Name: Un modèle murine de la dengue virus induite par lencéphalite virale aigue comme la maladie (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-04-28T14:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 23 s
Description: Découvrez un modèle murin immunocompétent ICR pour étudier la neuropathogenèse induite par le virus de la dengue. Cette méthode permet de suivre l'évolution de l'encéphalite virale aiguë et d'évaluer les facteurs viraux et hôtes impliqués dans la maladie neurologique.

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Cette étude a été soutenue par des subventions du Ministère des sciences et de la technologie (MOST107-2321-B-038-001) et du financement intra-muros 106TMU-CIT-01-2, Taipei, Taiwan.

Les protocoles expérimentaux d'étude animale ont été approuvés par le Comité institutionnel de soins aux animaux et d'utilisation du National Defense Medical Center (numéro 16-261 de l'IACUC), selon les lignes directrices établies par le Ministère des sciences et de la technologie de Taïwan.
1. Procédure d'infection
<ol><li>Préparer les stocks non adaptés de DENV2 (souche PL046)9 (obtenus à l'origine auprès des Centers for Disease Control de Taiwan, allant de 2,5 x 107 à 1 x 109 PFU/mL).</li>
	<li>Diluer le stock de virus à 1 x 106 PFU avec Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 moyen à un volume total de 40 L.</li>
	<li>Remplissez une seringue de 0,3 ml ml munie d'une aiguille de 30 G avec 10 l (2,5 x 105 PFU) de virus dilué et remplissez une autre seringue de 0,3 ml ml munie d'une aiguille de 30 G avec 30 l (7,5 x 105 PFU) de virus dilué.</li>
	<li>
Tenez la souris de titrage ICR de 7 jours et effectuez les étapes suivantes.
	<ol>
<li>Pour l'injection intracérébrale, maintenez la souris dans une position encline en appuyant sur l'auriculaire entre l'index et le pouce, et injectez intracérébralement 10 l de virus dilué dans la zone lambda, le point à l'intersection de la suture sagittale et lambdoid 16.</li>
		<li>Après l'injection intracérébrale, maintenez la souris en position de supine en utilisant l'index et le pouce et injectez par voie intrapéritone 30 l de virus dilué doucement dans l'abdomen murine. REMARQUE : Pour éviter le cannibalisme, 75 % de l'alcool est utilisé pour créer une perte temporaire de la sensation olfactive de la mère. En outre, il est suggéré de recouvrir les portées avec les selles et l'urine de leur mère.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Posez les souris allaitantes dans leurs cages et attendez 5 min pour vérifier leur poststimulation de sécurité avec l'avidité des souris, y compris la marche et la succion du lait maternel. REMARQUE: Le plus souvent, les souris démontrent une poststimulation d'activité normale et il ne semble pas y avoir d'effets nocifs après le défi technique. Au cours de cette expérience, les animaux ont été maintenus par le Comité institutionnel de soins aux animaux et d'utilisateurs du National Defense Medical Center, Taiwan.</li>
	<li>Évaluer les progrès quotidiens des souris en termes de poids corporel (en utilisant un bilan microgramme), d'encéphalite virale aigue (par la notation de la maladie telle que décrite dans la section 2), et le taux de survie9,10,11 ,12,13,14,15.</li>
</ol>2. Notation de la maladie
<ol><li>Surveillez le grade des maladies virales aigues semblables à l'encéphalite. Attribuez un score de 0 à des souris en bonne santé; 1 pour les souris présentant des symptômes de maladie mineure, y compris la perte de poids, la mobilité réduite, et une orientation de corps de bossu ; 2 aux souris qui présentent une crise limbique; 3 aux souris la faiblesse limbique d'exposition, y compris se déplaçant avec la difficulté et la faiblesse antérieure de membre ou postérieure ; 4 pour paralysie; 5 pour la mort. REMARQUE: Une fois que le score atteint 3, les symptômes de la maladie sont considérés comme évoluant rapidement.</li>
	<li>Tracer la notation de la maladie, selon l'étape 2.1, pour chaque jour comme une figure basée sur la courbe en utilisant la moyenne - SD des scores de test quotidiens dans chaque groupe.</li>
</ol>

