Name: Extraction et dissection du cerveau de porc domestiqué (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-04-25T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 16 s
Description: Apprenez l'extraction et la dissection du cerveau de porc pour la recherche en neuroanatomie. Cette méthode détaillée permet d'isoler précisément les régions cérébrales tout en préservant l'intégrité tissulaire pour analyses ultérieures.

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Les auteurs aimeraient remercier Jim Knoblauch et Martin-Booth Hodges du College of Agricultural, Consumer and Environmental Sciences Information Technology and Communication Services pour leur expertise dans le tournage, l’enregistrement et l’édition audio et vidéo.

Les procédures impliquant des sujets animaux ont été approuvées par l’Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) de l’Université de l’Illinois à Urbana-Champaign
NOTE: Avant l’euthanasie, le porc a été anesthésié par injection intramusculaire avec une combinaison de telazol:kétamine:xylazine (50,0 mg de tiletamine HCl plus 50,0 mg de zolazepam HCl reconstitué avec 1 2,50 mL de kétamine HCl (100 g/L) et 2,50 mL de xylazine (100 g/L) et administrés à 0,06 mg/kg BW). Une fois anesthésié, le porc a été euthanasié par administration intracardiaque de pentobarbital de sodium (390 mg/mL administré à 1 mL/5 kg BW). Pour la dissection du cerveau, il est recommandé que la méthode d’euthanasie soit choisie en fonction de la procédure analytique souhaitée du tissu. La méthode d’euthanasie devrait causer le moins de dommages possible au cerveau.
1. Extraction du cerveau de porc
<ol><li>Après l’euthanasie sans cruauté, décapiter le porc en coupant au-dessus de la nuque, entre la première et la deuxième vertèbre (atlas et axe, respectivement).</li>
	<li>Fixez la tête dans un étau de banc immobilisé modifié pour inclure des pointes. Assurez-vous que la tête est complètement immobilisée avant de procéder.<ol>
<li>À l’aide d’un scalpel, faire une coupe sagittale le long de la ligne médiane du crâne qui continue à la postérieure de la tête.</li>
		<li>Faire une deuxième coupe (transversale) sur le postérieur de la tête.</li>
		<li>Faire une troisième coupe (transversale) sur l’extrémité postérieure du museau et en ligne avec les yeux. Coupez la peau aussi loin que possible du crâne pour assurer un accès facile au crâne.</li>
	</ol>
</li>
	<li>À l’aide d’une scie osseuse, faire deux coupes antérieures à postérieures latérales à la ligne médiane, s’étendant des yeux à l’apex de la courbure du crâne. Biseauté la scie vers la ligne médiane et coupé juste assez profond pour pénétrer dans le crâne.<ol>
<li>Répétez le processus ci-dessus sur les côtés perpendiculaires, créant une « fenêtre » rectangulaire dans le crâne.</li>
	</ol>
</li>
	<li>À l’aide d’un hameçon à viande, pendez la section rectangulaire du crâne. Commencez par placer le crochet dans l’un des coins de la section et appliquez une pression ascendante pour desserrer la pièce du crâne. Prenez soin de placer le crochet à viande seulement au niveau du crâne pour éviter par inadvertance pénétrer le tissu cérébral.</li>
	<li>Si des couches méningées restent sur le cerveau, utilisez des forceps et des ciseaux contondants (ou alternativement, un scalpel) pour enlever doucement les couches sans couper dans le cerveau.</li>
	<li>Utilisez un scalpel pour couper le muscle et la graisse à la partie postérieure de la tête, exposant la partie postérieure du crâne.<ol>
<li>Faire deux coupes transversales le long du postérieur du crâne. Assurez-vous de ne pas couper dans les tissus cérébraux.</li>
		<li>Fixez la tête en plaçant une main ferme sur le museau et appliquez une pression vers l’arrière pour retirer la partie postérieure du crâne, exposant le cervelet.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Retirer la tête du banc vice et placer sur un tapis chirurgical.</li>
