Acquisition de données et analyse dans brainstem Evoked Response Audiometry In Mice

L'audiométrie de réponse évoquée de tronc cérébral est un outil important dans la neurophysiologie clinique. De nos jours, l'audiométrie de réponse évoquée par le tronc cérébral est également appliquée dans la science fondamentale et les études précliniques impliquant des modèles d'animaux pharmacologiques et génétiques. Ici, nous fournissons une description détaillée de la façon dont les réponses auditives du tronc cérébral peuvent être enregistrées et analysées avec succès chez les souris.

Ce protocole fournit des informations détaillées sur la façon de planifier, d’effectuer et d’analyser les réponses du tronc cérébral auditif évoquant le clic et l’éclatement du ton chez la souris. Le principal avantage de cette technique est qu’elle permet un profilage auditif complexe et rapide des modèles pharmacologiques et mutants de souris. Les nouvelles perspectives sur alt-er-ed app précoce et le changement associé dans le traitement auditif chez les souris et les rats peuvent être traduits à l’homme.

Par conséquent, cette méthode est d’une importance centrale dans la caractérisation et le phénotypage des maladies auditives, neurologiques et. Cette méthode est la plus importante pour l’identification de la dysacusis, de l’hypoacusis et de l’anacusis. Par exemple, dans les déficits auditifs métaboliques, congénitaux et aspi-met-acury liés à l’âge, ainsi que dans les déficits auditifs dus à des malformations ou malformations, des blessures et des néoplasmes.

Les utilisateurs nouveaux à la technique, devraient accorder une attention particulière à l’électro-placement approprié et l’étalonnage pré-expérimental du système. La démonstration visuelle de la méthode est essentielle pour illustrer l’anesthésie, l’enregistrement DBR, les processus de filtrage ABR et les neur-o-lass-es automatisés d’ABR. Commencez par allumer le pré-amplificateur connecté au microphone, au moins cinq minutes avant l’étalonnage, pour permettre l’équilibrage du système.

Allumez l’oscilloscope. Ensuite, placez le microphone, relié à un pré-amplificateur à l’intérieur du son atténuant cubique, pour imiter l’oreille murine expérimentale. Ensuite, ouvrez les logiciels de traitement et d’acquisition disponibles dans le commerce et programmez les protocoles de relance pour les clics et les rafales de tonalité.

Commencez par l’entité de stimulus de clic pour analyser et déterminer les seuils de clic. Suivi de la symétrie ABR de l’oreille gauche et droite. Et amplitudes ABR et latences plus tard.

Ensuite, utilisez le même logiciel pour vérifier le protocole de stimulation de l’éclatement de tonalité à l’aide du logiciel de conception de stimulus Sig-Gen RZ. Et vérifie les paramètres de stimulus, sous le logiciel d’acquisition Bio-Sig RZ. Programmez la plage de fréquence appropriée à tester, selon la question scientifique, et assurez-vous que les plages de fréquences à appliquer répondent aux capacités techniques du haut-parleur.

Pour une moyenne, réglez le nombre de stimuli acoustiques séquentiels, soit des clics, soit des rafales de tonalité, par exemple, à 300 fois, avec un taux de 20 par seconde; une durée moyenne de 25 millisecondes et le facteur d’amplification du pré-amplificateur, 20 fois. Ensuite, vérifiez le taux d’échantillonnage approprié pour l’acquisition de données ABR, puis passez le filtre à l’aide d’un filtre de six sondages d’une valeur de beurre. Activez le filtre d’encoche si nécessaire.

Démarrez l’étalonnage de l’éclatement de la tonalité en sélectionnant le fichier étalonnage:CAL200K;dans le logiciel, pour activer le mode de configuration d’étalonnage. Et choisissez des périmètres en fonction des conditions expérimentales. Utilisez le système de processeur pour exécuter la procédure d’étalonnage.

Assurez-vous que les spécifications techniques du microphone et du haut-parleur, en termes de niveau de pression sonore ou de limites SPL, de plage de fréquences et de distribution s’harmonisent. Ensuite, sélectionnez et démarrez le protocole prédéfin défini de stimulation par clic. Exécutez un seul clic SPL pour vérifier que le spectre des stimuli sonores est analysé par la transformation rapide en ligne à quatre ay de l’oscilloscope, correspond aux exigences.

Sélectionnez et démarrez le protocole prédéfinit de stimulation de l’éclatement de la tonalité, dans la plage de 1 à 42 kilohertz. Confirmez le spectre de fréquences des stimuli d’essai acoustique enregistrés, à l’aide d’un oscilloscope et d’un FFT en ligne. Enfin, complétez l’étalonnage de l’éclatement du ton en chargeant le fichier d’étalonnage créé sur le protocole de stimulus d’éclatement de tonalité.

Commencez par placer la souris anesthésiée à l’intérieur d’un cubicule atténuant le son, tapissé de mousse acoustique. Pour l’enregistrement du tronc cérébral monaural évoquant des potentiels auditifs, insérez des électrodes sous-cutanées en acier inoxydable au sommet, axiale de l’œil-broche et ventral-latéral de la pinna droite ou gauche selon l’oreille à mesurer. À l’autre extrémité, pour les enregistrements binauraux, placez les électrodes négatives à la pinna droite et gauche.

Placez l’électrode au sol à la hanche de l’animal. Avant l’insertion, former une forme de crochet à la pointe de l’électrode en acier inoxydable qui est la fixation sub-cutanée des électrodes est garanti. Et une fois inséré, placez correctement la tribune de la souris 10 centimètres en face du haut-parleur.

Connectez toutes les électrodes à la scène principale et vérifiez leur impedance. Ensuite, effectuez des mesures d’impédance de toutes les électrodes, avant chaque enregistrement, pour vérifier le positionnement et la conductivité appropriés des électrodes. Enregistrez les ABB dans des conditions de champ libre à l’aide d’un seul haut-parleur fort.

Enfin, effectuer une analyse ABR au moyen d’une détection automatisée des seuils et d’une analyse de la latence des ondes afin de déterminer les pics positifs et les ondes négatives. Dans un premier temps, dans l’analyse des performances auditives générales, des ARS évoqués par clic pour différents LSL, entre zéro et 90, ont été étudiés à l’aide du système automatisé de détection des seuils ABR. Des modifications potentielles des niveaux de seuil abr évoquées par différentes fréquences d’éclatement de tonalité ont été analysées.

Dans les lignes de souris exemplaires, Cav3.2 plus, moins et Cav3.2 moins, moins ont montré des seuils d’audition liés au clic et à l’éclatement de tonalité accrus comparés aux contrôles. Enfin, la fonction de croissance de l’amplitude ABR évoquée par clic et l’analyse de la latence des formes d’ondes ABR ont été effectuées par approche basée sur les ondes. Ce dernier permet de mieux comprendre l’influence spacio-temporelle possible du gène d’intérêt sur le traitement auditif de l’information dans l’oreille interne et le tronc cérébral.

Un bon placement de l’électrode ABR dans la mesure de Pinna et l’étalonnage du système sont essentiels à l’exécution de cette technique. L’approche auditive présentée ici, peut également être utilisée en combinaison avec un système de télémétrie pour analyser les potentiels complexes, mi-latence et tardifs évoqués. Cela contribue à la caractérisation et au phénotypage des maladies auditives, neurologiques et neurologiques.