Name: La sténose auriculaire gauche induit Arterialization veineuse pulmonaire et l’Hypertension pulmonaire chez le Rat groupe 2 (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-11-18T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 34 s
Description: Découvrez la technique de sténose auriculaire gauche chez le rat pour modéliser l'hypertension pulmonaire de groupe 2. Cette méthode chirurgicale permet d'étudier l'artérialisation veineuse pulmonaire et les mécanismes physiopathologiques.

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Les auteurs reconnaissent le Mitacs-Japan Society pour le programme d’été de Promotion of Science (JSPS). Ping Yu Xiong a été financé par le programme d’été de Mitacs-JSPS pour visiter l’école de médecine de l’Université de Jikei. Dr. Minamisawa est soutenu en partie par le ministère de l’éducation, Culture, Sports, Science et technologie du Japon (S.M.), le programme de MEXT-Supported pour la Fondation de recherche stratégique au privé universités (S.M.), le véhicule de course commémorative Fondation (S.M.) et The Jikei University Graduate recherche fonds (S.F.) avec le soutien financier pour ce projet. Dr. Archer est soutenu en partie par l’US National Institutes of Health (NIH), NIH subventions 1R01HL113003-01 a 1 (ALS) et le NIH 2R01HL071115-08 (ALS), la Fondation canadienne pour l’Innovation, le niveau 1 Chaire de recherche du Canada en dynamique mitochondriale et translationnelle Médecine (ALS), la Fondation de William J. Henderson, le réseau vasculaire canadien et cardiopulmonaire unité de la Reine (QCPU).
Les auteurs remercient M. Tadashi Kokubo, chef du service photographique de l’InfoCentre académique à l’école de médecine de l’Université Jikei organisent, pour le tournage de la vidéo.

