Étiquetage de proximité basé sur TurboID pour l’identification dans planta des réseaux d’interaction protéines-protéines

Les récepteurs immunitaires NLR jouent un rôle crucial dans la médiation de la défense des plantes contre divers agents pathogènes. Nous décrivons une méthode d’étiquetage de proximité basée sur TurboID pour l’identification des partenaires d’interaction du domaine récepteur Toll/interleukin-1 contenant des NLR tels que les récepteurs immunitaires dans les usines de Nicotiana benthamiana. Ce protocole fournit une référence importante pour étudier les interactions protéines-protéines chez d’autres espèces végétales et il peut être étendu à toute protéine d’intérêt dans Nicotiana benthamiana.

L’approche d’étiquetage de proximité basée sur TurboID présente un net avantage par rapport aux approches traditionnelles, car elle peut être utilisée pour capturer in vivo des interactions protéines-protéines transitoires ou faibles. Commencez par cultiver des graines de N.benthamiana dans un sol humide à haute densité. Conservez-les dans une chambre climatique avec une période de 18 heures de lumière et de huit heures de photo sombre à 23 à 25 degrés Celsius.