L’extraction des molécules de glycogène hépatique pour la détermination de la structure du glycogène

Ce protocole permet d’extraire les molécules de glycogène hépatique de manière à préserver leur structure et à limiter la quantité de petites particules de glycogène perdues. Avec des recherches antérieures montrant que le diabète modifie la structure du glycogène, cette méthode pourrait fournir dans l’étude du diabète et des diverses maladies de stockage du glycogène. Pour extraire le glycogène du foie, commencez par transférer un gramme de tissu hépatique congelé dans un tube de 15 millilitres contenant six millilitres de tampon d’isolement de glycogène.

Tout en restant sur la glace, homogénéisez le tissu hépatique à l’aide d’un homogénéisateur tissulaire. Une fois terminé, transférez la moitié ou trois millilitres de la suspension cellulaire dans un nouveau tube, puis faites bouillir pendant 10 minutes. Conservez l’autre moitié de la suspension sur de la glace pour extraire les protéines associées contenant du glycogène qui ne sont pas dénaturées.