Le protocole expérimental de LAS a été approuvé par le Jikei University école de médecine animale Comité de protection et la recherche universitaire et le Comité d’éthique (protocole #2015-118).
1. la préparation préopératoire
<ol><li>Après son arrivée à l’animalerie, fournir des rats Sprague Dawley mâles de 5 semaines entre 150 à 200 g avec 1 semaine à s’acclimater à leur nouvelle maison avant l’opération.</li>
	<li>Préparer le matériel suivant avant la chirurgie à l’autoclave : 1) un petit masque animaux 2) une machine anesthésique, 3) un kit d’intubation (composé d’une paire de pince hémostatique, une spatule et un cathéter de 18 G), 4) surgical instruments (qui inclure une paire de pinces courbées, une paire de pinces droites, un pousseur d’aiguille, un rétracteur de poitrine, une paire de ciseaux, une suture de monofilament de 5-0, un applicateur de clip, clips XLarge et un drain thoracique de 23 G).</li>
	<li>Ont stérile Q-tips et gaze prêt à faire face à un saignement.</li>
	<li>Utiliser un coussin chauffant pour maintenir la température de l’animal au corps autour de 37 ° C pendant la chirurgie.</li>
</ol>2. anesthésie et Intubation endotrachéale
<ol><li>Anesthésier le rat dans une chambre à induction avec 5 % isoflurane mélangé avec l’air ambiant de 2 L/min.</li>
	<li>Avant l’intubation, raser les poils du torse de rat avec un rasoir cheveux et appliquez la crème dépilatoire pour enlever les poils fins.</li>
	<li>Vérifier le réflexe de pédale pour confirmer le succès anesthésie avant l’intubation.</li>
	<li>Accrocher les dents de devant avec une ficelle et serrer la corde avec deux broches.</li>
	<li>Ouvrir la bouche de rat avec la pince hémostatique et insérer la spatule dans la bouche.</li>
	<li>Soulevez l’abaisse-langue afin de visualiser les cordes vocales. Remarque : Il est utile de briller une lumière forte dans la région céphalique du rat pour aider à visualiser les cordes vocales.</li>
	<li>Insérer le cathéter de 18 G comme une sonde endotrachéale dans la trachée et puis, rapidement, raccorder le cathéter à l’appareil respiratoire.</li>
	<li>Réglez le volume de marée à 10 µL / g avec une fréquence respiratoire de 100 respirations/minute.</li>
	<li>Maintenir l’anesthésie à l’isoflurane 2 % mélangé avec l’air ambiant de 2 L/min.</li>
</ol>3. préparation du Site chirurgical
<ol><li>Préparer le site chirurgical avec une alternance de scrubs de chlorhexidine et d’alcool x3.</li>
	<li>Donner la buprénorphine 0,01 mg/kg par voie sous-cutanée.</li>
	<li>Couvrir le rat avec un drap stérile.</li>
	<li>Vérifier le réflexe de pédale pour confirmer une intubation réussie et l’entretien de l’anesthésie.</li>
</ol>4. chirurgie de la sténose auriculaire gauche
<ol><li>Marquer l’incision de 2 cm sous l’aisselle gauche de rat avec une règle.</li>
	<li>Faire un 2 cm incision paroi thoracique latérale à gauche avec une paire de ciseaux.</li>
	<li>Séparer les muscles intercostaux entre la quatrième et la cinquième côte, à l’aide de la ligne droite et la pince courbée, jusqu'à entrer dans la cavité thoracique.</li>
	<li>Insérez le rétracteur de poitrine dans la cavité thoracique. Continuer d’utiliser les pinces droites et courbes pour séparer le muscle intercostal pour obtenir une visualisation directe du thymus et du coeur.</li>
	<li>Soulevez le thymus avec une paire de pinces droites. Retirez le thymus couvrant le cœur avec une paire de ciseaux. Évitez de couper ou piquer dans les gros vaisseaux sanguins.</li>
	<li>Soigneusement passer une suture de monofilament de 5-0 par l’intermédiaire de la surface du ventricule gauche, juste en dessous de l’auricule gauche. Éviter de passer l’aiguille à travers les principales artères coronaires.</li>