<ol><li>Guzman, M. G., Gubler, D. J., Izquierdo, A., Martinez, E., Halstead, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dengue+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Disease+Primers%22%5BJournal%5D)">Dengue infection.</a> Nature Reviews Disease Primers. 2, 16055(2016).</li>
<li>Katzelnick, L. C., Coloma, J., Harris, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dengue%3A+knowledge+gaps%2C+unmet+needs%2C+and+research+priorities%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Infectious+Diseases%22%5BJournal%5D)">Dengue: knowledge gaps, unmet needs, and research priorities.</a> Lancet Infectious Diseases. 17 (3), e88-e100 (2017).</li>
<li>Carod-Artal, F. J., Wichmann, O., Farrar, J., Gascon, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurological+complications+of+dengue+virus+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Neurology%22%5BJournal%5D)">Neurological complications of dengue virus infection.</a> Lancet Neurology. 12 (9), 906-919 (2013).</li>
<li>Geneva: World Health Organization. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Dengue%3A+Guidelines+for+Diagnosis%2C+Treatment%2C+Prevention+and+Control%3A+New+Edition%22">Dengue: Guidelines for Diagnosis, Treatment, Prevention and Control: New Edition</a>. , WHO Guidelines Approved by the Guidelines Review Committee (2009).</li>
<li>Amaral, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracerebral+infection+with+dengue-3+virus+induces+meningoencephalitis+and+behavioral+changes+that+precede+lethality+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroinflammation%22%5BJournal%5D)">Intracerebral infection with dengue-3 virus induces meningoencephalitis and behavioral changes that precede lethality in mice.</a> Journal of Neuroinflammation. 8, 23(2011).</li>
<li>de Miranda, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dengue-3+encephalitis+promotes+anxiety-like+behavior+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Dengue-3 encephalitis promotes anxiety-like behavior in mice.</a> Behavioural Brain Research. 230 (1), 237-242 (2012).</li>
<li>Velandia-Romero, M. L., Acosta-Losada, O., Castellanos, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+infection+by+a+neuroinvasive+neurovirulent+dengue+virus%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurovirology%22%5BJournal%5D)">In vivo infection by a neuroinvasive neurovirulent dengue virus.</a> Journal of Neurovirology. 18 (5), 374-387 (2012).</li>
<li>Despres, P., Frenkiel, M. P., Ceccaldi, P. E., Duarte Dos Santos, C., Deubel, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Apoptosis+in+the+mouse+central+nervous+system+in+response+to+infection+with+mouse-neurovirulent+dengue+viruses%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Virology%22%5BJournal%5D)">Apoptosis in the mouse central nervous system in response to infection with mouse-neurovirulent dengue viruses.</a> Journal of Virology. 72 (1), 823-829 (1998).</li>
<li>Tsai, T. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglia+retard+dengue+virus-induced+acute+viral+encephalitis%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Microglia retard dengue virus-induced acute viral encephalitis.</a> Scientific Reports. 6, 27670(2016).</li>
<li>Cheng, Y. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activation+of+Nrf2+by+the+dengue+virus+causes+an+increase+in+CLEC5A%2C+which+enhances+TNF-alpha+production+by+mononuclear+phagocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Activation of Nrf2 by the dengue virus causes an increase in CLEC5A, which enhances TNF-alpha production by mononuclear phagocytes.</a> Scientific Reports. 6, 32000(2016).</li>
<li>Ho, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blockade+of+dengue+virus+infection+and+viral+cytotoxicity+in+neuronal+cells+in+vitro+and+in+vivo+by+targeting+endocytic+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Blockade of dengue virus infection and viral cytotoxicity in neuronal cells in vitro and in vivo by targeting endocytic pathways.</a> Scientific Reports. 7 (1), 6910(2017).</li>
<li>Jhan, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-TNF-alpha+restricts+dengue+virus-induced+neuropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Leukocyte+Biology%22%5BJournal%5D)">Anti-TNF-alpha restricts dengue virus-induced neuropathy.</a> Journal of Leukocyte Biology. 104 (5), 961-968 (2018).</li>
<li>Kao, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+antiparasitic+drug+niclosamide+inhibits+dengue+virus+infection+by+interfering+with+endosomal+acidification+independent+of+mTOR%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Neglected+Tropical+Diseases%22%5BJournal%5D)">The antiparasitic drug niclosamide inhibits dengue virus infection by interfering with endosomal acidification independent of mTOR.</a> PLoS Neglected Tropical Diseases. 12 (8), e0006715(2018).</li>
