Name: Une méthode d’inoculation efficace pour Phytophthora capsici sur les plantes de poivre noir (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-09-16T12:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 58 s
Description: Découvrez une méthode d'inoculation efficace pour Phytophthora capsici sur les plants de poivre noir. Cette technique améliore la fiabilité des études d'interaction plante-pathogène par rapport aux méthodes traditionnelles.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ce travail a été soutenu financièrement par le National Key R&D Program of China (2020YFD1001200), le China Agriculture Research System (CARS-11), le fonds de recherche spécifique de The Innovation Platform for Academicians of Hainan Province (YSPTZX202154), la Natural Science Foundation of Hainan Province of China (321RC652) et la Natural Science Foundation of China (No. 31601626).

1. Préparation des plants de coupe de poivre noir pour l’infection
<ol><li>Prenez une coupe à cinq nœuds, d’environ 40 cm de long avec un diamètre de 0,5 cm, à partir d’une branche orthotrope saine et en croissance vigoureuse de poivre noir à l’aide d’un couteau à taille désinfecté ou de sécateurs. Taillez les trois nœuds inférieurs des branches plagiotropes, les deux nœuds supérieurs restants avec environ 10 feuilles intactes.</li>
	<li>Préparer le substrat d’enracinement contenant du sol et du fumier animal (bouse de vache ou bouse de mouton) dans un rapport de 1:1. Autoclaver le substrat d’enracinement à 121 °C pendant 20 min.</li>
	<li>Insérez les boutures dans le substrat d’enracinement à un angle d’environ 50 °, le troisième nœud touchant simplement la surface du substrat et le bourgeon axillaire sur ce nœud au-dessus du substrat. REMARQUE: Le sac utilisé ici a les dimensions suivantes: hauteur de 40-60 cm, diamètre de 25-30 cm.</li>
	<li>Versez 10-20 L d’eau sur les racines de la plante. Placez les boutures dans une serre à 90% d’ombre à une température de 25-30 ° C pour l’enracinement et la croissance.</li>
</ol>2. Propagation de Phytophthora capsici (P. capsici)
NOTE: Un stock de culture de Phytophthora capsici est conservé dans le laboratoire de protection des plantes de l’Institut de recherche sur les épices et les boissons, Académie chinoise des sciences agricoles tropicales7.
<ol><li>Brossez et nettoyez les tubercules de pommes de terre sous l’eau courante du robinet, puis coupez 200 g de pommes de terre en cubes de 1 cm3. Placer certains des cubes dans un bécher contenant 800 mL d’eau double distillée (ddH2O) et faire bouillir pendant 20 min.</li>
	<li>Filtrer le bouillon à travers une double gaze à l’aide d’une filtration par gravité. Préparer la gélose au dextrose (PDA) de pommes de terre en ajoutant 20 g de dextrose et 15 g de gélose au filtrat et en garnissant le volume jusqu’à 1 L de ddH2O. Autoclaver le mélange à 121 °C pendant 20 min8.</li>
	<li>Versez 20 mL du PDA stérilisé sous forme liquide dans une boîte de Petri ronde de 9 cm de diamètre à l’intérieur d’une hotte à flux d’air laminaire. Laissez les plaques PDA avec les couvercles ouverts à l’intérieur de la hotte à flux d’air laminaire pendant la nuit afin d’éviter la condensation.</li>
	<li>Utilisez une boucle d’inoculation pour ramasser le mycélium du stock de Phytophthora capsici à l’intérieur d’un tube à essai. Placez l’inoculum avec le côté mycélien en contact avec le PDA dans une boîte de Pétri.</li>
</ol>3. Infection du poivre noir
<ol><li>Incubation<ol>
<li>Identifiez une zone située à 5 cm au-dessus de la surface du substrat et près des racines sur la tige pour l’inoculation.</li>
		<li>Détacher un disque de mycélium de 0,5 cm de diamètre au bord de croissance de la culture phytophthora capsici sur PDA dans une boîte de Pétri à l’aide d’un foreur de bouchon.</li>
		<li>Endommagez la tige à l’aide d’une aiguille de seringue et faites trois trous dans un motif triangulaire à la zone d’inoculation sélectionnée. Couvrez chaque trou avec un disque mycélien. Placez les trous près les uns des autres pour vous assurer que la zone blessée est entièrement recouverte des disques mycéliens.</li>
		<li>Couvrez les disques mycéliens avec des cotons stérilisés humidifiés afin d’éviter le dessèchement. Attachez le tampon sur la tige avec une bande de polyéthylène pour maintenir la position des disques inoculants. REMARQUE: À 8 heures après l’inoculation, les trous inoculés sont devenus noirs et la lésion s’est étendue au fil du temps. Les feuilles sont devenues jaunes et sont tombées, et la plante inoculée est morte 7 à 10 jours après l’inoculation. Aucune lésion ne s’est développée dans les usines de contrôle. La plupart des gènes exprimés différemment après l’inoculation avec Phytophthora capsici par rapport au groupe témoin. L’analyse histopathologique des tissus infectés a démontré que Phytophthora capsici colonisait le xylème.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Échantillonner les matières végétales d’intérêt et les stocker à -80 °C dans de l’azote liquide pour une utilisation dans des études ultérieures. REMARQUE: De l’azote liquide, des sacs en plastique, des stylos marqueurs, des cisailles à branches et d’autres matériaux ont été préparés avant les expériences.</li>
	<li>Une fois que les matières végétales spécifiques ont été échantillonnées pour utilisation, autoclavez toutes les matières végétales restantes, les restes de culture et de milieu de culture de Phytophthora capsici , ainsi que tous les instruments et le matériel de laboratoire utilisés dans ce travail d’inoculation.</li>
</ol>