	<li>Après que la suture est en place et il n’y a pas de saignement important, faire un noeud lâche.</li>
	<li>Tirer le fil de suture vers le haut et vers l’avant pour soulever le cœur sur la poitrine.</li>
	<li>Une fois que le cœur est levé sur la poitrine, d’appliquer rapidement un clip de moyennes et grandes de l’oreillette gauche, juste au-dessus de la valve mitrale. Remarque : Le clip est à moitié fermé, avec la pointe de la pince, pincer l’oreillette gauche, entraînant une sténose auriculaire gauche.</li>
	<li>Rapidement remettre le cœur dans la poitrine. S’assurer que le cœur n’est pas à l’extérieur de la poitrine pendant plus de 30 s.</li>
	<li>Retirer la suture de séjour permettant de soulever le cœur.</li>
	<li>Fermer le coffre avec une suture de monofilament de 5-0, à l’aide d’un simple motif interrompu.</li>
	<li>Insérer un drain thoracique de 23 G attaché à une seringue de 10 mL dans la poitrine et ensuite, procéder à la fermeture la poitrine mur muscle et la peau avec des sutures interrompus simples.</li>
	<li>Faire ressortir n’importe quel air, sang et épanchement pleural via le tube de coffre inséré, utilisant le joint 10 cc seringue, puis, tirez le tube.</li>
	<li>Fermer la couche de la peau avec une suture de monofilament de 5-0, à l’aide d’un simple motif interrompu.</li>
	<li>Donner la buprénorphine 0,01 mg/kg par voie sous-cutanée.</li>
	<li>Désactiver l’isoflurane.</li>
	<li>Débrancher le respirateur après que la respiration spontanée est observée.</li>
	<li>Garder le rat intubé et lui permettre de récupérer sur le coussin chauffant jusqu'à ce qu’il se réveille.</li>
	<li>En toute sécurité Extuber le rat après une ou plusieurs des signes suivants sont observés : le rat se met en mouvement ses quatre membres, il regagne son réflexe de redressement, il regagne son réflexe nauséeux ou il affiche miction spontanée.</li>
</ol>5. soins postopératoires
<ol><li>Tous les 8-12 h, donner la buprénorphine 0,01 mg/kg par voie sous-cutanée. Carprofène 5 mg/kg est donné par voie sous-cutanée quotidiennement pendant 2 jours et, ensuite, au besoin, si le rat ne se déplace pas autour des puits et ressemble à c’est dans la douleur.</li>
	<li>Donner 5 mL de sérum physiologique par voie sous-cutanée juste après la chirurgie, comme le rat peut avoir des difficultés à boire dans le robinet de l’eau, immédiatement post-opératoire.</li>
</ol>6. confirmation du succès de la sténose auriculaire gauche avec échocardiographie
<ol><li>Réaliser une échocardiographie transthoracique 2 semaines après la chirurgie afin de déterminer la vitesse du flux entrant LV.</li>
	<li>Anesthésier le rat en suivant les étapes décrites dans la section 1.</li>
	<li>Après l’induction de l’anesthésie, maintenir l’anesthésie à l’aide d’un cône de nez à l’isoflurane 2 % mélangé avec l’air ambiant de 2 L/min.</li>
	<li>Paroi thoracique du rat vous raser avec un rasoir cheveux et utiliser la crème dépilatoire pour enlever les poils restants.</li>
	<li>Placez la sonde d’échographie à l’apex du cœur, qui est d’environ le cinquième espace intercostal du côté gauche de la poitrine. Déplacer la sonde dans cette région jusqu'à l’obtention d’une bonne vue de quatre chambres.</li>
	<li>Mesurer la vitesse du flux entrant LV en utilisant le mode Doppler pulsé-onde juste au-dessus de l’anneau de la valve mitrale.</li>
	<li>Une vitesse d’entrée LV supérieure à 2,0 m/s est nécessaire pour le développement de l’hypertension pulmonaire modérée à la chirurgie de LAS après 8 à 10 semaines.</li>
</ol>7. une opération fictive
<ol><li>À l’exception d’appliquant le clip (étape 4,9), effectuent toutes les étapes ci-dessus pour créer des rats témoins appariés selon l’âge, opérés (SOC).</li>
</ol>

