Name: Microscopie subcellulaire intravitale de la glande mammaire (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-06-24T14:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 14 s
Description: Découvrez l'imagerie intravitale de la glande mammaire lactante chez la souris par microscopie confocale et multiphoton. Cette méthode permet de visualiser en temps réel la dynamique des gouttelettes lipidiques et la morphologie glandulaire.

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<ol><li>Scheele, C. L. G. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identity+and+dynamics+of+mammary+stem+cells+during+branching+morphogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Identity and dynamics of mammary stem cells during branching morphogenesis.</a> Nature. 542 (7641), 313-317 (2017).</li>
<li>Dawson, C. A., Mueller, S. N., Lindeman, G. J., Rios, A. C., Visvader, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravital+microscopy+of+dynamic+single-cell+behavior+in+mouse+mammary+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Intravital microscopy of dynamic single-cell behavior in mouse mammary tissue.</a> Nature Protocols. 16 (4), 1907-1935 (2021).</li>
<li>Kedrin, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravital+imaging+of+metastatic+behavior+through+a+mammary+imaging+window%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Intravital imaging of metastatic behavior through a mammary imaging window.</a> Nature Methods. 5 (12), 1019-1021 (2008).</li>
<li>Ewald, A. J., Werb, Z., Egeblad, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic%2C+long-term+in+vivo+imaging+of+tumor-stroma+interactions+in+mouse+models+of+breast+cancer+using+spinning-disk+confocal+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harbor+Protocols%22%5BJournal%5D)">Dynamic, long-term in vivo imaging of tumor-stroma interactions in mouse models of breast cancer using spinning-disk confocal microscopy.</a> Cold Spring Harbor Protocols. (2), (2011).</li>
<li>Ellenbroek, S. I. J., van Rheenen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+hallmarks+of+cancer+in+living+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Cancer%22%5BJournal%5D)">Imaging hallmarks of cancer in living mice.</a> Nature Reviews Cancer. 14 (6), 406-418 (2014).</li>
<li>Dawson, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-resident+ductal+macrophages+survey+the+mammary+epithelium+and+facilitate+tissue+remodelling%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Tissue-resident ductal macrophages survey the mammary epithelium and facilitate tissue remodelling.</a> Nature Cell Biology. 22 (5), 546-558 (2020).</li>
<li>Ebrahim, S., Weigert, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravital+microscopy+in+mammalian+multicellular+organisms%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Intravital microscopy in mammalian multicellular organisms.</a> Current Opinion in Cell Biology. 59, 97-103 (2019).</li>
<li>Masedunskas, A., Weigert, R., Mather, I. H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMasedunskas%2C+A+%22Advances+in+Intravital+Microscopy%22">Advances in Intravital Microscopy</a>. Weigert, R. , Weigert) Springer-Verlag. Netherlands. 187-204 (2014).</li>
<li>Masedunskas, A., Chen, Y., Stussman, R., Weigert, R., Mather, I. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kinetics+of+milk+lipid+droplet+transport%2C+growth%2C+and+secretion+revealed+by+intravital+imaging%3A+lipid+droplet+release+is+intermittently+stimulated+by+oxytocin%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Biology+of+the+Cell%22%5BJournal%5D)">Kinetics of milk lipid droplet transport, growth, and secretion revealed by intravital imaging: lipid droplet release is intermittently stimulated by oxytocin.</a> Molecular Biology of the Cell. 28 (7), 935-946 (2017).</li>
<li>Stevenson, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiscale+imaging+of+basal+cell+dynamics+in+the+functionally-mature+mammary+gland%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Multiscale imaging of basal cell dynamics in the functionally-mature mammary gland.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 117 (43), 26822-26832 (2020).</li>
<li>Shan, S., Sorg, B., Dewhirst, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+rodent+mammary+window+of+orthotopic+breast+cancer+for+intravital+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Microvascular+Research%22%5BJournal%5D)">A novel rodent mammary window of orthotopic breast cancer for intravital microscopy.</a> Microvascular Research. 65 (2), 109-117 (2003).</li>
<li>Zomer, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brief+report%3A+Intravital+imaging+of+cancer+stem+cell+plasticity+in+mammary+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Brief report: Intravital imaging of cancer stem cell plasticity in mammary tumors.</a> Stem Cells. 31 (3), 602-606 (2013).</li>
<li>Harper, K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanism+of+early+dissemination+and+metastasis+in+Her2%2B+mammary+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Mechanism of early dissemination and metastasis in Her2+ mammary cancer.</a> Nature. 540 (7634), 588-592 (2016).</li>
