Analyse du temps de séjour d’une molécule unique du clivage de l’ADN médié par l’endonucléase de restriction

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7 février 2021

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À l’aide de l’ADN marqué par des points quantiques et de la microscopie à fluorescence à réflexion interne totale, nous pouvons étudier le mécanisme de réaction des endonucléases de restriction tout en utilisant des protéines non marquées. Cette technique à molécule unique permet d’observer massivement multiplexée les interactions protéine-ADN individuelles, et les données peuvent être regroupées pour générer des distributions de temps de séjour bien remplies.

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Analyse de molécule unique

Chapters in this video

0:00

Introduction

0:31

Preparation of Quantum-Dot-Labeled DNA Substrate Materials

3:38

Microfluidic Device Construction

5:58

Surface Tethering of Quantum-Dot-Labeled DNA Substrate

7:07

REase-Mediated DNA Cleavage

7:51

Results: Single-Molecule TIRF Experiment for Parallelized Observations of DNA Cleavage Events

9:32

Conclusion

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