Génération et caractérisation de l’infarctus du myocarde ventriculaire droit induit par la ligature permanente de l’artère coronaire droite chez la souris

Le ventriculaire droit est plus résistant à l’ischémie que le ventriculaire gauche. Nous avons introduit une technique pour générer un modèle d’infection ventriculaire droite, qui peut clarifier le mécanisme physiopathologique lors du développement d’un infarctus ventriculaire droit. Nous avons localisé l’artère coronaire droite grâce à l’établissement du coût vasculaire et défini la zone de ligature qui est essentielle pour générer avec succès un modèle d’infarctus ventriculaire droit de la souris.

Linhai Ruo, un médecin de mon laboratoire, fera la démonstration de la procédure. Placez la souris sur un coussinet et assurez-vous de la profondeur de l’anesthésie par l’absence de réponse de retrait des orteils. Fixez ses incisives avec une suture et immobilisez les membres avec du ruban adhésif.

Enlevez les poils du cou au xiphoïde avec une crème dépilatoire. Retirez légèrement la langue avec une pince à épiler, soulevez la mandibule avec un dépresseur de langue pour exposer la glotte. Et effectuez une intubation intra-trachéale en insérant une canule de calibre 22 dans la glotte.

Connectez correctement les électrodes d’électrocardiographie aux membres de la souris et enregistrez l’ECG. Pour ouvrir la poitrine, faites une incision d’un centimètre de long dans la peau, parallèle à la troisième côte droite avec des ciseaux ophtalmiques. Déterminez à nouveau le troisième espace intercostal et assurez-vous d’un espace suffisant en fonction de l’angle du sternum.

Séparez et coupez les muscles pectoraux majeurs et pectoraux mineurs avec des ciseaux et des micro-pinces au-dessus du troisième espace intercostal. Après cela, séparez carrément le muscle intercostal avec une pince coudée pour exposer le champ chirurgical, puis incisez le péricarde. Soulevez l’oreillette droite avec du coton stérile et ligaturez l’artère coronaire droite avec un 8-0 stérile fil de nylon, avec une plage de ligature de trois à cinq millimètres.

Après avoir ligaturé l’artère coronaire droite, notez le plomb ECG de surveillance 3, montrant une élévation du segment ST. Retirez le coton et les muscles de suture et la peau avec un fil de nylon stérile 5-0. Placez ensuite la souris sur le coussin chauffant pour favoriser la récupération.

Placez la souris en position couchée sur une plate-forme à ultrasons pour la fixation des animaux et le fonctionnement par ultrasons. Collez ses griffes à l’électrode pour obtenir un enregistrement ECG, grâce à un système attaché à la machine à ultrasons. Retirez les poils de la poitrine de la souris avec une crème dépilatoire et appliquez un gel à ultrasons sur la peau de la poitrine.

Réglez la plate-forme sur la position horizontale. Orientez le transducteur parallèlement à la jambe gauche et obtenez l’image du long axe ventriculaire gauche. Faites pivoter la sonde de 90 degrés dans le sens des aiguilles d’une montre pour obtenir la vue d’accès court du ventricule gauche.

Appuyez sur le bouton cine store pour enregistrer les images. Inclinez le coin supérieur gauche de la plate-forme au point le plus bas. Descendez le transducteur verticalement, en maintenant sa position sur le haut de l’abdomen et sous le diaphragme de la souris en mode B.

Ajustez légèrement la position de la plate-forme en faisant pivoter ses axes X et Y jusqu’à ce que le ventricule droit, l’oreillette droite, l’oreillette gauche et le ventricule gauche soient visibles à l’écran. Et enregistrez l’image en appuyant sur le bouton cine store ou frame. Appuyez sur M-Mode.

Après l’apparition des deux lignes d’indicateur X, localisez la ligne d’indicateur à l’orifice de la valve tricuspide, pour obtenir le mouvement du plan annuel tricuspide. Appuyez à nouveau sur M-Mode. Appuyez sur le bouton du magasin de cinés ou du magasin de cadres pour enregistrer des données et des images.