	<li>Utilisez un long outil mince, comme l’extrémité émoussée d’un scalpel, pour enlever le cerveau. Inverser la tête et utiliser un mouvement de scooping doux pour amadouer le cerveau hors de la cavité du crâne sans endommager la surface du cerveau. REMARQUE: Il sera nécessaire de couper les nerfs crâniens pour enlever le cerveau. Faites-le doucement et n’essayez pas de tirer le cerveau avec force. Le cerveau tombera tout seul lorsqu’il sera correctement et complètement détaché du crâne et de la colonne vertébrale.</li>
</ol>2. Dissection du cerveau de porc
REMARQUE : Il peut être utile d’utiliser un atlas cérébral ou un guide de dissection des fibres14 comme représentation visuelle pendant les procédures de dissection. Assurez-vous que les échantillons de tissus disséqués sont stockés correctement en fonction des besoins propres au projet lors de l’enlèvement de chaque échantillon (décrit plus en détail ci-dessous). En outre, veuillez noter que pour les besoins de cette vidéo, toutes les régions du cerveau montrées ont été disséquées de l’hémisphère droit, mais cela peut différer par laboratoire en fonction d’objectifs expérimentaux.
<ol><li>Pour enlever le tronc cérébral (principalement la médulle), faire une coupe coronale caudale au cervelet.</li>
	<li>Pour enlever le cervelet, faire une coupe coronale postérieure au cortex. Isoler les régions désirées (p. ex., vermis, flocculus, etc.) du cervelet de cet échantillon. Assurez-vous de ne pas inclure de parties du tronc cérébral dans cet échantillon.</li>
	<li>Séparez les deux hémisphères du cerveau en faisant une coupe mi-sagittale le long de la fissure longitudinale. Faites cette coupe comme un mouvement continu pour éviter de causer des dommages au cortex.</li>
	<li>Pour enlever le midbrain, disséquer une quantité désirée de tissu juste ventral au colliculi supérieur et inférieur.</li>
	<li>Pour enlever l’hippocampe, placez l’extrémité émoussée d’un scalpel dans la partie postérieure du corpus callosum et roulez doucement l’hippocampe, à l’aide d’un mouvement « J » à partir de la partie postérieure du corpus callosum; une corne hippocampe entière est en forme de haricot.</li>
	<li>Le striatum (noyau caudate est principalement montré) est une région grise et blanche rayée de matière juste en dessous du corpus callosum et antérieure à l’hippocampe. Biseauté le scalpel et enlever cette région, révélant tissu strié lors de l’enlèvement.</li>
	<li>Pour enlever le cortex préfrontal médial, disséquez le tissu du gyrus frontal au corpus callosum, en enlevant la partie la plus médiale de cette section. Le cortex droit doit rester après l’ablation du cortex préfrontal médial.</li>
	<li>Pour enlever le thalamus, enlever la structure en forme d’ampoule au centre de la surface médiane du cerveau et rostral au cerveau moyen. Le thalamus a une forme sphérique et aura l’air légèrement plus foncé que le tissu environnant.</li>
</ol>3. Post-dissection
<ol><li>À la fin de la dissection, conservez correctement les échantillons de tissus pour des analyses ultérieures. L’omission de cette étape entraînera une autolyse et une dégradation significatives en aussi peu que 20 minutes.</li>
	<li>Laissez chaque région du cerveau intacte au moment de la dissection si des analyses structurelles seront effectuées, ou hachez les tissus pour créer un échantillon homogène de tissu avant la conservation. Les méthodes courantes de conservation des échantillons pour les tissus cérébraux comprennent la cryopréservation et la fixation chimique à l’aide d’agents de liaisoncroisée 15.</li>
	<li>Pour les analyses de laboratoire standard (p. ex., expression des gènes ou des protéines), plongez dans de l’azote liquide ou des solutions qui stabilisent le matériel génétique avant le stockage à long terme à -80 °C afin de fournir des méthodes de conservation pratiques et rentables.</li>
	<li>Si le maintien de la structure tissulaire est une priorité, préservez les tissus cérébraux au moyen de méthodes de fixation traditionnelles (p. ex., utiliser des fixatifs à base d’aldéhyde pour croiser les protéines), soit sans ou avec perfusion de l’animal ou de l’organe d’intérêt avant la dissection tissulaire.</li>
</ol>