<ol><li>McGuire, L. B., Nolan, T. B., Reeve, R., Dammann Jr, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cor+Triatriatum+as+a+Problem+of+Adult+Heart+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Cor Triatriatum as a Problem of Adult Heart Disease.</a> Circulation. 31, 263-272 (1965).</li>
<li>Strange, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+hypertension%3A+prevalence+and+mortality+in+the+Armadale+echocardiography+cohort%5BTitle%5D)+AND+%22Heart%22%5BJournal%5D)">Pulmonary hypertension: prevalence and mortality in the Armadale echocardiography cohort.</a> Heart. 98 (24), 1805-1811 (2012).</li>
<li>Moreira, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+Pulmonary+Hypertension+in+the+General+Population%3A+The+Rotterdam+Study%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Prevalence of Pulmonary Hypertension in the General Population: The Rotterdam Study.</a> PLoS ONE. 10 (6), e0130072(2015).</li>
<li>Wijeratne, D. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increasing+Incidence+and+Prevalence+of+World+Health+Organization+Groups+1+to+4+Pulmonary+Hypertension%3A+A+Population-Based+Cohort+Study+in+Ontario%2C+Canada%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Cardiovascular+Quality+and+Outcomes%22%5BJournal%5D)">Increasing Incidence and Prevalence of World Health Organization Groups 1 to 4 Pulmonary Hypertension: A Population-Based Cohort Study in Ontario, Canada.</a> Circulation: Cardiovascular Quality and Outcomes. 11 (2), (2018).</li>
<li>Briongos Figuero, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predictors+of+persistent+pulmonary+hypertension+after+mitral+valve+replacement%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+and+Vessels%22%5BJournal%5D)">Predictors of persistent pulmonary hypertension after mitral valve replacement.</a> Heart and Vessels. 31 (7), 1091-1099 (2016).</li>
<li>Jiang, B. H., Tardif, J. C., Shi, Y., Dupuis, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bosentan+does+not+improve+pulmonary+hypertension+and+lung+remodeling+in+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22European+Respiratory+Society%22%5BJournal%5D)">Bosentan does not improve pulmonary hypertension and lung remodeling in heart failure.</a> European Respiratory Society. 37 (3), 578-586 (2011).</li>
<li>Dayeh, N. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiographic+validation+of+pulmonary+hypertension+due+to+heart+failure+with+reduced+ejection+fraction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Echocardiographic validation of pulmonary hypertension due to heart failure with reduced ejection fraction in mice.</a> Scientific Reports. 8, (2018).</li>
<li>Yin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sildenafil+preserves+lung+endothelial+function+and+prevents+pulmonary+vascular+remodeling+in+a+rat+model+of+diastolic+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Heart+Failure%22%5BJournal%5D)">Sildenafil preserves lung endothelial function and prevents pulmonary vascular remodeling in a rat model of diastolic heart failure.</a> Circulation: Heart Failure. 4 (2), 198-206 (2011).</li>
<li>Wang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Effects+and+Mechanism+of+Atorvastatin+on+Pulmonary+Hypertension+Due+to+Left+Heart+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">The Effects and Mechanism of Atorvastatin on Pulmonary Hypertension Due to Left Heart Disease.</a> PLoS ONE. 11 (7), e0157171-e0157171 (2016).</li>
<li>Hunt, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+veins+in+the+normal+lung+and+pulmonary+hypertension+due+to+left+heart+disease%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Lung+Cellular+and+Molecular+Physiology%22%5BJournal%5D)">Pulmonary veins in the normal lung and pulmonary hypertension due to left heart disease.</a> American Journal of Physiology - Lung Cellular and Molecular Physiology. 305 (10), L725-L736 (2013).</li>
<li>Fujimoto, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+hypertension+due+to+left+heart+disease+causes+intrapulmonary+venous+arterialization+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Pulmonary hypertension due to left heart disease causes intrapulmonary venous arterialization in rats.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 154 (5), 1742-1753 (2017).</li>
<li>Katz, M. G., Fargnoli, A. S., Hajjar, R. J., Hadri, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+hypertension+arising+from+left+heart+disease+causes+intrapulmonary+venous+arterialization+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Pulmonary hypertension arising from left heart disease causes intrapulmonary venous arterialization in rats.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 155 (1), 281-282 (2018).</li>
<li>Alsoufi, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Not+a+Cinderella+story%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Not a Cinderella story.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 155 (1), 282-284 (2018).</li>
<li>Kato, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+vein+stenosis+and+the+pathophysiology+of+%26%2334%3Bupstream%26%2334%3B+pulmonary+veins%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Pulmonary vein stenosis and the pathophysiology of &#34;upstream&#34; pulmonary veins.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 148 (1), 245-253 (2014).</li>
</ol>

