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DOI: 10.3791/62215-v
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This article presents a method for preserving lung structures through an innovative air-inflation with vascular perfusion-fixation technique. This method allows researchers to maintain cell morphology and location within airways, alveoli, and interstitium for detailed structure-function analyses. The preserved samples are suitable for subsequent histologic studies.
Présenté est une méthode de gonflage de l’air avec perfusion vasculaire-fixation des poumons qui préserve l’emplacement des cellules dans les voies respiratoires, les alvéoles et l’interstitium pour les analyses structure-fonction. La pression constante des voies respiratoires est maintenue avec une chambre de gonflage de l’air tandis que le fixateur est perfusé via le ventricule droit. Les poumons sont traités pour des études histologiques.
Il s’agit d’une méthode peu coûteuse qui combine les avantages du gonflage de l’air et de la fixation par perfusion vasculaire pour préserver les poumons pour les analyses structurelles et fonctionnelles. Le principal avantage de cette technique est la préservation de la morphologie cellulaire et de l’emplacement dans les espaces aériens du poumon. Des précautions doivent être prises lors de la mise en place de l’adaptateur de talon de leurre dans la trachée et de l’aiguille de perfusion dans le ventricule droit pour assurer un gonflage et une fixation adéquats.
Pour installer l’appareil de gonflage de l’air, placez une seringue pour la colonne d’eau dans un porte-anneau et mesurez une hauteur verticale de 25 centimètres de la plate-forme animale à 25 centimètres sur la colonne d’eau. Fixez à l’extrémité du tube de la colonne d’eau au robinet d’arrêt de la chambre à air et fixez un tube du leurre femelle de la chambre à air au robinet d’arrêt du récipient de traitement des animaux. Vérifiez que le bouchon de la chambre à air et le robinet d’arrêt à l’extérieur du récipient de traitement des animaux sont fermés et que le robinet d’arrêt du tube menant de la colonne d’eau à la chambre de gonflage de l’air est ouvert.
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