Détection des 3-Nitrotyrosine dans des environnements atmosphérique via une haute performance système détecteur électrochimique-chromatographie en phase liquide

Cette méthode peut aider à répondre à la question clé dans la recherche environnementale sur nitrapyrine et 3-nitrotyrosine. Le principal avantage de cette technique est qu’il s’agit d’une méthode unique et très sensible pour détecter la 3-nitrotyrosine sur les filtres à échantillon d’air. Pour recueillir le total des particules en suspension ou des particules de moins de sept microns, pesez d’abord un filtre liant de 3 litres et fixez-le sur un échantillonneur d’air à fort volume. Couvrez le filtre d’un sélecteur de taille de particule pour recueillir les PM7 ou laissez le filtre à découvert pour recueillir le total des particules en suspension. Faire fonctionner l’échantillonneur d’air à 1000 litres par minute en continu pendant sept jours. Chargez les pré-filtres dans une unité de classification de taille et installez l’unité de classification de taille et un filtre de secours sur l’échantillonneur d’air à faible volume. Exécutez l’échantillonneur d’air à 116 portées par minute en continu pendant sept jours pour recueillir pm2,5 sur le filtre de secours. Lorsque l’échantillonnage se termine, enregistrez le volume total du débit. Pesez le filtre et calculez le poids des particules collectées. Sceller le filtre dans un sac en plastique et le stocker à 30 degrés Celsius.Next préparer 500 microlitres de 6X cocktail protéase non spécifique et tampon d’acétate et le placer dans une membrane de dalasis avec une coupure de poids moléculaire de 5000 daltons. Immerger la membrane remplie dans 1 L du tampon d’acétate et remuer à 4 degrés Celsius pendant 24 à 36 heures, en remplaçant le tampon toutes les 12 heures pour enlever indogène 3-Nitrotyrosine et Nitrite.Then mesurer la concentration de protéines dans la solution de protéase dialysée avec un essai de protéines acides bicinchoniniques. Après cela, retirez un filtre du congélateur et laissez-le chauffer à température ambiante tout en étant scellé dans le sac. Puis poinçonner jusqu’à cinq cercles de 6 millimètres de large de la zone couverte de particules du filtre, et placer les cercles dans un tube de micro centrifugeuse de 1,5 millilitres. Préparer 300 microlitres de tampon d’acétate contenant 50