<ol><li>Gordo, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-throughput+sequencing+of+black+pepper+root+transcriptome%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Plant+Biology%22%5BJournal%5D)">High-throughput sequencing of black pepper root transcriptome.</a> BMC Plant Biology. 12 (1), (2012).</li>
<li>Leonian, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+and+fruit+blight+of+Peppers+caused+by+Phytophthora+capsici+sp.+Nov%5BTitle%5D)+AND+%22Phytopathology%22%5BJournal%5D)">Stem and fruit blight of Peppers caused by Phytophthora capsici sp. Nov.</a> Phytopathology. 12 (9), 401-408 (1922).</li>
<li>Ding, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Priming+maize+resistance+by+its+neighbors%3A+Activating+1%2C4-benzoxazine-3-ones+synthesis+and+defense+gene+expression+to+alleviate+leaf+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Plant+Science%22%5BJournal%5D)">Priming maize resistance by its neighbors: Activating 1,4-benzoxazine-3-ones synthesis and defense gene expression to alleviate leaf disease.</a> Frontiers in Plant Science. 6, 830(2015).</li>
<li>Fonseca, C. E. L., Vianda, D. R., Hansen, J. L., Pell, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Associations+among+forage+quality+traits%2C+vigor%2C+and+disease+resistance+in+alfalfa%5BTitle%5D)+AND+%22Crop+Science%22%5BJournal%5D)">Associations among forage quality traits, vigor, and disease resistance in alfalfa.</a> Crop Science. 39 (5), 1271-1276 (1999).</li>
<li>Altier, N. A., Thies, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+resistance+to+Pythium+seedling+disease+in+Alfalfa+using+a+culture+plate+method%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Disease%22%5BJournal%5D)">Identification of resistance to Pythium seedling disease in Alfalfa using a culture plate method.</a> Plant Disease. 79 (4), 341-345 (1995).</li>
<li>Pratt, R. G., Rowe, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+simplified+leaf+inoculation+procedures+for+identification+of+quantitative+resistance+to+Sclerotinia+trifoliorum+in+Alfalfa+seedling%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Disease%22%5BJournal%5D)">Evaluation of simplified leaf inoculation procedures for identification of quantitative resistance to Sclerotinia trifoliorum in Alfalfa seedling.</a> Plant Disease. 82 (10), 1161-1164 (1998).</li>
<li>Hao, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((De+novo+transcriptome+sequencing+of+black+pepper+%28Piper+nigrum+L.%29+and+an+analysis+of+genes+involved+in+phenylpropanoid+metabolism+in+response+to+Phytophthora+capsici%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Genomics%22%5BJournal%5D)">De novo transcriptome sequencing of black pepper (Piper nigrum L.) and an analysis of genes involved in phenylpropanoid metabolism in response to Phytophthora capsici.</a> BMC Genomics. 17 (1), 1-14 (2016).</li>
<li>Dong, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Field+inoculation+and+classification+of+maize+ear+rot+caused+by+Fusarium+verticillioides%5BTitle%5D)+AND+%22Bio-protocol%22%5BJournal%5D)">Field inoculation and classification of maize ear rot caused by Fusarium verticillioides.</a> Bio-protocol. 8 (23), 3099(2018).</li>
<li>English, J. T., Laday, M., Bakonyi, J., Schoelz, J. E., Érsek, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phenotypic+and+molecular+characterization+of+species+hybrids+derived+from+induced+fusion+of+zoospores+of+Phytophthora+capsica+and+Phytophthora+nicotianae%5BTitle%5D)+AND+%22Mycological+Research%22%5BJournal%5D)">Phenotypic and molecular characterization of species hybrids derived from induced fusion of zoospores of Phytophthora capsica and Phytophthora nicotianae.</a> Mycological Research. 103 (8), 1003-1008 (1999).</li>
<li>Chatterjee, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antioxidant+activity+of+some+phenolic+constituents+from+green+pepper+%28Piper+nigrum+L.%29+and+fresh+nutmeg+mace+%28Myristica+fragrans%29%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Antioxidant activity of some phenolic constituents from green pepper (Piper nigrum L.) and fresh nutmeg mace (Myristica fragrans).</a> Food Chemistry. 101 (2), 515-523 (2007).</li>
<li>Pfender, W. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+of+sporangia+and+release+of+zoospores+by+Phytophthora+megasperma+in+soil%5BTitle%5D)+AND+%22Phytopathology%22%5BJournal%5D)">Production of sporangia and release of zoospores by Phytophthora megasperma in soil.</a> Phytopathology. 67 (5), 657-663 (1977).</li>
<li>Nagila, A., Schutte, B. J., Sanogo, S., Idowu, O. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chile+pepper+sensitivity+to+mustard+seed+meal+applied+after+crop+emergence%5BTitle%5D)+AND+%22HortScience%22%5BJournal%5D)">Chile pepper sensitivity to mustard seed meal applied after crop emergence.</a> HortScience. 56 (2), 1-7 (2021).</li>
<li>Lamour, K. H., Stam, R., Jupe, J., Huitema, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+oomycete+broad-host-range+pathogen+Phytophthora+capsica%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Plant+Pathology%22%5BJournal%5D)">The oomycete broad-host-range pathogen Phytophthora capsica.</a> Molecular Plant Pathology. 13 (4), 329-337 (2012).</li>
<li>Hardham, A., Gubler, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polarity+of+attachment+of+zoospores+of+a+root+pathogen+and+pre-alignment+of+the+emerging+germ+tube%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Biology+International+Reports%22%5BJournal%5D)">Polarity of attachment of zoospores of a root pathogen and pre-alignment of the emerging germ tube.</a> Cell Biology International Reports. 14 (11), 947-956 (1990).</li>
</ol>