<ol><li>Hughes, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Swine+in+cardiovascular+research%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">Swine in cardiovascular research.</a> Laboratory Animal Science. 36 (4), 348-350 (1986).</li>
<li>Yen, J. Anatomy of the Digestive System and Nutritional Physiology. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aYen%2C+J+%22Biology+of+the+Domestic+Pig%22">Biology of the Domestic Pig</a>. , 31-63 (2001).</li>
<li>Pond, W. G. Of Pigs and People. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPond%2C+WG+%22Swine+Nutrition%22">Swine Nutrition</a>. , 3-24 (2001).</li>
<li>Odle, J., Lin, X., Jacobi, S. K., Kim, S. W., Stahl, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Suckling+Piglet+as+an+Agrimedical+Model+for+the+Study+of+Pediatric+Nutrition+and+Metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Animal+Biosciences%22%5BJournal%5D)">The Suckling Piglet as an Agrimedical Model for the Study of Pediatric Nutrition and Metabolism.</a> Annual Review of Animal Biosciences. 2 (1), 419-444 (2014).</li>
<li>Larsen, M. O., Rolin, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+the+G%C3%B6ttingen+minipig+as+a+model+of+diabetes%2C+with+special+focus+on+type+1+diabetes+research%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+Journal%22%5BJournal%5D)">Use of the Göttingen minipig as a model of diabetes, with special focus on type 1 diabetes research.</a> ILAR Journal. 45 (3), 303-313 (2004).</li>
<li>Lehmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+minipig+in+general+toxicology%5BTitle%5D)+AND+%22Scandinavian+Journal+of+Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">The minipig in general toxicology.</a> Scandinavian Journal of Laboratory Animal Science. 25, 59-62 (1998).</li>
<li>Richer, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sacrococcygeal+and+transsacral+epidural+anesthesia+in+the+laboratory+pig%5BTitle%5D)+AND+%22Surgical+Radiologic+Anatomy%22%5BJournal%5D)">Sacrococcygeal and transsacral epidural anesthesia in the laboratory pig.</a> Surgical Radiologic Anatomy. 20, 431-435 (1998).</li>
<li>Lind, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+pigs+in+neuroscience%3A+Modeling+brain+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+and+Biobehavioral+Reviews%22%5BJournal%5D)">The use of pigs in neuroscience: Modeling brain disorders.</a> Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 31 (5), 728-751 (2007).</li>
<li>Sauleau, P., Lapouble, E., Val-Laillet, D., Malbert, C. -H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pig+model+in+brain+imaging+and+neurosurgery%5BTitle%5D)+AND+%22Animal%22%5BJournal%5D)">The pig model in brain imaging and neurosurgery.</a> Animal. 3 (8), 1138-1151 (2009).</li>
<li>Dobbing, J., Sands, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+aspects+of+the+brain+growth+spurt%5BTitle%5D)+AND+%22Early+Human+Development%22%5BJournal%5D)">Comparative aspects of the brain growth spurt.</a> Early Human Development. 311, 79-83 (1979).</li>
<li>Aurich, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microsurgical+training+model+with+nonliving+swine+head.+Alternative+for+neurosurgical+education%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Cirurgica+Brasileira%22%5BJournal%5D)">Microsurgical training model with nonliving swine head. Alternative for neurosurgical education.</a> Acta Cirurgica Brasileira. 29 (6), 405-409 (2014).</li>
<li>Bassi, T., Rohrs, E., Fernandez, K., Ornowska, M., Reynolds, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+brain+excision%3A+An+easier+method+to+harvest+the+pig%27s+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Interdisciplinary+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Direct brain excision: An easier method to harvest the pig's brain.</a> Interdisciplinary Neurosurgery. 14, 37-38 (2018).</li>
<li>Bjarkam, C. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exposure+of+the+pig+CNS+for+histological+analysis%3A+A+manual+for+decapitation%2C+skull+opening%2C+and+brain+removal%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Exposure of the pig CNS for histological analysis: A manual for decapitation, skull opening, and brain removal.</a> Journal of Visualized Experiments. 122, e55511(2017).</li>
<li>Pascalau, R., Szabo, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibre+dissection+and+sectional+study+of+the+major+porcine+cerebral+white+matter+tracts%5BTitle%5D)+AND+%22Anatomia%2C+Histologia%2C+Embryologia%22%5BJournal%5D)">Fibre dissection and sectional study of the major porcine cerebral white matter tracts.</a> Anatomia, Histologia, Embryologia. 46, 378-390 (2017).</li>
<li>McFadden, W. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perfusion+fixation+in+brain+banking%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathologica+Communications%22%5BJournal%5D)">Perfusion fixation in brain banking: a systematic review.</a> Acta Neuropathologica Communications. 7, 146(2019).</li>
<li>Félix, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stereotaxic+atlas+of+the+pig+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Stereotaxic atlas of the pig brain.</a> Brain Research Bulletin. 49, 1(1999).</li>
</ol>

