En utilisant la main non dominante avec le pouce appuyez sur la base de sa queue contre la paume et fermez les autres doigts. Ensuite, le nez de la souris et loin de l’eau, laissez l’eau courir sur le dos de l’animal. Puis rapidement, mais doucement, frotter le dos de la souris avec l’autre main pour laver la lotion.

Après avoir enlevé toute la crème depilatory, séchez la peau avec une serviette en papier. Il est important de ne pas appliquer de lotion sur les oreilles, la queue ou n’importe où près du visage. Si cela devait se produire, essuyez immédiatement la lotion avec une serviette humide, puis passez de l’eau sur la souris pour éviter les dommages à ces zones.

Si des taches foncées sont remarquées après l’utilisation de la crème, réappliquez la crème dans ces zones. Les taches foncées de la peau pousseront les cheveux plus rapidement tout au long de la durée de l’expérience. Donc, couper les cheveux courts tous les trois à cinq jours si nécessaire.

Un patch ou deux qui ne sont pas sur le site de blessure est acceptable, mais si l’arrière de la souris a des taches plus sombres, ne l’utilisez pas pour le modèle de plaie chronique. Après avoir enlevé les cheveux, maison de la souris seule pendant au moins un jour avant de blesser parce que la peau sera trop sensible de la lotion depilatory. 30 minutes avant la chirurgie, injecter la souris avec 120 microlitres de buprénorphine intraperitoneally dans PBS stérile.

Tous les volumes de cette procédure supposent une souris de 60 grammes. 20 minutes avant la chirurgie, injecter la souris avec 480 microlitres d’ATZ intraperitoneally dans PBS stérile. Fendre le volume de chaque côté de l’abdomen.

Après l’administration de l’ATZ, placez la souris dans un petit récipient en plastique sur un coussin chauffant chaud jusqu’à ce que la chirurgie commence. Couvrir le petit contenant d’une serviette en papier pour aider à contenir la chaleur. La souris doit se calmer au fur et à mesure qu’elle se réchauffe.

Après avoir confirmé un état anesthésié, procéder à la blessure. Pour commencer la procédure de blessure, vaporiser un lingette chem avec 70% d’éthanol pour essuyer le dos de la souris pour nettoyer le site de la plaie et la surface de la peau. Ne pas essuyer excessivement ou il y aura un risque de tuer les bactéries présentes sur la peau.

Le succès du modèle de blessure chronique repose sur des conditions non stériles. Ces souris ne sont pas exemptes de germes et sont logées dans un vivarium conventionnel. Le microbiome bactérien qui réside sur la peau est crucial pour l’initiation et le développement ultérieurs des plaies chroniques lors du traitement avec des inhibiteurs des enzymes antioxydantes.

Maintenant, considérez où l’endroit de la blessure. Idéalement, utilisez le côté dorsal de la souris centrée et loin des taches sombres de la peau. Maintenant, effectuez la blessure à la procédure de pansement en 30 à 45 secondes.

Appuyez d’abord légèrement sur un poinçon de biopsie de la peau de sept millimètres sur le site de la plaie désirée et tordez le poinçon juste assez profond pour laisser une impression de poinçonnage. Excisez ensuite la peau esquissée en tirant vers le haut du centre du poinçon avec des pinces à épiler et en coupant le long du contour avec des ciseaux chirurgicaux. Une fois terminée, couvrir fermement la plaie d’un demi-morceau de film transparent.

Dans les 10 minutes qui ont pris la blessure, appliquer un aliquot de 60 microlitres de MSA dans le PBS stérile et déposer msa topiquement sur la plaie. Plus tard, six heures après la chirurgie, administrer un autre fait de buprénorphine. Des doses supplémentaires peuvent être administrées au besoin.

L’initiation chronique de blessure a lieu en moins de six heures et la marge de blessure est visiblement altérée du stress oxydant. Une plaie chronique est une plaie qui reste ouverte, agrandie par rapport à la plaie initiale et contient du biofilm. Après 20 jours, la blessure est à pleine chronicité.

Les bactéries formant des biofilms qui dominent le site de la plaie comprennent Pseudomonas aeruginosa, Enterobacter cloacae et diverses espèces de Staphylococcus et de Corynebacterium. Ces bactéries se trouvent également dans les plaies chroniques humaines. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon de créer des blessures chroniques chez la souris.

Une fois que vous avez établi ces blessures chroniques, vous pouvez alors les utiliser pour étudier de nombreux mécanismes moléculaires cellulaires impliqués dans l’initiation de la chronicité des plaies.