Dans cette étude, la tête basale a été piquée pour endommager et fournir un système d’inoculation efficace dans la plante de poivre noir. Des pastilles mycéliennes ont ensuite recouvert les trois trous pour retenir l’humidité et permettre à l’agent pathogène de bien infecter la plante. Après l’inoculation, les feuilles sont devenues jaunes et sont tombées et les plantes inoculées sont mortes. Aucune lésion ne s’est développée dans les usines de contrôle. La plupart des gènes exprimés différemment après l’inoculation avec...

Le poivre noir (Piper nigrum L.) est un grimpeur ligneux et l’une des cultures d’épices les plus importantes. Il est connu sous le nom de « roi des épices »1 et est cultivé dans plus de 40 pays et régions d’Asie, d’Afrique et d’Amérique latine. La pourriture des racines de Phytophthora est la maladie la plus dévastatrice du poivre noir et est causée par l’oomycète Phytophthora capsici. Cet agent pathogène infecte également les cucurbitacées, les aubergines, les piments et les tomates 2,3. Avec le poivre noir, une culture entière peut parfois être décimée par cette maladie. L’expansion des zones de plantation de poivre est limitée en raison de l’indisponibilité des variétés résistantes, ce qui a considérablement entravé le développement de l’industrie chinoise du poivre noir. Une inoculation efficace et un système d’échantillonnage précis de Phytophthora capsici sur les plants de poivre noir sont essentiels pour étudier cette interaction plante-pathogène.
L’identification et le dépistage de la résistance dans les ressources en matériel génétique sont la condition fondamentale pour la recherche sur la pathogénicité de l’agent pathogène et la sélection et l’utilisation de variétés résistantes. Une approche largement utilisée consiste à utiliser une variété de méthodes d’identification basées sur les espèces végétales et les groupes d’agents pathogènes. Les méthodes d’identification actuelles comprennent l’identification de la population, l’identification individuelle, l’identification des organes, l’identification des tissus, l’identification cellulaire, l’identification biochimique et l’identification moléculaire, qui ont été développées au cours des dernières années 4,5. Il y a eu du succès dans ces domaines, mais il y a aussi beaucoup de problèmes. Quelle que soit la méthode choisie, les exigences de base de l’identification de la résistance des plantes sont cohérentes, y compris des objectifs clairs, des résultats fiables et des méthodes simples, rapides et faciles à normaliser. Ce principe doit également être suivi dans l’identification de la résistance au poivre noir.
Dans des conditions de terrain naturel, l’identification de la résistance aux maladies peut être influencée par de nombreux facteurs environnementaux. Par conséquent, il a été proposé d’utiliser en laboratoire des feuilles détachées et des racines irriguées pour identifier la résistance aux maladies. Les jeunes feuilles de plantes saines ont été inoculées in vitro en laboratoire, et la surface des feuilles malades a été mesurée en inoculant l’agent pathogène afin d’identifier la résistance aux maladies des plantes6. Cependant, l’inoculation in vitro des feuilles ne peut être utilisée que pour l’identification générale de la résistance et non pour les études d’interaction moléculaire. Malgré cela, le statut de résistance à la maladie se présente souvent dans l’inoculation racinaire irriguée, ce qui entraîne une incertitude dans l’étude de suivi de la sélection moléculaire pour la résistance aux maladies. Par conséquent, des méthodes de détection intérieure rapides et simples sont essentielles. Cette étude vise à fournir une méthode d’identification de la résistance en laboratoire.

<table><tbody><tr><td>Poudre d’agar</td><td>Solarbio</td><td>A8190</td><td></td></tr><tr><td>Banc propre</td><td>Haier</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dextrose</td><td>Xilong Scientific</td><td>15700501</td><td></td></tr><tr><td>Four de stérilisation à haute température</td><td>Zaelway</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Plaques de boîte de Pétri</td><td>Biosharp</td><td>BS-90-D</td><td></td></tr></tbody></table>

une méthode d’inoculation efficace pour phytophthora capsici sur les plantes de poivre noir

An Effective Inoculation Method for Phytophthora capsici on Black Pepper Plants

Piper nigrum L. (poivre noir) est une vigne ligneuse typique qui est une culture d’épices économiquement importante à travers le monde. La production de poivre noir est considérablement affectée par la pourriture des racines causée par Phytophthora capsici, qui a sérieusement influencé le développement de l’industrie en tant que problème de « point d’étranglement ». Cependant, le mécanisme génétique moléculaire de résistance au poivre noir n’est pas clair, ce qui entraîne des progrès lents dans le développement de nouvelles variétés de poivre noir. Une inoculation efficace et un système d’échantillonnage précis de Phytophthora capsici sur les plants de poivre noir sont essentiels pour étudier cette interaction plante-pathogène. L’objectif principal de cette étude est de démontrer une méthodologie détaillée où la tête basale du poivre noir est inoculée avec Phytophthora capsici, tout en fournissant une référence pour l’inoculation des plants de vigne ligneux. La tête basale de la plante de poivre noir a été piquée pour l’endommager, et des granulés de mycélium ont recouvert les trois trous pour retenir l’humidité afin que l’agent pathogène puisse bien infecter la plante. Cette méthode offre un meilleur moyen de résoudre l’instabilité causée par les méthodes d’inoculation traditionnelles, y compris le trempage du sol ou le trempage des racines. Il fournit également un moyen prometteur d’étudier le mode d’action entre les plantes et d’autres agents pathogènes des plantes transmis par le sol dans la sélection de précision agricole.

La figure 1 montre les symptômes des feuilles de poivre noir après l’inoculation de P. capsici . La figure 2 montre les symptômes des tiges de poivre noir après l’inoculation de P. capsici . L’agent pathogène a infecté le poivre noir à la tige basale; les symptômes, y compris le jaunissement des feuilles, l’apparition du flétrissement, le brunissement du xylème et le noircissement progressif des vaisseaux. La figure 3</stro...