Les auteurs déclarent qu’ils n’ont pas d’intérêts financiers concurrents.

Les techniques décrites ci-après ont été conçues pour les porcs âgés d’environ 4 semaines. Il est essentiel d’effectuer ces étapes immédiatement après que le porc a été euthanasié humainement pour s’assurer que l’intégrité de la structure des tissus cérébraux est maintenue, en particulier lors de l’examen des essais biochimiques ultérieurs. Il est utile d’utiliser un atlas ou des guides de dissectionde fibre 16 lors de l’apprentissage des techniques. Il est recommandé que l’expérimentateur pratiqu...

Le porc a été bien documenté et accepté comme modèle animal traduisible pour la recherche dans les systèmescardio-vasculaires 1,les systèmes gastro-intestinaux2,la nutrition3,4,lediabète 5,la toxicologie6,et les techniqueschirurgicales 7. L’utilisation du porc en neurosciences commence à augmenter, car PubMed recherche les mots clés « modèle animal du cerveau porcin » se traduire par quatre fois plus de résultats de 1996-2005 que la période précédente de 10 ans8, et encore plus de résultats à l’heure actuelle. Une raison principale que la popularité du modèle de porc est en expansion est due à ses similitudes dans la croissance, la structure et la fonction du cerveau par rapport aux humains. Par rapport au cerveau humain, le cerveau du porc présente des motifs gyraux similaires, la vascularisation et la distribution de la matière grise et blanche9. En outre, le cerveau de porc a été employé dans les procédures de neuroimagerie, a évoqué l’enregistrement potentiel, et en établissant des techniques de neurochirurgie8,9. Contrairement à d’autres modèles animaux, cependant, le porc et l’expérience humaine poussées de croissance du cerveau périnatal, par opposition aux poussées de croissance pré- ou post-natal. À la naissance, le cerveau humain et porcin pèse environ 27 et 25 pour cent de leur poids cérébral adulte, respectivement, par rapport au cerveau de rat qui pèse 12 pour cent de son poids cérébral adulte et le cerveau de singe rhésus à 76 pour cent du poids adulte10.
L’une des raisons pour laquelle le porc n’a été adopté que lentement comme modèle animal pour les neurosciences est que de nombreux chercheurs ne connaissent pas l’animal dans ce contexte. Les chercheurs peuvent ne pas être conscients de ses utilisations potentielles sur le terrain ou ne pas connaître les techniques appropriées requises pour utiliser un tel modèle. Comme l’utilisation du porc comme modèle biomédical et préclinique attire l’attention et l’utilisation en neurosciences, il est nécessaire d’établir des procédures normalisées d’enlèvement des tissus afin d’assurer une comparaison précise des données entre les études. Bien que la dissection et les techniques chirurgicales impliquant le cerveau de porc ont étépubliées ailleurs 11,12,13, il est nécessaire de protocoles simples et normalisés pour recueillir les tissus cérébraux des porcs, en particulier pour une utilisation dans les essais biochimiques. En tant que tel, le but de cette vidéo est de fournir les connaissances nécessaires pour permettre aux chercheurs d’effectuer une extraction et une dissection normalisées du cerveau. Cette vidéo illustre une technique appropriée pour enlever le cerveau du porc tout en gardant le cortex et le tronc cérébral intacts, et ensuite examiner les méthodes pour disséquer plusieurs régions clés du cerveau.