<li>Tsai, T. T., Chen, C. L., Tsai, C. C., Lin, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+heat+shock+factor+1+as+an+antiviral+strategy+against+dengue+virus+replication+in+vitro+and+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Antiviral+Research%22%5BJournal%5D)">Targeting heat shock factor 1 as an antiviral strategy against dengue virus replication in vitro and in vivo.</a> Antiviral Research. 145, 44-53 (2017).</li>
<li>Jhan, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dengue+virus+infection+increases+microglial+cell+migration%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Dengue virus infection increases microglial cell migration.</a> Scientific Reports. 7 (1), 91(2017).</li>
<li>Benskey, M. J., Manfredsson, F. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraparenchymal+Stereotaxic+Delivery+of+rAAV+and+Special+Considerations+in+Vector+Handling%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Intraparenchymal Stereotaxic Delivery of rAAV and Special Considerations in Vector Handling.</a> Methods in Molecular Biology. , 199-215 (2016).</li>
<li>Fong, C. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mild+encephalitis%2Fencephalopathy+with+reversible+splenial+lesion+%28MERS%29+due+to+dengue+virus%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Mild encephalitis/encephalopathy with reversible splenial lesion (MERS) due to dengue virus.</a> Journal of Clinical Neuroscience. 36, 73-75 (2017).</li>
<li>Sarathy, V. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+lethal+murine+infection+model+for+dengue+virus+3+in+AG129+mice+deficient+in+type+I+and+II+interferon+receptors+leads+to+systemic+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Virology%22%5BJournal%5D)">A lethal murine infection model for dengue virus 3 in AG129 mice deficient in type I and II interferon receptors leads to systemic disease.</a> Journal of Virology. 89 (2), 1254-1266 (2015).</li>
<li>Schul, W., Liu, W., Xu, H. Y., Flamand, M., Vasudevan, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+dengue+fever+viremia+model+in+mice+shows+reduction+in+viral+replication+and+suppression+of+the+inflammatory+response+after+treatment+with+antiviral+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Infectious+Diseases%22%5BJournal%5D)">A dengue fever viremia model in mice shows reduction in viral replication and suppression of the inflammatory response after treatment with antiviral drugs.</a> The Journal of Infectious Diseases. 195 (5), 665-674 (2007).</li>
<li>Tyler, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+Viral+Encephalitis%5BTitle%5D)+AND+%22New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Acute Viral Encephalitis.</a> New England Journal of Medicine. 379 (6), 557-566 (2018).</li>
<li>Yauch, L. E., Shresta, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+of+dengue+virus+infection+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Antiviral+Research%22%5BJournal%5D)">Mouse models of dengue virus infection and disease.</a> Antiviral Research. 80 (2), 87-93 (2008).</li>
<li>Assir, M. Z., Jawa, A., Ahmed, H. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expanded+dengue+syndrome%3A+subacute+thyroiditis+and+intracerebral+hemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Infectious+Diseases%22%5BJournal%5D)">Expanded dengue syndrome: subacute thyroiditis and intracerebral hemorrhage.</a> BMC Infectious Diseases. 12, 240(2012).</li>
<li>Kumar, R., Prakash, O., Sharma, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracranial+hemorrhage+in+dengue+fever%3A+management+and+outcome%3A+a+series+of+5+cases+and+review+of+literature%5BTitle%5D)+AND+%22Surgical+Neurology%22%5BJournal%5D)">Intracranial hemorrhage in dengue fever: management and outcome: a series of 5 cases and review of literature.</a> Surgical Neurology. 72 (4), 429-433 (2009).</li>
<li>Simanjuntak, Y., Liang, J. J., Lee, Y. L., Lin, Y. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repurposing+of+prochlorperazine+for+use+against+dengue+virus+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Infectious+Diseases%22%5BJournal%5D)">Repurposing of prochlorperazine for use against dengue virus infection.</a> Journal of Infectious Diseases. 211 (3), 394-404 (2015).</li>
<li>Rocha, B. A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dengue-specific+serotype+related+to+clinical+severity+during+the+2012%2F2013+epidemic+in+centre+of+Brazil%5BTitle%5D)+AND+%22Infectious+Disease+Poverty%22%5BJournal%5D)">Dengue-specific serotype related to clinical severity during the 2012/2013 epidemic in centre of Brazil.</a> Infectious Disease Poverty. 6 (1), 116(2017).</li>
</ol>