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Le rat de LAS est un modèle de PH groupe roman 2 qui a déjà reçu un intérêt important de chercheurs dans le domaine12,13. Comparaison de deux modèles de groupe 2 existants, à savoir la veine pulmonaire sténose (PVS) modèle14, à l’aide de porcelets et le supracoronary aortique baguage (SAB) rat modèle8,9,10, le modèle de rat de LAS dispose de plusi...

Le but de cet article est de démontrer la procédure étape par étape comment effectuer la chirurgie de LAS chez les rats. Chirurgicalement induite par LAS imite étroitement MS et cor triatriatum chez l’homme, qui impliquent la création d’une obstruction mécanique dans l' oreillette gauche1. Obstruction de l’ouverture du (LV) ventriculaire gauche souvent provoque une congestion de la circulation veineuse pulmonaire, et les patients développent progressivement le PH. L’Organisation mondiale de la santé classe PH dus à des maladies de coeur gauche comme groupe 2, qui est le plus répandu groupe de PH2,3,4. Le diagnostic de PH chez les patients atteints de maladies de coeur gauche est associé à un plus grand qu’une augmentation de la mortalité 1 an4septuple. Actuellement, il n’y a aucun traitement approuvé pour le groupe 2 PH en dehors de traitement sous-jacent a laissé des maladies cardiaques (par exemple, remplacer chirurgicalement la valve mitrale sténotique). Cependant, même apparente de la valve mitrale remplacement ne résout pas le PH entièrement dans la moitié des patients avec MS5. Ce PH persistant est en raison d’effets indésirables pulmonaires remodelage vasculaire, ce qui est mal comprise. Par conséquent, des modèles animaux sont importants pour améliorer notre compréhension des mécanismes moléculaires sous-jacents du remodelage vasculaire pulmonaire indésirables dans le groupe 2 PH.
Il y a quelques modèles animaux du groupe 2 pH. artère coronaire ligature6,7 et transverse aortique baguage8,9,10 chez les rongeurs sont le plus couramment utilisé des modèles animaux de groupe 2 PH. L’inconvénient majeur de ces modèles est l’implication de LV, ce qui en fait le résultat d’études PH groupe 2 difficile à interpréter. En revanche, le LV reste intacte dans le modèle de LAS. En outre, le modèle de LAS est cliniquement pertinent car elle se traduit par l’élaboration lente et progressive du PH au cours d’une période de 10 semaines11. Chez l’homme, MS est considéré comme significative si la transmitral vitesse Doppler est supérieure à 2,0 m/s11, et nous utilisons également ce nombre comme un seuil pour déterminer si la chirurgie de LAS a eu une sténose significative. En outre, bien que le modèle de LAS génère PH légère ou modérée, il montre les changements histologiques caractéristiques, semblables à celles des patients humains, à savoir le développement d’arterialization veineux intrapulmonaire11. Le modèle de rat de LAS est un roman et le modèle PH cliniquement pertinentes groupe 2 avec fonction de LV préservé. Il est adapté pour l’étude de la physiopathologie du remodelage vasculaire pulmonaire persistante, d’identifier des cibles moléculaires et les essais de nouveaux traitements pour le groupe 2 PH.