Piquer la tête basale de la plante de poivre noir est une méthode brève et rapide pour l’endommager. Ici, nous avons fourni des étapes détaillées avec une vidéo pour infecter les plantes de poivre noir.

Une méthode d’inoculation efficace pour Phytophthora capsici sur les plantes de poivre noir

Piper nigrum L. (black pepper) is a typical woody vine that is an economically important spice crop across the world. Black pepper production is ...

L’expérience suivante introduit une inoculation efficace et une méthode d’échantillonnage précise pour Phytophthora capsici sur des plants de poivre noir. Le poivre noir, qui est une vigne ligneuse typique, est une culture d’épices économiquement importante. La production de poivre noir est principalement affectée par la pourriture des racines causée par Phytophthora capsici, et a sérieusement influencé le développement industriel.Une inoculation efficace et un système d’échantillonnage précis de Phytophthora capsici sur les plants de poivre noir sont importants pour l’étude de l’interaction plante-pathogène. L’objectif principal de cette étude est de démontrer une méthodologie détaillée dans laquelle la tête basale du poivre noir a été inoculée avec Phytophthora capsici, et de fournir également une référence pour l’inoculation des plants de vigne ligneux. Cette méthode offre un meilleur moyen de résoudre l’instabilité apportée par la méthode d’inoculation traditionnelle, telle que le trempage du sol ou le trempage des racines.Procédures expérimentales. Les boutures de poivrons noirs sont plantées dans un environnement contrôlé pendant deux mois. Sous-cultiver le Phytophthora capsici, et incuber pendant cinq jours sous les 25 degrés Celsius.Le jour de l’infection, les blocs de gélose sont recouverts sur les trois trous collés par l’aiguille. Et enfin, caractériser les symptômes de la maladie. Préparation des plants de coupe de poivre noir pour l’infection.Coupez les branches orthotropes en longueurs de 40 centimètres et 0,5 centimètre de diamètre et enlevez les branches plagiotropes aux nœuds inférieurs à l’aide d’un couteau stérile et d’un sécateur. La branche coupée doit contenir deux nœuds et cinq feuilles au sommet pour réduire la perte d’eau. Coupez la partie supérieure à une coupe plate et la partie inférieure à une coupe oblique.Le substrat d’enracinement de la coupe du poivre noir a été préparé en un mélange contenant du sol et du fumier animal, comme de la bouse de vache, de la bouse de mouton, et cetera, dans un rapport de un pour un. Le sol a été autoclavé à environ 121 degrés Celsius pendant 20 minutes. Utilisez les sacs de reproduction de 30 centimètres de diamètre et 50 centimètres de hauteur pour placer les substrats d’enracinement.Préparez une pente de 50 degrés pour remplir les substrats. Les boutures ont été placées à un angle de 50 degrés, avec plus de trois nœuds sous le substrat. Ils ont été recouverts du milieu d’enracinement et la partie auxiliaire doit être collée au milieu.Enfin, les boutures ont été complètement infiltrées. La coupe droite a été adoptée pour insérer la découpe. Préparation des cultures de Phytophthora capsici.Choisissez des pommes de terre exemptes de maladies. Nettoyez les pommes de terre et coupez-les en petits carrés. Placer 200 grammes de pommes de terre dans 800 millilitres d’eau double distillée et faire bouillir pendant 20 minutes.Filtrer ensuite le mélange. Ajouter 20 grammes de dextrose. Remplissez le mélange à un