<table><tbody><tr><td>#22 Lames de scalpel pour poignées #4</td><td>Ted Pella, inc.</td><td>549-4S-22</td><td></td></tr><tr><td>11 1/2 » Satterlee Bone Saw</td><td>Leica Biosystems</td><td>38DI13425</td><td></td></tr><tr><td>5 1/2 » Skull Breaker avec extrémité biseautée (crochet à viande)</td><td>Leica Biosystems</td><td>38DI37636</td><td></td></tr><tr><td>5-inch Heavy Duty Workshop Bench Étau</td><td>Pony</td><td>29050</td><td></td></tr><tr><td>Couteau de boucher 25cm</td><td>Victorinox</td><td>5.7403.25</td><td>Affûter avant utilisation</td></tr><tr><td>CM40 Light Duty Drop Forgé C Clamps</td><td>Bessey</td><td>00655BC3120</td><td></td></tr><tr><td>Diamond Hone Knife Shaper</td><td>Chef' s Choice</td><td>436-3</td><td></td></tr><tr><td>Shandon Manche de lame de scalpel en acier inoxydable #4</td><td>ThermoScientific</td><td>5334</td><td></td></tr><tr><td>Pince à tissus</td><td>Henry Schein</td><td>101-5132</td><td></td></tr><tr><td>Tampon de dissection en vinyle</td><td>Carolina</td><td>629006</td><td></td></tr></tbody></table>

extraction et dissection du cerveau de porc domestiqué

Extraction and Dissection of the Domesticated Pig Brain

L’utilisation du porc comme modèle animal préclinique et traduisible a été bien documentée et acceptée par les domaines de recherche qui étudient les systèmes cardiovasculaires, les systèmes gastro-intestinaux et la nutrition, et le porc est de plus en plus utilisé comme un grand modèle animal en neurosciences. En outre, le porc est un modèle accepté pour étudier le neurodéveloppement car il affiche des modèles de croissance et de développement du cerveau similaires à ce qui se produit chez l’homme. En tant que modèle animal moins courant en neurosciences, les interventions chirurgicales et dissection sur les porcs peuvent ne pas être aussi familières ou bien pratiquées chez les chercheurs. Par conséquent, un protocole visuel normalisé détaillant des méthodes cohérentes d’extraction et de dissection peut s’avérer utile pour les chercheurs travaillant avec le porc. La vidéo suivante présente une technique pour enlever le cerveau du porc tout en gardant le cortex et le tronc cérébral intacts et passe en revue les méthodes pour disséquer plusieurs régions cérébrales couramment étudiées, y compris le tronc cérébral, le cervelet, le midbrain, l’hippocampe, le striatum, le thalamus et le cortex préfrontal médial. Le but de cette vidéo est de fournir aux chercheurs les outils et les connaissances nécessaires pour effectuer systématiquement une extraction cérébrale et une dissection sur le porc de quatre semaines.

Cette section décrit des exemples de résultats obtenus après l’extraction et la dissection correctes d’un cerveau de porc de 4 semaines. La figure 1 décrit la forme de chaque région du cerveau pour être utilisé comme guide pendant la dissection. Une partie du tronc cérébral peut rester dans le crâne après l’ablation du cervelet (Figure 1B). Ceci peut être enlevé tout en isolant la région désirée du cervelet. Le tableau 1 affiche le poids moyen (...

Ce protocole détaille la technique d’ablation du cerveau porcin dans son intégralité et la dissection de plusieurs régions du cerveau couramment étudiées en neurosciences.