<table><tbody><tr><td>5-0 Suture Prolene</td><td>Johnson & Johnson - Suture</td> en <td>polypropylène</td><td>Ethicon 8725H</td> avec</tr><tr><td>appareil d’anesthésie</td> avec technologie HEMO-SEAL <td>Wakenyaku Co., Ltd.</td><td>BRTK-100A</td><td>Pompe à air et appareil d’anesthésie</td></tr><tr><td>Angiocathéter Fil-guide</td> de 10 cm <td>fait maison</td><td></td><td>collé à une seringue de 1 cc&nbsp ;</td></tr><tr><td>Écarteur de poitrine</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>F-2</td><td></td></tr><tr><td>Tube thoracique 23G</td><td>Seringue de</td><td>10 cc faite maison attachée à une aiguille 23G plus tube en plastique</td>Pince incurvée Natsume Seisakusho Co., Ltd.<td></td></tr><tr><td></td><td></td><td>A-14</td><td></td></tr><tr><td>Coussin chauffant</td><td>Vivaria</td><td>MP-916-NV</td><td>Maintenir la température corporelle à 37 degrés</td></tr><tr><td>Celsius Horizon Clips de ligature</td><td>Teleflex REF</td><td>003200</td><td>Taille Medium-Large</td></tr><tr><td>Horizon Chargeur de pince de ligature à charge manuelle pour Horizon</td><td>Teleflex</td><td>REF 337085</td> de taille moyenne à grande <td>Pinces de ligature Mâchoire inclinée, (20cm)</td></tr><tr><td>Porte-aiguille</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>MC-40</td><td></td></tr><tr><td>Respirateur pour rongeurs</td><td>CWE Inc</td><td>SAR-830/P</td><td>Ventilateur pour petits animaux</td></tr><tr><td>Ciseaux</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>B-12</td><td>Ciseaux droits idéalement à pointes rondes</td></tr><tr><td>Pince droite</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>A-7</td><td></td></tr><tr><td>Abaisse-langue</td><td>Uchida Yoko Co., Ltd.</td><td>8-615-2417</td><td>Utilisez l’extrémité large</td></tr></tbody></table>

la sténose auriculaire gauche induit arterialization veineuse pulmonaire et l’hypertension pulmonaire chez le rat groupe 2

Left Atrial Stenosis Induced Pulmonary Venous Arterialization and Group 2 Pulmonary Hypertension in Rat

On ne sait pas le mécanisme de l’arterialization veineuse pulmonaire induite par la sténose mitrale et l’hypertension pulmonaire groupe 2 (PH). Il n’y a aucun modèle de rongeur du groupe 2 PH, due à la sténose mitrale (MS), faciliter les recherches des mécanismes des maladies et des stratégies thérapeutiques possibles. Nous présentons un modèle de rat roman pulmonaire veineuse induite par la congestion pulmonaire arterialization veineuse et groupe 2 PH causée par une sténose auriculaire gauche (LAS). LAS est obtenue en resserrant l’oreillette gauche à l’aide d’un clip titane mi-clos. Après la chirurgie de LAS, un rat modèle avec une vitesse de flux transmitral supérieure ou égal à 2,0 m/s sur l’échocardiographie développe progressivement arterialization veineuse pulmonaire et le groupe 2 PH sur une période de 8 à 10 semaines. Dans ce protocole, nous fournissons la procédure étape par étape comment effectuer la chirurgie LAS. Le modèle de rat de LAS présenté imite MS chez l’homme et est utile pour étudier le mécanisme moléculaire sous-jacent d’arterialization veineuse pulmonaire et pour l’évaluation préclinique des thérapies pour le groupe 2 PH.

L’efficacité du LAS est confirmée à l’aide d’échocardiographie, 2 semaines postopératoires. Sont considérés comme des rats avec une vitesse de flux entrant LV supérieure à 2,0 m/s, mesurés avec une vue de quatre chambres, ont développé une sténose significative (Figure 1) et de développer avec fiabilité un PH modéré et la chirurgie arterialization veineuse pulmonaire de LAS après 8 à 10 semaines.
Ch...