litre avec de l’eau distillée double.Ajouter 15 grammes de poudre d’agar dans le filtrat. Distribuer le support dans des flacons et sceller à l’aide de Parafilm. Autoclavez le milieu à 121 degrés Celsius pendant 20 minutes.Le milieu calculé de la gélose de pomme de terre a été distribué dans les plaques de boîte de Pétri et refroidi sur le banc stérile pour la solidification. L’aiguille d’inoculation a été désinfectée en chauffant à l’aide d’une lampe à combustion d’alcool et en refroidissant pendant plusieurs secondes. Prélever de petits morceaux d’échantillons de champignons en utilisant l’inoculation stérile et les placer sur PDA.Le mycélium recouvre environ les trois quarts de la plaque. Les cultures sont prêtes pour d’autres expériences. Infection des poivrons noirs.L’emplacement à cinq centimètres de la surface du substrat a été considéré comme le point d’incubation. L’emplacement d’incubation ne doit pas être loin de la racine, dans le but d’éviter de prolonger le temps d’infection. Les étapes détaillées de la piqûre d’épingle sont les suivantes.Une pastille de mycélium de Phytophthora capsici a été collectée à l’aide d’un foreur de bouchon. Notamment, les pastilles de mycélium nouvellement développées sur le bord de la plaque ont été choisies de préférence en raison de leurs activités infectieuses plus élevées. Stériliser une tige à l’aide d’éthanol à 75 % et prendre trois pores triangulaires en position stérilisée à l’aide de l’aiguille d’inoculation.Trois pores triangulaires à l’emplacement de l’inoculation ont été coincés à l’aide de l’aiguille d’inoculation, et des pastilles mycéliennes ont été recouvertes sur les trois pores. Après huit heures, les pores sont devenus noirs en général. La dilatation a été élargie avec la prolongation de l’incubation.Après sept à dix jours, les feuilles jaunissent et tombent, jusqu’à ce que le poivre noir meure. Les résultats présentatifs sont les suivants. Après l’infection, les symptômes apparaissent sur les plants de poivre noir, y compris le jaunissement et le flétrissement des feuilles, le brunissement du xylème et le noircissement des vaisseaux.La plupart des gènes exprimés différemment après l’inoculation avec Phytophthora capsici, par rapport au groupe témoin. L’analyse histopathologique des tissus infectés a démontré que Phytophthora capsici colonisait le xylème. Conclusion. Dans cette étude, la piqûre d’épingle de la tête basale a été utilisée pour l’endommager afin de fournir une inoculation efficace, et le système de doublement dans le poivre noir.En attendant, ce protocole représente également un moyen plus efficace de fournir une référence pour l’incubation avec -Notre méthode peut donner plus de temps et fonctionner plus brièvement. Ce protocole fournit de meilleurs résultats, ce qui permet une forte interaction entre une plante et l’agent pathogène transmis par le sol. Ce qui est visible et pratique pour détecter le processus dynamique entre les plantes et leurs agents pathogènes.Dans notre méthode, nous commençons à piquer la tête basale de la plante de poivre noir pour qu’elle les endommage. Ensuite, la zone endommagée est recouverte directement du Phytophthora capsici et maintient l’humidité. Pour que l’agent pathogène puisse infecter la plante.Nous fournissons également un moyen prometteur pour l’étude du mode d’action entre les plantes et d’autres agents pathogènes des plantes transmis par le sol dans la sélection de précision agricole.