Extraction et dissection du cerveau de porc domestiqué

Use of the pig as a preclinical and translatable animal model has been well-documented and accepted by research fields investigating cardiovascular ...

La vidéo suivante est une démonstration de l’enlèvement et de la dissection du cerveau du porc. Il peut être utile de se référer à un atlas, ou un guide de dissection des fibres avant ou pendant la procédure. Un grand couteau de boucher est le meilleur pour la décapitation car il permettra une coupe propre entre l’atlas et l’axe.Assurez-vous que le couteau est tranchant avant de commencer par un nouveau sujet. Un crochet à viande est utilisé pour enlever le crâne. Un long outil mince comme une poignée de scalpel est utilisé pour enlever le cerveau du crâne.Un vice avec des vis ou des saillies est nécessaire pour fixer la tête tout en coupant le crâne. Une fois que l’animal a été euthanasié sans cruauté selon les protocoles établis procéder comme suit. Couper juste au-dessus de la nuque, entre les épaules et le haut de la tête.Sécurisez le porc et déplacez les années hors de la route pendant la décapitation. Utilisez un scalpel pour faire des incisions pour séparer la peau du crâne. Faire une première coupure au milieu du crâne qui continue au postérieur de la tête.La deuxième coupe transversale doit être sur le postérieur de la tête. La troisième coupe également transversale commencera au postérieur de ce museau, et en ligne avec les yeux pour assurer un accès facile au crâne. Utilisez une scie à os pour faire des coupes antérieures à postérieures latérales à la ligne médiane.Commencez par marquer légèrement la zone pour la coupe avec la scie, puis commencez à scier jusqu’à ce que vous rencontriez moins de résistance du crâne. Biseauté légèrement la scie vers la ligne médiane tout en coupant car cela vous assurera que vous coupez la partie la plus mince du crâne. Si la coupe est trop près de l’oreille, il sera difficile d’enlever le crâne.Mais si la coupe est trop proche de la ligne médiane, l’ouverture sera trop petite pour enlever le cerveau. Répétez ce processus sur les côtés perpendiculaires pour créer une fenêtre rectangulaire. Assurez-vous que chaque coin de la fenêtre est complètement coupé, de sorte qu’une partie du crâne peut être enlevée pour révéler le cerveau en dessous.Ensuite, utilisez un crochet à viande ou un instrument incurvé pour indiscrets de la section rectangulaire du crâne hors de position. Commencez par placer le crochet dans l’un des coins, et en appliquant de la pression pour faire éclater la calotte. Dans certains cas, les méninges resteront sur le cerveau.Et si cela se produit soigneusement utiliser des forceps et des ciseaux émoussés, ou alternativement un scalpel pour enlever les méninges sans couper le cerveau. Pour référence, le cerveau doit regarder comme suit avant et après que les couches méningées ont été enlevées. Couper à travers le muscle et la graisse sur le postérieur de la tête pour se préparer à l’exposition du cervelet.Pour exposer le cervelet faire deux coupes transversales le long du postérieur du crâne. Lorsque vous faites ces coupes prendre soin de ne pas couper dans le cerveau exposé. Une fois que les coupures ont été faites placer une main sur le museau, et une sur le crâne, et appliquer une pression vers l’arrière pour tirer la partie postérieure du crâne loin du reste de la tête.Comme souligné ici, le cervelet est caché derrière les couches méningées restantes. Utilisez l’extrémité d’un instrument contondant comme une poignée de scalpel pour séparer soigneusement le cerveau du