Échafaudage composite collagène-chitosane chargé en doxycycline pour la guérison accélérée des plaies diabétiques

Les travaux de recherche actuels portent sur des échafaudages composites collagène-chitosane chargés de doxycycline pour la cicatrisation accélérée des plaies diabétiques. Le diabète est une maladie métabolique chronique caractérisée par des niveaux élevés de glucose sanguin. Plus la personne est atteinte de diabète, plus le risque de complications, comme les maladies cardiovasculaires, la néphropathie, la neuropathie, la rétinopathie et les lésions du pied, et cetera, est élevé.

Les lésions nerveuses dans les pieds et aussi un mauvais flux sanguin vers les pieds augmentent le risque de diverses complications du pied. Si elles ne sont pas traitées, ces blessures peuvent finalement nécessiter des amputations de l’orteil, du pied ou de la jambe. En gros, 25% des patients atteints de diabète sucré ont la possibilité de construire une plaie diabétique dans leur vie.

La gestion thérapeutique des blessures diabétiques demeure un obstacle jusqu’ici qui doit être par la suite franchi. Quoique la pathophysiologie de la blessure diabétique soit multifactorielle, on le croit que le traitement local avec les drogues anti-inflammatoires pourrait diminuer les niveaux élevés de MMP-9 et rétablit l’arrangement cutané de cadre d’homéostasie et incite la guérison dans les blessures diabétiques. La doxycycline, l’inhibiteur MMP-9, a été choisie dans cette étude pour supprimer ces niveaux élevés de MMP-9, une molécule inflammatoire importante responsable de l’inflammation continue des blessures diabétiques.

D’autre part, les biomatériaux fascinent les humains depuis plusieurs décennies et ont été au cœur de nombreuses percées médicales révolutionnaires pour une administration efficace de médicaments et de macromoléculaires et le développement de dispositifs biomédicaux sur mesure. Par conséquent, avec cette brève introduction, nous avons préparé un échafaudage chargé de collagène-chitosane de doxycycline pour atténuer, pour accélérer la guérison retardée dans les blessures diabétiques. Il s’agit de Bharat Kumar Reddy, chercheur au Département de pharmacie du JSS College of Pharmacy, Ooty, Inde.

Aujourd’hui, nous sommes ici pour examiner la procédure, comment préparer un échafaudage de collagène-chitosane chargé en doxycycline pour la guérison accélérée des plaies diabétiques. Jetons un coup d’œil à la procédure, comment se préparer. Nous allons préparer 1,2% de solution de collagène, pour laquelle nous prenons 1,2 gramme de collagène de type I, qui provient d’une queue de rat.

À cela, nous ajoutons 100 ml d’eau Millipore et l’avons gardée de côté pendant une demi-heure afin de permettre au collagène de se gonfler dans l’eau. Dans l’étape suivante, 0,8% de solution de chitosane a été préparé, pour laquelle nous prenons 0,8 gramme de chitosane de poids moléculaire moyen, et cela a été mélangé avec 100 ml d’acide acétique à 1%. Cette solution aussi, nous l’avons gardée de côté pendant une demi-heure.

Après une demi-heure, les deux solutions ont été soumises à une agitation mécanique pendant la nuit à un régime de 2000. À la solution de collagène agitée pendant la nuit, nous ajoutons lentement un gramme de doxycycline. Et la solution contenant ce collagène et cette doxycycline a été soumise pendant une demi-heure d’agitation à un RPM de 2000.

À cette solution, nous ajoutons lentement une solution de chitosane agitée pendant la nuit. Et cela, assurez-vous qu’il est étiqueté comme un mélange physique qui contient de la doxycycline, du collagène, du chitosane. Ce mélange physique, nous l’avons soumis pendant encore une demi-heure d’agitation à un rpm de 2000.

Après une demi-heure, ces mélanges physiques ont été transférés dans des moules en aluminium respectifs, qui ont une dimension de deux en deux centimètres et une épaisseur de 0,5 centimètre. Plus tard, ces moules ont été transférés dans un récipient métallique. Ces récipients métalliques étaient contenant les moules en aluminium, ont été soumis pour le surgélation.

