Un modèle fiable de lambeau fascio-cutané porcin pour les études de bio-ingénierie des allogreffes composites vascularisées

Le présent protocole décrit le modèle du lambeau fascio-cutané porcin et son utilisation potentielle dans la recherche sur les tissus composites vascularisés.

Notre protocole décrit les lambeaux fasciocutanés de l’événement clinique chez le porc. Le principal avantage de cette technique est la fiabilité de la vascularisation cutanée. La technique chirurgicale fournit un outil approprié pour étudier les avions composites vascularisés dans la perfusion mécanique, l’ingénierie tissulaire et l’immunologie dans un grand modèle animal.

Pour commencer, palpez le pouls de l’artère saphène, qui devrait être d’environ trois largeurs de doigts médiales de la rotule, et marquez-la. Identifiez et tracez les limites du rabat. La limite supérieure est un accès parallèle au pli inguinal, trois centimètres en dessous.

Et la limite latérale est un axe allant de l’épine iliaque antérieure supérieure à la partie médiale de la rotule. Dessinez un rabat ovale de 10 centimètres de diamètre, centré sur le pédicule saphène et contenu dans les limites du rabat indiquées. Faites une incision cutanée de huit centimètres à la partie distale du pédicule sur le repère du lambeau.

Ouvrez le fascia et disséquez émoussé pour exposer l’artère saphène et ses deux veines comitantes. Effectuez une double ligature et séparez-la en un seul paquet. Inciser la peau restante du lambeau avec une lame.

Utilisez la cautérisation pour ouvrir le tissu sous-cutané et le fascia environnant. À l’aide de pinces bipolaires, effectuez une hémostase approfondie. Pour éviter la traction accidentelle et la perturbation des vaisseaux perforants, fixez le composant cutané du volet au fascia sous-jacent avec trois sutures zéro non résorbables.

Libérez le lambeau du gracilis en disséquant le fascia loin du muscle. Continuez la dissection pédiculaire en suivant les vaisseaux saphènes le long des vaisseaux fémoraux. Effectuer une incision perpendiculaire reliant le pli inguinal à la partie proximale du lambeau.

Faites une incision de 12 centimètres dans le pli inguinal. Soulevez la peau de connexion et ouvrez la couche sous-cutanée. Squelettiser les vaisseaux fémoraux et les léguer distalement à la branche saphène en deux faisceaux séparés.

Poursuivre la dissection des vaisseaux fémoraux de distal à proximal jusqu’à atteindre le niveau du ligament inguinal. Séparez l’artère fémorale de la veine et isolez-les avec des élastiques en caoutchouc. Pour récolter le deuxième volet saphène, répétez tout le processus pour le membre postérieur controlatéral.

Injectez à l’animal 100 unités par kilogramme d’héparine intraveineuse cinq minutes avant de passer à l’étape suivante. Légater le pédicule fémoral aussi proximal que possible au ligament inguinal et séparer le lambeau du porc donneur. Dilater les extrémités du vaisseau fémoral et insérer un angiocathéter de calibre 20 dans l’artère et la veine.

Utilisez trois attaches de soie zéro pour fixer le cathéter aux vaisseaux. Rincer lentement l’artère des lambeaux fasciocutanés avec 10 millilitres de solution saline d’héparine de 100 unités par millilitre jusqu’à ce qu’un écoulement veineux clair soit observé. Au total, 14 volets fasciocutanés saphènes ont été récoltés dans le cadre de cette étude.

Le temps moyen d’approvisionnement des volets était de 47 minutes. Les diamètres moyens des artères et des veines étaient respectivement de 2,25 millimètres et 3,56 millimètres. Enfin, la longueur moyenne du pédicule était de 10,8 centimètres Après chaque récolte de lambeaux, une angiographie FCF a été réalisée par injection intra-artérielle de 10 millimètres de produit de contraste immédiatement après le rinçage de la solution saline à l’héparine.

Cette étape a permis d’évaluer la vascularisation de la palette cutanée. La chose la plus importante à retenir est d’attacher parfaitement la composante cutanée du lambeau au fascia sous-jacent pour éviter toute perturbation des vaisseaux perforants. Cette description précise de la technique d’approvisionnement fiable et reproductible des volets offre un outil précieux pour les études de bio-ingénierie VCA chez le porc.