an-effective-inoculation-method-for-phytophthora-capsici-on-black

Research

Recherche

JoVE Journal

Genetics

Génétique

Source : Rufián, J. S., et.al. Analyse unicellulaire de l’expression des gènes de Pseudomonas syringae dans les tissus végétaux. J. Vis. Exp. (2022)Cette vidéo démontre une méthode d’infiltration sous vide pour introduire un pathogène bactérien dans les feuilles d’Arabidopsis . L’approche utilise une suspension bactérienne préparée et des impulsions sous vide pour permettre une entrée uniforme à travers les stomates, entraînant une infection foliaire contrôlée.

Inoculation d’un agent pathogène bactérien dans les feuilles d’Arabidopsis par infiltration sous vide

Cette vidéo montre le test d’inhibition de la croissance des plantules chez la plante Arabidopsis thaliana. L’impact d’une concentration accrue d’éliciteur de peptides immunitaires sur la croissance des plantules est déterminé.

Mesure de l’inhibition de la croissance des plantules induite par le système immunitaire

Ce protocole illustre deux méthodes d'inoculation d'introduire le champignon...

Établir entomopathogènes fongiques comme endophytes: Vers un contrôle biologique endophytique

L’utilisation d’une méthode d’injection d’aiguille pour inoculer le maïs et les plantes de teosinte avec l’agent pathogène biotrophic Ustilago maydis est décrite.  La méthode d’inoculation par injection d’aiguille facilite l’administration contrôlée de l’agent pathogène fongique entre les feuilles de la plante où l’agent pathogène pénètre dans la plante par la formation d’apprésoria. Cette méthode est très efficace, permettant des inoculations reproductibles avec U. maydis.