crâne, en prenant soin d’éviter d’endommager le cerveau dans le processus. Inversez légèrement la tête pour aider à amadouer le cerveau hors du crâne, et utilisez un mouvement de scooping doux pour couper les nerfs crâniens et enlever le cerveau.Ce processus exige de la patience et de la pratique pour éliminer toutes les connexions restantes entre le cerveau et la cavité crânienne. L’inversion de la tête du porc peut être utile au cours de ce processus. Continuer à utiliser des mouvements de balayage avec l’instrument contondant pour libérer le cerveau.Comme souligné ici, le cervelet et le tronc cérébral peuvent être difficiles à enlever car ils sont cachés dans la cavité du crâne. Prenez soin lors de l’enlèvement du cervelet et medulla, ou tronc cérébral. Le cerveau doit tomber tout seul lorsqu’il est complètement détaché du crâne.La cavité du crâne devrait ressembler à ce qui a été montré après l’ablation du cerveau. En préparation de la dissection de la région du cerveau, assurez-vous que les contenants préétiquetés sont organisés et à proximité. Par exemple, les méthodes de conservation incluent des échantillons de congélation instantanés dans de l’azote liquide, ou leur submerging dans une solution de conservation.Une fois extrait de la cavité crânienne, tout le cerveau devrait ressembler à suit. Pour enlever la médulle ou le tronc cérébral, faire une coupe coronale caudale au cervelet. Pour enlever le cervelet, faire une coupe coronale postérieure au cortex.Pour séparer les hémisphères faire une coupe midsagittal le long de la fissure longitudinale en utilisant un mouvement continu pour prévenir les dommages. Pour les besoins de cette vidéo, nous ne montrerons que des dissections de l’hémisphère droit. Pour enlever le midbrain chercher le supérieur, et colliculi inférieur qui sont deux bosses sur la partie postérieure du cerveau.Enlever la quantité désirée de tissu cérébral juste ventral à ces régions. Pour enlever la position de l’hippocampe, la poignée du scalpel sur le postérieur du corpus callosum, et rouler doucement l’hippocampe. Toute la corne d’hippocampe sera en forme de haricot.L’hippocampe doit facilement se déployer lors de la ramasse de votre doigt dans un j-motion, à partir du corpus postérieur callosum. Pour enlever le striatum ou le noyau caudate effacer la partie antérieure du corpus callosum. Le noyau caudate est la région striée ou rayée qui est de couleur grise et blanche et située juste en dessous du corpus callosum.Avec la poignée du scalpel incliné enlever cette région qui comprend principalement le noyau caudate. Après avoir enlevé ce tissu, vous devriez être en mesure de voir un modèle strié où la région du cerveau avait été localisée. Pour enlever le cortex préfrontal médial dissected tissu du gyrus frontal au corpus callosum prenant la partie la plus médiale de cette section.Le cortex droit doit rester après l’ablation du cortex préfrontal médial. Pour enlever le thalamus, retirez l’ampoule comme structure au centre de la surface midsagittal. Le thalamus a une forme sphérique évidente, et il aura l’air légèrement plus sombre que le tissu environnant.À la fin de la dissection, les échantillons de tissus devraient être conservés correctement en fonction de résultats expérimentaux spécifiques. On y voit les régions du cerveau disséquées, y compris la taille et la forme relatives attendues lorsque l’on travaille avec de jeunes porcs. Lors de la maîtrise de ces techniques, l’extraction complète du cerveau, et la procédure de dissection prendra moins de 15 minutes par sujet, et de produire des résultats cohérents.