Les auteurs n'ont rien à révéler.

L'infection de DENV a été détectée dansle CNS des patients graves de dengue 3,17,suggérant la possibilité de la manifestation de l'encéphalite virale aigue s'est produite pendant la pathogénie de dengue. Ici, nous rapportons un modèle murine in vivo de l'infection de DENV pour étudier la participation du dysfonctionnement de CNS dans la dengue grave, particulièrement avec un foyer sur DENV-induite maladies virales-comme. Par rapport aux modèles précédents, en par...

DENV, un virus transmis par les arthropodes de la famille des Flaviviridae, contient un génome d'ARN à sens positif qui code trois protéines structurelles virales (capsid, prémembrane et enveloppe) et sept protéines virales non structurelles (NS1, NS2A, NS2B, NS3, NS4A, NS4B , et NS5). Les quatre sérotypes de DENV (DENV1-4), qui infectent environ 390 millions de personnes par an, causent un fardeau mondial, même si les gouvernements ont orienté des efforts substantiels vers les moustiques vecteurs et la lutte contre les maladies1. À l'heure actuelle, des vaccins protecteurs et des médicaments antiviraux thérapeutiques sont en cours de développement et nécessitent une validation à long terme2. En pratique clinique, bien qu'un patient de dengue avec l'infection de CNSsoit rare, il doit être davantage exploré pour comprendre la diversité du développement de la dengue 3. Une enquête et une validation plus poussées sont nécessaires; notamment, l'Organisation mondiale de la Santé (OMS) a inclus la participation de l'affaiblissement du SNC, tels que les troubles cognitifs, les convulsions, l'encéphalopathie et l'encéphalite, dans la classification de la dengue sévère3,4. La construction de modèles animaux d'infection par le DENV est indispensable pour explorer la neuropathogenèse de l'infection à DENV.
Pour générer l'infection par DENV de CNS, plusieurs études ont exécuté différents itinéraires de l'infection de DENV, y compris (1) l'inoculation intracérébrale des souris de C57BL/6 qui ont reçu 4 x 103 unités de plaque-formation (PFU) de DENV3nonadapté, 6, (2) inoculation intrapéritonéale des souris BALB/c qui ont reçu 7 x 104 PFU de DENV4 neuroadapté in vitro7, (3) inoculation intracérébrale de souris suisses qui ont reçu 1 x 105 PFU de vivo neuroadapté DENV18, et (4) co-inoculation intracérébrale et intrapéritonéale des souris allaitantes iCR qui ont reçu 1 x 106 PFU de DENV2 non adapté9. Selon les résultats de ces études5,6,7,8,9, infection DENV chez les souris entraîner une réplication virale dans le cerveau, conduisant à des Syndromes d'encéphalite-comme, changements comportementaux accompagnés de la paralysie de membre et de l'instabilité posturale, neurotoxicité et inflammation de CNS, fuite générale et localisée de plasma par la barrière hémato-encéphalique (BBB), et létalité. Tous les résultats de ces études5,6,7,8,9 ont montré la capacité du DENV à infecter le SNC et l'induction d'une encéphalite virale aigue maladie à la suite d'une infection.
Sur la base de nos résultats actuels9,10,11,12,13,14,15, nous avons créé un modèle murine de l'infection DENV comme un in vivo plate-forme pour examiner l'efficacité thérapeutique des agents/facteurs ciblés contre la réplication virale, aussi bien que la neurotoxicité. Ici, nous rapportons le protocole utilisé pour créer une souris iCR hors-sang immunocompétente pour étudier l'infection de CNS et pour surveiller le développement des neuropathies avec différentes severities provoquées par DENV. Les résultats montrent la progression significative de la maladie encéphalite-comme chez les souris deDENV-infectées d'une manière dépendante du temps.