Une méthode rapide et efficace pour évaluer la pathogénicité d’Ustilago maydis sur les lignées de maïs et de téosinte

L’agroinfiltration et l’agroinfection PVX sont des tests fonctionnels de routine pour l’expression ectopique transitoire des gènes dans les plantes. Ces méthodes sont des tests efficaces dans les stratégies effectoromiques (résistance rapide et découverte de gènes avirulence) et cruciales pour la recherche moderne en pathologie moléculaire des plantes. Ils répondent à la demande d’analyses fonctionnelles robustes à haut débit dans les usines.

Agroinfiltration et PVX Agroinfection dans la pomme de terre et Nicotiana benthamiana

La quantification de la croissance des agents pathogènes est un outil puissant pour caractériser diverses réponses immunitaires d’Arabidopsis thaliana (ci-après : Arabidopsis). La méthode décrite ici présente un test d’infiltration à la seringue optimisé pour quantifier le Pseudomonas syringae pv. maculicola Croissance d’ES4326 dans les feuilles adultes d’Arabidopsis.

Bactérienne Feuille Infiltration Essai de caractérisation fine des réponses de défense des plantes à l&#39;aide du<em&gt; Arabidopsis thaliana-Pseudomonas syringae</em&gt; Pathosystème

Nous présentons ici un protocole pour tester la virulence de la plante avec le phytopathogène Magnaporthe grisea. Ce rapport contribuera au dépistage à grande échelle des pathotypes d’isolats de champignons et servir de point de départ idéal pour la compréhension des mécanismes résistants des plantes au cours de la sélection moléculaire.

Le Test de Infection de plantes : Spray et induite par la plaie de l’Inoculation avec la plante pathogène Magnaporthe Grisea

Nous présentons un protocole pour la construction d’un système simple de distribution de spores composé d’une boîte d’inoculation avec un maillage de ~50 μm et une chambre en plastique transparente. Cela peut être utilisé pour inoculer uniformément les plantes avec des spores d’oïdium, permettant ainsi une évaluation précise et reproductible des phénotypes de maladies des plantes à l’étude.

Une méthode d’inoculation simple et flexible pour évaluer avec précision les phénotypes d’oïdium d’Arabidopsis et d’autres plantes

Ce protocole présente un résumé détaillé des stratégies pour inoculer les racines des plantes avec des microbes transmis par le sol. Exemple pour les champignons Verticillium longisporum et Verticillium dahliae, trois systèmes d’infection racinaire différents sont décrits. Les applications potentielles et les analyses en aval possibles sont mises en évidence, et les avantages ou les inconvénients sont discutés pour chaque système.

Stratégies d’inoculation pour infecter les racines des plantes avec des micro-organismes transmis par le sol

Ce protocole présente un système optimisé d’essais biologiques sur feuilles détachées pour évaluer l’efficacité des champignons entomopathogènes (FPE) contre le puceron de la moutarde (Lipaphis erysimi (Kalt.)), un insecte parthénogénétique. La méthode décrit le processus de collecte de données au cours des expériences sur les boîtes de Pétri, ce qui permet aux chercheurs de mesurer de manière cohérente la virulence de l’EPF contre les pucerons de la moutarde et d’autres insectes...

Évaluation de l’effet aphidicide des champignons entomopathogènes contre l’insecte parthénogénétique, le puceron de la moutarde, Lipaphis erysimi (Kalt.)

Un protocole d’essai biologique sur feuilles détachées a été établi pour l’élevage en masse des thrips du piment à l’aide d’une méthode modifiée à feuilles détachées dans des contenants en verre contenant de la gélose, assurant une survie élevée et un développement synchronisé. Ce système permet un dépistage efficace de la virulence des champignons entomopathogènes contre les larvesdu 2e stade et fournit un approvisionnement fiable en thrips pour les évaluations en laboratoire, en serre et sur...

Mise en place d’un système d’élevage de thrips de piment (Scirtothrips dorsalis Hood) pour le dépistage de la virulence des champignons entomopathogènes

Découvrez une méthode d'inoculation efficace pour Phytophthora capsici sur les plants de poivre noir. Cette technique améliore la fiabilité des études d'interaction plante-pathogène par rapport aux méthodes traditionnelles.

Une méthode d’inoculation efficace pour Phytophthora capsici sur les plantes de poivre noir

Explorer plus de vidéos