Évaluation non invasif de la fonction musculaire de dorsifléchisseurs chez la souris

Ce modèle peut aider à répondre aux questions clés dans le domaine de la fonction de contraction musculaire. Comme le mécanisme de production de force, pendant la progression de la maladie. Le principal avantage de cette technique est que cette procédure est une non invasive, qui peut être effectuée sur le même animal sur différents points de temps, pour surveiller la progression de la maladie et le traitement.

La démonstration visuelle de cette méthode est essentielle, car la modification de l’une ou l’autre de ces étapes peut entraîner une augmentation de la variabilité de vos résultats. Par conséquent, la pratique peut vous permettre d’obtenir des résultats plus cohérents. Pour commencer cette procédure, installez la pince du genou de la souris sur la plate-forme, ainsi que la plaque de la souris sur le transducteur.

Ensuite, allumez la plate-forme de chauffage à 37 degrés Celsius. Ouvrez le logiciel dynamique de contrôle musculaire sur le bureau. Sur la liste de drop down de configuration, sélectionnez la tige instantanée et modifiez les paramètres de temps d’exécute à 120 secondes.

Dans la base d’autosave étiquetée fenêtre, entrez le nom de l’emplacement du fichier autosave. Cliquez sur la case à cochée à gauche de la fenêtre de base autosave, et changez-la pour activer l’autosave. En haut de l’écran de contrôle DMC, cliquez sur séquenceur, qui ouvrira une nouvelle fenêtre pop-up.

Sélectionnez séquence ouverte et sélectionnez le protocole à utiliser. Cliquez ensuite sur séquence de charge et fermez la fenêtre. Pour préparer l’animal à l’expérience, retirez les cheveux sur la jambe droite de la souris avec des tondeuses électriques.

Placez l’animal en position supine sur la plate-forme chauffée et nettoyez la jambe droite avec 70% d’alcool et d’iode. À ce stade, ajuster l’Isoflurane à 2%, avec un débit d’oxygène à un litre par minute. Placez le pied sur la plaque et fixez-le à l’aide de ruban médical.

Appliquez ensuite le gel conductrice sur la peau où des électrodes seront placées. Ensuite, serrez le genou pour stabiliser la jambe pendant l’intervention. Utilisez les boutons sur la plate-forme pour positionner son membre postérieur afin de former un angle de 90 degrés à la cheville.

Une fois que la souris est fixée sur la plate-forme, placez les électrodes sous la peau de la jambe droite, l’une près de la tête du péroné, et l’autre électrode plus consistalement sur le côté latéral de la jambe. Les électrodes sont placées avec prudence afin d’obtenir une stimulation suffisante du nerf périnéal. Aussi cette position peut être ajustée pour atteindre un pic stable, visualisé sur l’écran.

Une fois ces étapes réalisées, ajustez le stimulateur bi-phase à haute puissance pour obtenir une stimulation du nerf pérional qui entraîne un couple maximal de dorsiflexion. Pendant la stimulation, tournez le transducteur dans le sens des aiguilles d’une montre pour donner des valeurs négatives, qui sont importantes pour s’assurer que les électrodes stimulent seulement les muscles fléchisseurs dorsi par le nerf peroneal. Une fois cette étape atteinte, stabiliser les électrodes à l’aide d’une pince, afin d’éviter tout mouvement pendant la procédure.

Atteindre le pic négatif lentement et progressivement est important pour vérifier que les électrodes sont placées dans la bonne position, et la tension est suffisante pour atteindre la force maximale. Par la suite, arrêtez la tige instantanée sur le logiciel. Sur l’écran principal, allumez la séquence de démarrage étiquetée bouton « pour démarrer la séquence de configuration précédente.

Une fois les mesures de force terminées, retirez les électrodes, retirez le ruban adhésif et relâchez la pince du genou. Éteignez l’Isoflurane et maintenez la livraison d’oxygène pendant quelques minutes pour faciliter le rétablissement de l’animal. Une fois que la souris commence à bouger et reprend conscience, retournez-la dans la cage.

Ce graphique montre les données représentatives de la courbe de fréquence de force d’une souris à travers le temps, où la procédure a été répétée une fois par semaine jusqu’à ce que cinq points de temps aient été complétés. Ces observations ont montré des valeurs de production de force constantes tout au long des points de temps. Cette procédure s’est également montrée cohérente entre différentes souris, comme indiqué dans la zone représentative, sous la courbe de la stimulation FFC, plus de cinq observations différentes chez six souris testées une fois par semaine.

Après son développement, cette technique permet aux chercheurs dans le domaine des maladies neuromusculaires d’étudier les changements temporels de la fonction musculaire dans la mise en miroir des modèles de la maladie.