<table><tbody><tr><td>Roswell Park Memorial Institute 1640 moyen (RPMI)</td><td>Gibco</td><td>11875-085</td><td>Virus diluant</td></tr><tr><td>0,3 mL Seringue à insuline&nbsp ;</td><td>BD Ultra-Fine&shy ;II</td><td>328838</td><td>Injection intracérébrale et intrapéritonéale</td></tr><tr><td>Microbalance</td><td>METTLER TOLEDO’s LabX</td><td>AL104</td><td>Poids</td></tr> souris <tr><td></td><td>Non adapté DENV2 (souche PL046)</td><td>Centers for Disease Control of Taiwan-Infect</td> <td>mouse</td></tr><tr><td>Institute of Cancer Research (ICR) souris de lait</td><td>BioLASCO Taiwan Co., Ltd-Our</td><td></td> <td>murin</td></tr> model</tbody></table>

un modèle murine de la dengue virus induite par l'encéphalite virale aigue comme la maladie

A Murine Model of Dengue Virus-induced Acute Viral Encephalitis-like Disease

Le virus de la dengue (DENV), un virus transmis par les arthropodes transmis par les moustiques, peut causer la maladie grave connue sous le nom de dengue hémorragique, qui se caractérise par des complications mortelles dues à des fuites de plasma, ascites, effusion pleurale, détresse respiratoire, saignements graves et une déficience des organes. Quelques cas d'infection de DENV présentent des manifestations neurologiques ; cependant, les études n'ont pas exploré la neuropathogenèse DENV-induite plus loin. Dans cette étude, nous présentons un protocole pour employer une souris d'IC (Institut de recherche sur le cancer) de surcapacité immunocompétente pour étudier l'induction de l'infection de système nerveux central (CNS) avec DENV, suivie de la progression de l'encéphalite virale aigue-comme maladie.

Des complications neurologiques graves associées à la dengue ont été signalées chez des patients atteints de pathogénie de la dengue4. Bien que ces cas soient rares dans la clinique, la création d'un modèle murine immunocompétent de l'infection de DENV peut être employée non seulement pour étudier l'immunopathogenèse mais également pour explorer l'infection de CNS, la neuroinflammation, la neurotoxicité, et le viral aigu maladie ressemblant à une maladie ressemblan...

Ici, nous présentons un protocole pour créer un modèle murine immunocompétent d'IC (Institut de recherche sur le cancer) de l'infection de système nerveux central pour montrer le développement de la neuropathie. La surveillance des désordres encéphalitiques virales aigues par des scores identiques de maladie pourrait être exécutée pour montrer la neuropathie virus-induite de dengue in vivo.

Un modèle murine de la dengue virus induite par l'encéphalite virale aigue comme la maladie

Dengue virus (DENV), an arthropod-borne virus transmitted by mosquitoes, may cause the severe disease known as dengue hemorrhagic fever, which is ...

