Dissection et coloration des gouttelettes lipidiques des oenocytes dans les larves de Drosophila

Cette méthode d’une dissection d’œnocyte et d’une coloration des gouttelettes lipidiques peut être utilisée pour réaliser l’apparition d’une gouttelette lipidique dans l’œnocyte des larves de drosophiles dans des conditions normales et stressées. Cette méthode fournit un outil utile pour étudier le métabolisme des lipides non seulement chez les insectes, mais aussi chez les mammifères avec seulement quelques modifications mineures. Pour induire la ponte, placez 150 mouches femelles vierges et 75 mâles des génotypes désirés dans une bouteille de ponte et placez la bouteille sous une boîte à l’épreuve de la lumière dans un incubateur de 25 degrés Celsius avec 60% d’humidité.

Après une heure, transférer les mouches dans une nouvelle bouteille et laisser les mouches pondre des œufs dans la nouvelle bouteille pendant une heure avant d’enlever les adultes. Ensuite, laissez les œufs se développer en larves de troisième stade pendant 84 heures à 25 degrés Celcius avec un cycle clair-obscurité de 12 heures. Avant d’entreprendre le traitement de famine, placez un morceau de papier filtre de taille appropriée dans une boîte de Pétri de six centimètres et ajoutez un millilitre de PBS sur le papier pour créer une chambre de famine.