Construction de microélectrodes de potentiel de champ local pour des enregistrements in vivo à partir de plusieurs structures cérébrales simultanément

Les chercheurs ont souvent besoin d’enregistrer les potentiels de champs locaux de plusieurs structures en même temps. Notre conception facile en microélectrodes nous permet d’enregistrer simultanément des LFP à partir de plusieurs structures cérébrales à différentes profondeurs. Les microélectrodes disponibles dans le commerce manquent souvent de flexibilité et ne permettent pas d’enregistrer à partir de plusieurs structures cérébrales.

Notre conception en microélectrode permet de modifier facilement la construction pour s’adapter à n’importe quelle structure souhaitée. Commencez par prendre un fil de nickel-chrome recouvert de dianal de 50 micromètres de diamètre. Collez une extrémité du fil à l’arrière de la plate-forme et enroulez le fil trois fois autour du bouton le plus proche de la plate-forme.

Étirez le fil autour du deuxième bouton le plus éloigné pour faire deux boucles entre les boutons. Enroulez le fil trois fois de plus autour du premier bouton pour fixer le fil en place et collez l’extrémité à l’arrière de la plate-forme. Placez les barres de tension sous les fils avec le ruban adhésif enroulé autour d’eux.

À l’aide d’un microscope et de pinces fines, faites soit un espace de trois millimètres entre les fils pour fabriquer des microélectrodes corticales, ventrales-latérales et thalamiques, soit un espace de 4,5 millimètres pour fabriquer des microélectrodes striatales-nidrales. Si le grossissement est utilisé sur le microscope, assurez-vous de calculer et d’ajuster la différence de grossissement et la distance réelle entre les fils. Coupez quatre petits morceaux de plastique de 0,5 millimètre d’épaisseur d’environ six millimètres de largeur et trois millimètres de hauteur.

Appliquez de la colle sur le plastique. Placez les morceaux de plastique à environ un centimètre du milieu du fil, qui est à un centimètre de la barre de tension. Enlevez l’excès de colle avec un coton-tige.

Une fois la colle sèche, coupez le fil à l’aide de ciseaux fins. Coupez quatre tubes de verre de sept millimètres à l’aide d’un kit disponible dans le commerce et insérez le fil d’électrode dans les tubes en verre. Placez la colle à la base des tubes de verre pour les connecter au plastique.

Attendez que la colle sèche, puis coupez les tubes et les fils de verre à l’aide d’un scalpel. Utilisez de la super colle pour fixer les plastiques dans l’ordre souhaité des régions cibles. Appliquez de la résine époxy autour du plastique pour lier les électrodes ensemble.

Prenez un fil épais et faites une boucle à une extrémité, trempez la boucle dans la solution époxy et placez-la sur le plastique, en vous assurant que le fil épais est à plat afin que ce fil puisse être utilisé comme poignée. Coupez le fil à deux centimètres. Regroupez les fils et grattez un millimètre des extrémités isolées avec un scalpel.

Pliez les électrodes corticales et séparez les fils. À l’aide de pinces fines, faites une boucle à l’extrémité de chaque fil. Tenez un casque à 10 broches avec un hémostat et utilisez l’extrémité en bois d’un coton-tige pour appliquer un minimum de flux sur les broches.

À l’aide de l’extrémité en bois du coton-tige, appliquez un flux sur les boucles de fil. Soudez les boucles de fil au casque à 10 broches. Séchez le casque pour éviter les courts-circuits entre les broches.

Prenez un fil mince d’environ 0,05 à 0,008 pouce pour référence et des fils de terre et retirez le plastique d’une extrémité. Faites une boucle à l’autre extrémité du fil. Souder le côté dénudé des fils de référence et de terre à leurs broches respectives.

En tenant le fil épais, appliquez du ciment de cranioplastie autour des microélectrodes, en particulier là où les fils se connectent aux broches. Évitez de toucher les extrémités de l’électrode avec le ciment. Une fois le ciment séché, placez de la résine époxy à la base des tubes de verre, des fils de microélectrode striatale et autour de toute l’électrode.

Évitez de toucher les extrémités de l’électrode avec de la résine époxy. Des enregistrements de potentiel de champ local ont été effectués à partir du cortex prémoteur droit, du VL gauche, du striatum et du SNR. Le début de la crise a été identifié comme une déviation de la trace de tension au moins deux fois la ligne de base.

Le diagramme du spectre de puissance montre la distribution de fréquence pour les enregistrements de potentiel local enregistrés. Les latences d’apparition des crises ont pu être comparées entre chaque structure avec une précision de l’ordre de la milliseconde. Une impulsion de courant a été appliquée à la fin des enregistrements pour marquer et confirmer l’emplacement des extrémités des électrodes formant la lésion.

Si les microélectrodes sont construites pour différentes structures cérébrales, n’oubliez pas de modifier les espaces entre les fils en fonction des coordonnées stéréotaxiques de la structure souhaitée. Placez les électrodes de structure profonde dans les tubes de verre et ajustez les longueurs des microélectrodes. Ensuite, fixez les plastiques dans l’ordre requis.