Ce protocole d’un modèle de maladie que vous voyez infection par le virus de la dengue dans le cerveau devenir une plate-forme in vivo pour le dépistage des vecteurs viraux et hôtes associés à la neuropathogenèse. Contrairement aux modèles précédents, nos modèles utilisent des outils de l’infection avec un faible litre viral, pour infecter l’Institut immunocompétent de recherche sur le cancer allaitant les souris pour l’induction de procréation encéphalitique comme la maladie. Ting-Jing Shen, doctorant de mon laboratoire, démontrera la procédure.Avant d’entreprendre la procédure d’infection, diluer le virus de la dengue non adapté deux stocks, à une fois 10 à la cinquième plaque formant des unités par 40 microlitres de concentration moyenne RPMI 1640. Ensuite, chargez une seringue de 0,3 millilitre munie d’une aiguille de calibre 30 avec 10 microlitres de virus dilué. Et une seringue de 0,3 millilitre équipée d’une aiguille de calibre 30, avec 30 microlitres de virus par animal.Pour la livraison intercerbrale du virus, appuyez sur l’oracle entre le pouce et l’index pour retenir doucement une souris de sept jours de l’Institut de recherche sur le cancer en position couchée et injecter le volume de 10 microlitres de virus dilué dans la région de lambda, à l’intersection de la suture sagittale et lambdoid. Après l’injection intercerbrale, utilisez le pouce et l’index pour maintenir la souris dans une position supinée, et doucement intraperitoneally, injecter le volume de 30 microlitres de virus dilué, dans l’abdomen murin. Pour la notation de la progression de la maladie, attribuez un score de zéro à cinq à chaque souris inoculée quotidiennement, selon la catégorie des maladies virales aiguës encéphalite-like, et tracez les scores pour chaque jour comme figure basée sur la courbe, en utilisant le plus moyen et moins l’écart type des scores quotidiens d’essai dans chaque groupe.Par rapport aux changements de poids corporel mesurés chez les souris simulées, moyennes seulement inoculées, les animaux inoculés par le virus de la dengue présentent une diminution du poids corporel à chaque moment au cours de l’essai. En outre, les animaux infectés par le virus de la dengue démontrent une augmentation significative des postures du dos bossu, des convulsions limbiques, de la faiblesse limbique, de la paralysie et de la mort par rapport aux symptômes affichés par les animaux inoculés simulés. En effet, les souris infectées par la dengue présentent une réduction dépendante du temps des taux de survie qui n’est pas observée chez les animaux inoculés simulés, confirmant l’établissement d’un modèle infectieux de virus de la dengue dans le système nerveux central qui démontre la progression des maladies virales aiguës comme l’encéphalite chez la souris.La ponction du mauvais emplacement peut entraîner un blocage de l’aiguille par le score et le débordement de la solution virale à l’extérieur de la tête, entraînant une injection ratée et une infection ratée. Après la procédure, des échantillons de cerveau peuvent être récoltés pour des dommages pathologiques, l’infiltration de cellules immunitaires, et l’analyse virale de réplication par l’hématoxyline et la cytométrie de flux de coloration d’éosine, et l’analyse de formation de plaque, respectivement. Notre modèle de murine immunocompétente, fournit une plate-forme pour explorer les mécanismes pathogènes de l’infection par le virus de la dengue, pour la mise au point de vaccins contre le virus de la dengue, ou médicaments anti-dengue.Le virus de la dengue est un agent pathogène de niveau deux de biosécurité et, à ce titre, toutes les expériences avec ce virus devraient être réalisées dans un laboratoire qualifié de biosécurité animale de niveau deux.

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Immunology and Infection

Immunologie et infection

Cette vidéo montre le score d'induction et cliniques d'un modèle animal de sclérose en plaques: chronique récurrente encéphalomyélite allergique expérimentale chez des rats DA. La maladie, provoquée par les rats immunisant avec une émulsion contenant la moelle épinière de rats et de toute l'adjuvant complet de Freund, présente des signes cliniques ressemblant à la maladie humaine.

Induction et notation clinique de chronique récurrente encéphalomyélite allergique expérimentale

En utilisant la luciférase et in vivo des systèmes d'imagerie (IVIS) comme un nouveau moyen d'identifier les maladies extrêmes avant de développements cliniques se produire. IVIS nous a permis de visualiser en temps réel l'invasion des virus encéphalitique sur plusieurs jours, en fournissant un modèle de maladie plus précise pour des études futures. Il nous a également permis d'identifier les caractéristiques protecteurs potentiels des antiviraux et des vaccins plus rapidement que les modèles...

In Vivo Imaging Systems (IVIS) Détection d&#39;un neuro-invasive virus encéphalitique

La vidéo démontre l’induction d’une encéphalomyélite auto-immune expérimentale dans un modèle murin en injectant une combinaison de glycoprotéines oligodendrocytaires de myéline et de Mycobacterium tuberculosis inactivé. Le modèle permet aux chercheurs d’étudier les mécanismes de la maladie et de tester des interventions thérapeutiques.