Inclinez le côté gauche de la plate-forme au point le plus bas. Placez la sonde à un angle de 30 degrés par rapport à l’axe horizontal le long de la ligne axillaire antérieure droite. Faites pivoter les axes X et Y de la plate-forme pour afficher le ventricule droit.

Appuyez sur le bouton M-Mode et localisez la ligne d’indicateur au point hyperéchoïque du septum pour obtenir l’image M-Mode de l’interface ventricule droite. Appuyez à nouveau sur le bouton M-Mode. Appuyez sur le bouton du magasin de cinés pour enregistrer l’image.

Effectuez une intubation trachéale et réglez le paramètre du ventilateur animal. Faites une incision bilatérale d’un centimètre sur la peau au-dessus du processus xiphoïde et transectez le diaphragme et la côte avec des ciseaux ophtalmiques pour exposer le cœur. Perforez la paroi libre ventriculaire droite avec une aiguille de calibre 32.

Retirez l’aiguille et appuyez sur la plaie avec du coton pour éviter les saignements. Insérez l’extrémité du cathéter dans le ventricule droit à travers le site de ponction et poussez le cathéter vers l’avant, lentement. Ajustez la position de la pointe pour obtenir une forme d’onde de pression typique du VR, affichée sur un moniteur et un système d’enregistrement.

Après 10 minutes de stabilisation, enregistrez les données de la pression artérielle systolique du VR, de la pression et de la pression diastolique du VR et de la pression ventriculaire droite maximale du VR augmentant le taux décroissant. Cliquez sur le bouton de sélection pour sélectionner les cycles cardiaques à calculer. Et puis cliquez sur le bouton analysé pour calculer les valeurs moyennes des cycles sélectionnés.

Placez l’animal en décubitus dorsal sur le coussinet et intubez-le pour la ventilation artificielle. Ouvrez la poitrine avec des ciseaux chirurgicaux et exposez le cœur. Faites une encoche de trois millimètres avec des ciseaux ophtalmiques sur les oreillettes droites et perfuser le cœur avec 5 ml de solution saline normale à travers l’apex cardiaque avec un injecteur.

Bloquez le sang de l’aorte avec une pince aortique. Et perfuser 0,1 mL de 1 mg / mL de nitroglycérine, à travers l’apex cardiaque avec un injecteur pour dilater l’artère coronaire. Perfuser le cœur avec un réactif coulé de 1 mL à travers l’apex cardiaque et attendre deux à trois heures.

Éroder le cœur avec de l’hydroxyde de sodium à 50% pendant deux à trois jours. Et enlevez le tissu musculaire ou le tissu conjonctif en rinçant avec une solution saline normale. Après la ligature RCA, une élévation du segment ST a été observée dans le plomb 3 de l’ECG.

La coloration chlorée de 2, 3, 5-triphényltétrazolium a montré que la zone d’infarctus représente 45% de la paroi sans VR, 24 heures après l’opération. L’échocardiographie a montré que la dimension interne du VR à l’extrémité de la diastole augmentait dans le RV1. Et c’était plus de deux fois dans le groupe Sham.

Le raccourcissement de la fraction RV, la fraction d’éjection RV et l’excursion systolique du plan annulaire tricuspide étaient significativement plus petits dans le RVI. Le rapport RV par zone LV a augmenté d’environ 50% La mesure hémodynamique RV a montré que dans le groupe RVI, la pression artérielle systolique ventriculaire droite, le taux de hausse maximal et minimal de la pression RV, la contractilité RV, étaient significativement plus petits. La pression ventriculaire et diastolique droite et la constante de temps exponentielle de l’indice de relaxation RV étaient considérablement plus significatives que celles du groupe Sham.

Un anévrisme du VR était visible dans la zone infarctuse. Le rapport poids cardiaque/poids corporel et rapport poids cardiaque/longueur du tibia dans le groupe RVI étaient légèrement plus importants. La coloration masson a indiqué une fibrose importante dans la paroi sans VR.

Et rarement, la fibrose s’est produite dans le septum du groupe RVI. En revanche, quelques cardiomyocytes survivants se trouvaient dans la région de l’infarctus. Il est crucial d’exposer la zone de ligature et de saisir la profondeur et la portée de l’aiguille insérée pour augmenter le succès et les taux de survie.