Après 24 heures, nous pouvons clairement voir le mélange physique solidifié contenant de la doxycycline, du collagène et du chitosane. Ces mélanges physiques solidifiés ont ensuite été soumis à la lyophilisation. La lyophilisation a été exécutée à moins 85 degrés plus ou moins quatre degrés Celsius pendant 72 heures.

Après 72 heures, le matériel lyophilisé a été retiré du lyophilisateur. Et ici, nous pouvons clairement voir le mélange physique complètement séché, qui n’est rien d’autre que connu sous le nom d’échafaudage collagène-chitosane chargé en doxycycline. Ces échafaudages ont été soumis pour la réticulation Afin d’effectuer la réticulation, initialement, le tampon MES a été préparé en prenant 0,488 gramme de MES et 15 ml d’eau, à partir desquels nous retirons 20 ml de tampon MES et transférons séparément dans votre bécher.

À ces 20 ml de bécher, 50 mg de collagène-chitosane chargé en doxycycline ont été ajoutés. Et le trempage de cet échafaudage a été effectué pendant une demi-heure. Après une demi-heure, l’échafaudage chargé de collagène-chitosane de doxycycline a été sorti du tampon de MES de 20 ml.

De plus, il a été trempé dans une solution contenant 19,5 ml de tampon MES, 0,1264 gramme d’EDC et 0,014 gramme de NHS. Le trempage a été effectué pendant quatre heures d’intervalle de temps pour l’achèvement de la réticulation. Après réticulation, l’échafaudage de collagène-chitosane chargé en doxycycline réticulée a été sorti de la solution et transféré dans un récipient, qui a été détaillé dans la procédure précédente, et il a été séché séparément.

Ici, nous pouvons clairement voir l’échafaudage non réticulé et réticulé, ainsi que les mêmes images. D’après les images, il est clair que la réticulation de l’échafaudage a entraîné une diminution de la taille des pores due à la formation de fortes liaisons intramoléculaires. Le rat masculin de Wistar a été pris et les deux dans la marque de deux centimètres ont été dessinés sur la région thoracique dorsale.

La blessure d’excision a été créée autour de la marque et le tracé de blessure a été pris sur une feuille d’OHP. La trace de la blessure a été mesurée à l’aide de la méthode graphique. La plaie créée sur l’animal était d’environ 176 mm.

Plus tard, la blessure créée a été traitée avec l’échafaudage chargé par doxycycline réticulé de collagène-chitosane avec le pansement primaire et surveillée pendant 21 jours. Une fois que l’animal a été récupéré de l’anesthésie, chaque animal a été mis en cage individuellement. Et ces animaux ont été nourris avec une alimentation normale et de l’eau.

Tous les animaux, après avoir créé la blessure, ont été divisés en trois groupes dans lesquels chaque groupe contenait six animaux. Ici, nous pouvons clairement voir la différence entre le jour zéro et sept jours dans lequel la réduction de la plaie d’échafaudage réticulée chargée de doxycycline était d’environ 48% Et dans cette image, nous pouvons clairement voir la différence entre le jour 14 et le jour 21 de tous les groupes dans lesquels l’échafaudage réticulé de collagène chargé de doxycycline a été guéri autour de 99%La zone guérie a été isolée et traitée pour des études histopathologiques à l’aide de la coloration HMB. Ici, nous pouvons clairement voir l’épiderme reepithelized, le jour 21, dans l’échafaudage de chitosane de collagène chargé en doxycycline.

Alors que dans le contrôle et l’échafaudage réticulé, rien que le placebo, encore l’épiderme devait être formé. Comme notre propre étude, les échafaudages réticulés de doxycycline préparés ont présenté de nombreuses propriétés idéales, telles qu’une bonne résistance mécanique, une biocompatibilité, une absorption d’eau à libération prolongée, ainsi que des propriétés antibactériennes et anti-inflammatoires. Ces échafaudages peuvent être une forme de dosis idéale pour le traitement des plaies diabétiques.