La sténose auriculaire gauche (LAS) est une nouvelle technique chirurgicale utilisée pour étudier l’hypertension pulmonaire groupe 2 (PH) et les mécanismes qui sous-tendent l’arterialization veineuse pulmonaire. Nous présentons ici un protocole pour se contracter l’oreillette gauche à l’aide d’un clip titane provoque une arterialization veineuse pulmonaire et modérer le PH dans un rat.

La sténose auriculaire gauche induit Arterialization veineuse pulmonaire et l’Hypertension pulmonaire chez le Rat groupe 2

The mechanism of mitral stenosis-induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension (PH) is unclear. There is no rodent model of ...

Merci d’avoir regardé nos vidéos. Je suis Susumu Minamisawa de la Jikei University School of Medicine Tokyo, Japon. Notre occasion sur l’hypertension pulmonaire animale due à la maladie cardiaque de rat qui est classée comme hypertension pulmonaire de groupe deux.L’Organisation mondiale de la Santé classe l’hypertension pulmonaire en cinq groupes. Le rat atrial gauche de sténose est un groupe modèle animal deux hypertension pulmonaire qui est la forme la plus répandue de l’hypertension pulmonaire et actuellement il n’y a aucune thérapie approuvée pour ce groupe d’hypertension pulmonaire. Dans ces vidéos, nous manifestons la procédure étape par étape de la façon d’effectuer la chirurgie de sténose auriculaire gauche chez le rat.La sténose atriale droite chirurgicalement créée imite la sténose mitrale chez l’homme. Lorsque nous l’utilisons pour étudier la possibilité et sous le groupe deux hypertension pulmonaire. Commençons.Préparez l’équipement suivant avant la chirurgie, un respirateur pour petits animaux et une machine anesthésique. Un kit d’incubation se compose d’une paire de forceps d’hémostat, d’un dépresseur de langue et d’un angio-cathéter de calibre 18. Les instruments chirurgicaux comprennent une paire de forceps incurvés, une paire de forceps droits, un conducteur d’aiguille, un rétracteur de poitrine, une paire de ciseaux, une suture monofilament 5-0, un applicateur clip, un clip de taille moyenne et un tube thoracique de calibre 23.Anesthésier le rat dans une chambre d’induction avec cinq pour cent d’isoflurane mélangé avec deux mètres par minute d’air de pièce. Avant l’intubation raser les poils de la poitrine. Appliquer la crème d’épilation pour enlever les cheveux fins non enlevés par le rasoir.Accrochez les dents avant avec une ficelle et fixez les cordes aux broches. Après que la corde est fixée ouvrir la bouche avec les forceps d’hémostat et insérer le dépresseur de langue dans la bouche. Soulevez le dépresseur de langue pour visualiser l’accord vocal.Insérez l’angio-cathéter de calibre 18 comme tube endotrachéal dans la trachée, puis connectez rapidement le cathéter au respirateur. Réglez le volume de marée à 10 microlitres par gramme avec un taux respiratoire de 100 respirations par minute. Maintenir l’anesthésie avec deux pour cent d’isoflurane mélangé avec deux mètres par minute d’air de pièce.Stériliser le site chirurgical avec des gommages alternatifs de chlorhexidine et d’alcool. Donnez buprénorphine 01 milligramme par kilogramme sous-cutanée. Couvrir le rat d’un drapé stérile.Vérifiez le réflexe de pédale pour confirmer l’anesthésie réussie avant la chirurgie. Marquer le site d’incision de deux centimètres sous l’aisselle. Faire une incision latérale de deux centimètres de la paroi thoracique latérale avec une paire de ciseaux.Séparez soigneusement le muscle intercostal entre la quatrième et la cinquième côte à l’aide d’un forceps droit et incurvé jusqu’à ce qu’il pénètre dans la cavité thoracique. Insérez le rétracteur thoracique dans la cavité thoracique. Utilisez un peu de force pour ouvrir le rétracteur de la poitrine pour séparer la quatrième et la cinquième côte d’environ un centimètre.Soulevez le thymus avec une paire de forceps droits. Retirer délicatement le thymus qui recouvre le cœur d’une paire de ciseaux. Passez soigneusement une suture de monofilament 5-0 à travers la surface du ventricule gauche juste en dessous de l’appendice auriculaire gauche.Il faut prendre soin d’éviter de passer l’aiguille à travers les artères coronaires majeures. Après la suture est en place et il n’y a pas de saignement significatif attacher un noeud lâche. Tirez le fil de suture vers le haut et vers l’avant pour soulever le cœur hors de la poitrine.Une fois que le cœur est soulevé à l’extérieur de la poitrine, appliquez rapidement un gros clip moyen sur l’atrium gauche juste au-dessus de la valve mitrale. Retirez soigneusement la suture de séjour utilisée pour soulever le cœur. Commencez à fermer la poitrine avec une suture monofilament 5-0 en utilisant simple motif interrompu.Insérez un tube thoracique de calibre 23 attaché à une seringue 10cc dans la cavité thoracique. Et puis procéder à la fermeture de la poitrine. Dessinez toute effusion d’air, de sang et de plèvre près du tube thoracique inséré à l’aide de la seringue 10cc attachée.Et puis tirez le tube quand rien ne sort. Fermez la zone de la peau avec la suture monofilament 5-0 en utilisant le modèle interrompu simple. Retirer le drapé chirurgical.Donnez buprénorphine 01 milligramme par kilogramme sous-cutanée. Éteignez l’isoflurane. Excaver le rat quand il commence à se réveiller.Deux semaines après op emploiez la cardiographie d’écho pour confirmer le succès de la chirurgie atriale gauche de sténose. L’efficacité de la sténose auriculaire gauche est confirmée utilisant la cardiographie d’écho deux semaines après op. Les rats dont la vitesse d’entrée du ventricule gauche est supérieure à deux mètres par seconde mesurée sur quatre vue de chambre sont considérés comme ayant développé une sténose significative.10 semaines après chirurgie atriale gauche de sténose les rats dans le groupe de LAS montrent l’agrandissement atrial gauche, la congestion pulmonaire, la surcharge droite de pression de ventricule et le flux veineux pulmonaire accru comparé aux rats dans le groupe actionné de feinte. En outre, il y a augmentation significative de la pression systolique ventriculaire droite dans le groupe gauche de sténose atriale par rapport au groupe actionné de feinte. Cependant, la pression systolique gauche de ventricule reste la même dans les deux groupes.L’examen histologique de la longue section transversale tachée avec le Van Gieson élastique montre la maladie moyenne artérielle pulmonaire et pulmonaire accrue. Une dimension veineuse pulmonaire accrue le groupe gauche de sténose auriculaire par rapport au groupe actionné de feinte était plus d’un muscle lisse agissant dans la coloration montre le nombre accru de cellules lisses de muscle dans l’artère pulmonaire et la veine pulmonaire du groupe gauche de sténose atriale contre le groupe témoin. J’espère que vous avez aimé regarder cette vidéo.Bien que la chirurgie soit relativement simple soin devrait être prise en appliquant la suture au ventricule gauche pour éviter de frapper les artères coronaires principales. En soulevant le cœur tirer la suture vers le haut vers la tête du rat de sorte que l’atrium gauche de sa structure de fonctionnement peut être clairement visualisé. En appliquant le clip à l’atrium gauche, l’étanchéité du clip devrait être suffisante pour causer une sténose auriculaire gauche significative, mais pas trop serrée pour induire un œdème pulmonaire aigu et une insuffisance cardiaque droite.Merci d’avoir regardé cette vidéo. Et bonne chance avec votre expérience.

