Mise en œuvre avec précision des tests de dose minimale d'érythème (MED) pour évaluer la variation individuelle de la réponse inflammatoire humaine

L’essai minimal de dose d’érythème, ou essai de MED, est une technique avec une longue histoire dans les arrangements dermatologiques et cliniques de photothérapie. Et il est principalement utilisé pour déterminer la plus petite quantité de rayonnement nécessaire pour produire de l’érythème, ou rougeur visible à la surface de la peau. Dans cette étude particulière, ce que nous avons fait est de développer plusieurs nouvelles techniques et procédures qui permettent d’adapter les tests MED à des fins quelque peu différentes, qui est de quantifier précisément la variation de l’activation inflammatoire humaine.

Le principal avantage du dosage et de la mesure de précision dans les tests MED concerne la reproductibilité des résultats, ce qui ouvre alors de nouvelles possibilités d’examiner systématiquement d’autres facteurs qui pourraient être liés à l’inflammation. Deux doctorants de mon laboratoire, Holly Sullivan-Toole et Corinne Carlton, feront la démonstration de la procédure. Commencez par escorter le participant jusqu’à la salle d’essai.

Expliquez la procédure de test MED au participant et confirmez votre compréhension. Placez le brassard un sur l’avant-bras non dominant. N’enlevez que le support protecteur en papier ciré des parties latérales et non centrales du brassard.

Après avoir placé le brassard un au site d’exposition prévu, placez les repères à l’aide d’un marqueur permanent pour vous assurer que le brassard deux sera situé exactement au même endroit. Ensuite, marquez la peau à quatre points à l’extérieur des plis de chacun des volets latéraux du brassard un, le haut à droite, en haut à gauche, en bas à droite et en bas à gauche. Assurez-vous que les marques sont suffisamment foncées pour durer 24 heures, de sorte qu’elles peuvent être utilisées pour placer le brassard trois exactement au même endroit au rendez-vous de suivi.

Ensuite, utilisez un spectrophotomètre calibré pour enregistrer les lectures à chacune des six ouvertures ouvertes dans l’ordre. Assurez-vous que le spectrophotomètre est placé au centre des ouvertures de manchette, tout en évitant les grains de beauté, cicatrices ou autres imperfections dans la mesure du possible. Enfin, enregistrez en permanence toutes les valeurs SCI.

Pour assurer des lectures cohérentes avec le même point d’étalonnage, gardez le spectrophotomètre en position pendant toute la durée de la procédure MED et ne vous éteignez pas tant que les lectures post-exposition n’ont pas été terminées. Après l’enlèvement du brassard un, placez le brassard deux au même endroit en utilisant les repères dessinés sur la peau pour le brassard un. Mettez l’équipement de sécurité nécessaire, y compris les lunettes, les manches et les gants à l’épreuve des UV, et assurez-vous que le participant fait de même.

Avant d’activer la lampe, disposez le bras du participant de telle sorte que les rayons UV de la lampe soient perpendiculaires à l’angle de manchette deux sur le bras du participant. Activez brièvement la lampe pour ajuster la distance au poignet deux jusqu’à ce que le capteur de radiomètre lit 270 microwatts par centimètre carré. Ensuite, placez le capteur de radiomètre face à la lampe UV, parallèle à la surface de la peau, et aussi près que possible de l’emplacement de la manchette deux.

Ensuite, retirez le premier revêtement d’ouverture avant d’activer la source UV. Retirez chaque fenêtre dans le patch de test de dose selon le calendrier affiché ici, ce qui illustre des horaires de dosage distincts en fonction du type de peau Fitzpatrick du participant. Activez simultanément la source UV et le chronomètre, et retirez chaque revêtement d’ouverture sur le brassard deux selon le calendrier de dosage correct, qui est basé sur fitzpatrick skin type.

Ensuite, éteignez la lampe à l’heure précise spécifiée par le calendrier posologique. Ne désactivez pas le chronomètre, car une série supplémentaire de lectures de spectrophotomètres doit être recueillie exactement sept minutes après la désactivation de la lampe, comme décrit ci-dessous. Enfin, après exactement sept minutes se sont écoulées depuis la désactivation de la lampe, enregistrez les lectures finales du spectrophotomètre de chaque ouverture en manchette deux.

Commencez par calibrer le spectrophotomètre en vue du rendez-vous de suivi, 24 heures plus tard. Préparez le brassard trois en enlevant tous les revêtements d’ouverture et en laissant le support en papier de cire blanc sur la partie centrale du patch. Lorsque vous placez le brassard trois sur le bras du participant, retirez le support en papier de cire blanc des deux volets latérux du patch.

Utilisez les repères sur l’avant-bras du participant pour placer le brassard trois au même endroit que les deux correctifs précédents. Enfin, prenez une lecture à chacune des six ouvertures ouvertes dans l’ordre. Ces résultats montrent une réponse précise de la peau aux tests MED.

Voici des données complètes pour un seul sujet représentatif, ventilées par période d’évaluation. Pré-exposition, sept minutes après l’exposition et 24 heures de suivi. Chaque ouverture, de deux à six, reçoit 25% plus d’énergie que celle qui l’a avant.

En outre, les 72 sujets sont montrés, indiquant la variation qui sont susceptibles d’être rencontrées, entre différents FSTs. Peut-être les aspects les plus importants des tests MED de précision se rapportent à l’adhésion au calendrier de dosage approprié pour le type de peau Fitzpatrick identifié et aussi constamment maintenir la distance correcte entre la surface de la peau et la source de lumière UV. Une partie de notre motivation dans le développement de ces techniques est de faciliter la recherche future examinant comment les réponses inflammatoires pourraient se rapporter à n’importe quel nombre de variables potentiellement intéressantes, telles que les facteurs psychologiques, pharmacologiques, ou liés à la santé.