Induction d’une encéphalomyélite auto-immune expérimentale dans un modèle murin

Cette vidéo montre la génération d’un modèle de souris avec une infection du SNC. Un chiot allaitant reçoit une injection du virus à la fois par voie intracrânienne et intrapéritonéale. Le virus se propage, infectant le SNC, provoquant la mort des cellules neuronales et l’inflammation. Le chiot est évalué pour détecter les symptômes d’infection à mesure que la maladie progresse.

Génération d’un modèle murin avec une infection du système nerveux central

Dans cette vidéo, un modèle murin de sclérose en plaques est établi à l’aide d’encéphalomyélite auto-immune expérimentale (EAE). On injecte à la souris une émulsion contenant un peptide neuronal et un adjuvant, déclenchant une réponse immunitaire qui active les lymphocytes T autoréactifs. Ceci est suivi d’une injection de toxine coquelucheuse (PTX) pour augmenter la perméabilité de la barrière hémato-encéphalique, permettant aux lymphocytes T autoréactifs d’infiltrer le cerveau. Cette...

Cette vidéo montre l'induction de convulsions induites par la manipulation chez une souris infectée par le virus de l'encéphalomyélite murine de Theiler (TMEV). La souris infectée, qui a des neurones hyperexcitables, est exposée à des stimuli physiques externes. Cette exposition provoque du stress, entraînant une activité électrique anormale dans les neurones, ce qui entraîne des convulsions.

Convulsions induites par la manipulation dans un modèle murin

Virus de l’influenza (IAVs) sont des agents pathogènes respiratoires humains importants. Pour comprendre le pouvoir pathogène de IAVs et d’effectuer des essais précliniques de nouveau vaccin approches, modèles animaux imitant la physiologie humaine sont nécessaires. Nous décrivons ici les techniques pour évaluer l’IAV pathogenèse, humorale et l’efficacité du vaccin en utilisant un modèle de souris de l’infection.

Études de Virus influenza de type A dans un modèle murin d’Infection

Nous décrivons ici une méthode pour établir un modèle de Zika Viro-induite microcéphalie chez la souris. Ce protocole inclut des méthodes pour l’inoculation intracérébrale embryonnaire, néonatale et adulte-stade du virus Zika.

Établir des modèles de souris pour troubles neurologiques Zika Viro-induite à l’aide de stratégies d’Injection intracérébrale : embryonnaires, néonatals et adultes

Le protocole présenté ici permet la reproduction d’une démyélinisation généralisée de la matière grise des deux hémisphères corticaux chez les rats Dark Agouti mâles adultes. La méthode comprend l’implantation intracérébrale d’un cathéter, l’immunisation subclinique contre la glycoprotéine oligodendrocytaire de myéline et l’injection intracérébrale d’un mélange de cytokines pro-inflammatoires à travers le cathéter implanté.

Modèle de rat de démyélinisation corticale cérébrale généralisée induite par une injection intracérébrale de cytokines pro-inflammatoires

L'objectif du protocole est de démontrer les techniques utilisées pour étudier les maladies virales en isolant et en quantifiant le virus Zika, à partir de plusieurs organes d'une souris après l'infection.

Isolement et quantification du virus Zika à partir de plusieurs organes dans une souris

L’infection intracérébrale par le virus de l’encéphalomyélite murine de Theiler (TMEV) chez les souris C57BL/6 reproduit bon nombre des symptômes cliniques précoces et chroniques de l’encéphalite virale et de l’épilepsie subséquente chez les patients humains. Cet article décrit l’infection virale, les symptômes et l’histopathologie du modèle TMEV.

Un modèle d’épilepsie d’étiologie infectieuse utilisant le virus de l’encéphalomyélite murine de Theiler

Découvrez un modèle murin immunocompétent ICR pour étudier la neuropathogenèse induite par le virus de la dengue. Cette méthode permet de suivre l'évolution de l'encéphalite virale aiguë et d'évaluer les facteurs viraux et hôtes impliqués dans la maladie neurologique.

Un modèle murine de la dengue virus induite par l'encéphalite virale aigue comme la maladie

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