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L’hypertension pulmonaire thromboembolique chronique (HPTEC) et le dysfonctionnement ventriculaire droit (VD) ont été induits chez les porcelets par l’obstruction progressive des artères pulmonaires. Les conséquences étaient remarquablement similaires à celles observées chez les patients atteints d’HPTEC. Ce modèle animal serait un outil très utile pour la physiopathologie et les expériences thérapeutiques sur l’HPTEC et l’échec du rotavirus.

Chronique thromboembolique l&#39;hypertension artérielle pulmonaire et de l&#39;évaluation de la fonction ventriculaire droite dans la Porcinet

L’hypertension artérielle pulmonaire (HTAP) est une maladie des artérioles pulmonaires qui conduit à leur oblitération et au développement d’une insuffisance ventriculaire droite. Les modèles de rongeurs de l’HTAP sont essentiels pour comprendre la physiopathologie de l’HTAP. Ici, nous démontrons la caractérisation hémodynamique, avec cathétérisme cardiaque droit et échocardiographie, chez la souris et le rat.

Hémodynamique Caractérisation des modèles rongeurs de l&#39;hypertension artérielle pulmonaire

Ce protocole décrit une procédure chirurgicale visant à créer un modèle d’hypertension artérielle pulmonaire (HTAP) induite par le flux chez le rat et les procédures permettant d’analyser les principaux paramètres hémodynamiques et histologiques dans ce modèle.

Chirurgie Shunt, droite Cathétérisme cardiaque et vasculaire Morphometry dans un modèle de rat pour Flow-induite Hypertension artérielle pulmonaire

Nous présentons une méthode chirurgicale pour provoquer l’hypertrophie ventriculaire droite et l’échec chez les rats.

Tronc pulmonaire des bandes modèle d’une surcharge de pression induit échec et hypertrophie ventriculaire droite

La pneumonectomie gauche rongeur est une technique utile dans la recherche d’une hypertension artérielle pulmonaire. Nous présentons ici un protocole visant à décrire la procédure de pneumonectomie rat et les soins post-opératoires afin d’assurer la mortalité et la morbidité minime.

La pneumonectomie gauche combiné avec Monocrotaline ou Sugen comme un modèle d’Hypertension pulmonaire chez le rat

Ici, nous fournissons une approche utile pour étudier le mécanisme de l'échec ventriculaire droit. Une approche plus pratique et plus efficace de la constriction d'artère pulmonaire est établie utilisant des instruments chirurgicaux faits en interne. En outre, des méthodes pour évaluer la qualité de cette approche par l'échocardiographie et le cathétérisation sont fournies.

Induction de l'échec ventriculaire droit par constriction pulmonaire d'artère et évaluation de la fonction ventriculaire droite chez les souris

Nous décrivons la création d’un modèle de rat de surcharge de pression induite transformant modéré et le dysfonctionnement systolique tôt où les voies de transduction de signal impliquées dans le déclenchement du processus de remodelage sont activées. Ce modèle animal aidera à identifier les cibles moléculaires pour l’application précoce des stratégies thérapeutiques anti-remodelage pour l’insuffisance cardiaque.

Un modèle de rat de surcharge de pression induit modéré remodelage et dysfonction systolique par opposition à l’insuffisance cardiaque systolique manifeste

Le présent protocole décrit une intervention chirurgicale visant à enlever les bandes aortiques ascendantes dans un modèle d’hypertension pulmonaire chez le rat due à une maladie cardiaque gauche. Cette technique étudie les mécanismes endogènes de remodelage inverse dans la circulation pulmonaire et le cœur droit, éclairant ainsi les stratégies pour inverser l’hypertension pulmonaire et / ou le dysfonctionnement ventriculaire droit.

Un modèle de remodelage vasculaire inverse dans l’hypertension pulmonaire due à une maladie cardiaque gauche par dégroupage aortique chez le rat

Le présent protocole décrit la caractérisation échocardiographique de la morphologie et de la fonction ventriculaires droites dans un modèle d’hypertension artérielle pulmonaire chez le rat.

Évaluation échocardiographique complète de la fonction du ventricule droit dans un modèle d’hypertension artérielle pulmonaire chez le rat

L’insuffisance cardiaque droite (RHF) se caractérise par une dilatation et une hypertrophie cardiaques du côté droit, entraînant un dysfonctionnement ventriculaire et auriculaire. Les affections cardiopulmonaires associées à la FRH s’accompagnent d’un risque accru d’arythmies cardiaques. Cet article décrit un modèle standardisé de RHF induite par le cerclage de l’artère pulmonaire associé à une arythmogenèse ventriculaire et auriculaire améliorée.

Modèle de rat de remodelage cardiaque du côté droit et d’arythmie à l’aide d’un cerclage de l’artère pulmonaire

Ici, la méthode d’induction de l’hypertension artérielle pulmonaire associée à la fibrose pulmonaire (PF-PH) modèle de rat par injection de bléomycine dans les voies respiratoires est introduite. Nous proposons également une approche étape par étape pour valider ce modèle animal.

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Découvrez la technique de sténose auriculaire gauche chez le rat pour modéliser l'hypertension pulmonaire de groupe 2. Cette méthode chirurgicale permet d'étudier l'artérialisation veineuse pulmonaire et les mécanismes physiopathologiques.

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