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Nous décrivons un modèle de rat de trouble de stress post-traumatique (SSPT) qui révèle les altérations persistantes dans la fonction neuroendocrine et le retard à long terme, l'intervention crainte exagérée, caractéristiques des patients SSPT. Le modèle animal et les méthodes décrites ici sont utiles pour corréler des biomarqueurs dans les noyaux du cerveau, qui sont mécaniste, mais ne peut pas être mesurée chez les patients avec des biomarqueurs en globules blancs périphériques, ce qui peut.

Biomarqueurs dans un modèle animal pour Révéler Corrélats neuronaux, hématologiques et du comportement de stress post-traumatique

Cette vidéo montre une méthode de préparation de cultures de tranches d’hippocampe organotypiques à partir du cerveau d’un ratillon. Il décrit les étapes impliquées dans la dissection de l’hippocampe, le tranchage et les conditions de culture nécessaires pour favoriser la viabilité cellulaire et la croissance dans les tranches de l’hippocampe, générant finalement des cultures de tranches organotypiques.

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Cette vidéo démontre le processus de formation des neurosphères et leur expansion à partir du tissu hippocampique. Les cellules souches neurales et progénitrices du tissu gyrus denté de souris postnatale prolifèrent et forment des neurosphères primaires, qui sont ensuite réensemencées pour former des neurosphères secondaires.

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La recherche sur la neurotoxicité du développement induite par l'anesthésie (AIDN) s'est concentrée sur les rongeurs, qui ne sont pas largement applicables aux humains. Les modèles de primates non humains sont plus pertinents, mais ils sont coûteux et difficiles à utiliser pour l'expérimentation. Le porcelet, en revanche, est un modèle animal cliniquement pertinent, idéal pour l'étude de la neurotoxicité anesthésiante.

Utilisation d&#39;un modèle Piglet pour l&#39;étude de la neurotoxicité du développement induite par l&#39;anesthésie (AIDN): une approche de la neurologie translationnelle

Le but de cet article et vidéo d'instruction est de décrire comment exposer et enlever le cerveau de porc post-mortem et hypophyse dans un état intact, adapté à l'analyse macroscopique et histologique.

L&#39;exposition du porc du système nerveux central pour l&#39;analyse anatomopathologique: Un manuel pour Décapitation, Crâne d&#39;ouverture et cerveau suppression

Cet article décrit une méthodologie détaillée pour obtenir aplaties sections tangentielles des cortex mammifère et visualiser les modules corticales en utilisant histochimiques et méthodes immunohistochimiques.

Visualisation des Modules corticales dans cortex mammifère aplatie

Nous présentons un protocole pratique, étape par étape, rapide pour l’ablation du cerveau de souris et la dissection de régions discrètes à partir de tissus cérébraux frais. L’obtention de régions cérébrales pour l’analyse moléculaire est devenue une routine dans de nombreux laboratoires de neurosciences. Ces régions du cerveau sont immédiatement congelées pour obtenir des données transcriptomiques de haute qualité pour l’analyse au niveau du système.

Microdissection du cerveau de souris en régions fonctionnellement et anatomiquement différentes

Cet article présente un protocole étape par étape pour l’implantation directe de canules dans la cisterna magna des porcs.<br...

Implantation directe de canules dans la Cisterna Magna des porcs

Ici, nous présentons une méthode pour l’évaluation à long terme de la performance et de la sécurité des réseaux d’électrodes sous-durales souples dans un modèle mini-porc, décrivant la méthode et les outils chirurgicaux, l’imagerie par résonance magnétique postopératoire, l’électrophysiologie du cortex auditif, les propriétés électrochimiques de l’implant et l’immunochimie post-mortem.

Implantation d’un réseau d’électrocorticographie molle sous-durale (ECoG) et enregistrement cortical à long terme chez les miniporcs

Ce protocole décrit la réalisation d’une craniectomie à l’aide d’une perceuse pneumatique à grande vitesse sur un porc Landrace danois âgé de 3 mois. L’accès se fait par l’os frontal et révèle la dure-mère ventrale et les hémisphères cérébraux sous-jacents. Cette procédure permet d’accéder à une grande partie du cerveau du porc.

Accès au cerveau porcin par forage pneumatique à grande vitesse

Une méthode innovante pour construire des matrices cérébrales extensibles afin de couper des tranches coronales ou sagittales est décrite pour une application chez les porcelets nouveau-nés. Cette approche économique utilise des plaques acryliques sculptées à partir de gabarits issus du moulage cerveau en gel d’agarose, s’applique à plusieurs espèces et permet une expansion pour favoriser la croissance cérébrale.

Fabrication d’une matrice cérébrale extensible personnalisable à travers les stades de développement

Apprenez l'extraction et la dissection du cerveau de porc pour la recherche en neuroanatomie. Cette méthode détaillée permet d'isoler précisément les régions cérébrales tout en préservant l'intégrité tissulaire pour analyses ultérieures.

Extraction et dissection du cerveau de porc domestiqué

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