Traduire la purification de l’affinité ribosome (TRAP) pour étudier le développement de la racine d’Arabidopsis thaliana à une échelle spécifique au type cellulaire

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14 mai 2020

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La traduction de la purification de l’affinité ribosome (TRAP) offre la possibilité de disséquer les programmes de développement avec un traitement minimal des organes et des tissus. Le protocole donne de l’ARN de haute qualité à partir de cellules ciblées avec un sous-unité ribosomal étiquetée protéine fluorescente verte (GFP). Les outils d’analyse en aval, tels que qRT-PCR ou ARN-seq, révèlent des profils d’expression spécifiques aux tissus et aux cellules.

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M thode TRAP

Chapters in this video

0:04

Introduction

1:08

Propagation and Sterilization

1:36

Plating

2:20

Tissue Treatment (Optional)

2:51

Harvesting

3:39

Tissue Grinding and Homogenization

4:39

Total RNA Sample Collection, Crude Extract Clearing, Bead Washing

5:34

Immunoprecipitation

6:49

Lab Supply Reconditioning

7:38

Results: Representative Cell Type-Specific GFP Expression and Translational Ribosome Affinity Purification (TRAP)/Polysome RNA Quality Assessment

8:47

Conclusion

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