<li>Burgoyne, R. D., Duncan, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Secretion+of+milk+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Mammary+Gland+Biology+and+Neoplasia%22%5BJournal%5D)">Secretion of milk proteins.</a> Journal of Mammary Gland Biology and Neoplasia. 3 (3), 275-286 (1998).</li>
<li>Monks, J., Neville, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Albumin+transcytosis+across+the+epithelium+of+the+lactating+mouse+mammary+gland%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Physiology+London%22%5BJournal%5D)">Albumin transcytosis across the epithelium of the lactating mouse mammary gland.</a> Journal of Physiology London. 560, 267-280 (2004).</li>
<li>Boisgard, R., Chanat, E., Lavialle, F., Pauloin, A., Ollivier-Bousquet, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Roads+taken+by+milk+proteins+in+mammary+epithelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Livestock+Production+Science%22%5BJournal%5D)">Roads taken by milk proteins in mammary epithelial cells.</a> Livestock Production Science. 70 (1-2), 49-61 (2001).</li>
<li>Green, K. A., Lund, L. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ECM+degrading+proteases+and+tissue+remodelling+in+the+mammary+gland%5BTitle%5D)+AND+%22Bioessays%22%5BJournal%5D)">ECM degrading proteases and tissue remodelling in the mammary gland.</a> Bioessays. 27 (9), 894-903 (2005).</li>
<li>Lund, L. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two+distinct+phases+of+apoptosis+in+mammary+gland+involution%3A+proteinase-independent+and+-dependent+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Two distinct phases of apoptosis in mammary gland involution: proteinase-independent and -dependent pathways.</a> Development. 122 (1), 181-193 (1996).</li>
<li>Abe, T., Fujimori, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reporter+mouse+lines+for+fluorescence+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Develoment+Growth+and+Differentiation%22%5BJournal%5D)">Reporter mouse lines for fluorescence imaging.</a> Develoment Growth and Differentiation. 55 (4), 390-405 (2013).</li>
<li>Hadjantonakis, A. K., Gertsenstein, M., Ikawa, M., Okabe, M., Nagy, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generating+green+fluorescent+mice+by+germline+transmission+of+green+fluorescent+ES+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Mechanisms+of+Development%22%5BJournal%5D)">Generating green fluorescent mice by germline transmission of green fluorescent ES cells.</a> Mechanisms of Development. 76 (1-2), 79-90 (1998).</li>
<li>Mazumdar, M. D., Tasic, B., Miyamichi, K., Li, L., Luo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+global+double-fluorescent+Cre+reporter+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Genesis%22%5BJournal%5D)">A global double-fluorescent Cre reporter mouse.</a> Genesis. 45 (9), 593-605 (2007).</li>
<li>Fostering litters. The Jackson Laboratory. , Available from: 
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<li>Yang, H. -J., Hsu, C. -L., Yang, J. -Y., Yang, W. -Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monodansylpentane+as+a+blue-fluorescent+lipid-droplet+marker+for+multi-color+live-cell+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Monodansylpentane as a blue-fluorescent lipid-droplet marker for multi-color live-cell imaging.</a> PloS One. 7 (3), 32693(2012).</li>
<li>Ebrahim, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+polyhedral+actomyosin+lattices+remodel+micron-scale+curved+membranes+during+exocytosis+in+live+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Dynamic polyhedral actomyosin lattices remodel micron-scale curved membranes during exocytosis in live mice.</a> Nature Cell Biology. 21 (8), 933-939 (2019).</li>
<li>Meyer, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+predictive+3D+multi-scale+model+of+biliary+fluid+dynamics+in+the+liver+lobule%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Systems%22%5BJournal%5D)">A predictive 3D multi-scale model of biliary fluid dynamics in the liver lobule.</a> Cell Systems. 4 (3), 277-290 (2017).</li>
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<li>Mather, I. H., Masedunskas, A., Chen, Y., Weigert, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Symposium+review%3A+Intravital+imaging+of+the+lactating+mammary+gland+in+live+mice+reveals+novel+aspects+of+milk-lipid+secretion%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Dairy+Science%22%5BJournal%5D)">Symposium review: Intravital imaging of the lactating mammary gland in live mice reveals novel aspects of milk-lipid secretion.</a> Journal of Dairy Science. 102 (3), 2760-2782 (2019).</li>
<li>Caspi, A., Granek, R., Elbaum, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+diffusion+in+active+intracellular+transport%5BTitle%5D)+AND+%22Physical+Review+Letters%22%5BJournal%5D)">Enhanced diffusion in active intracellular transport.</a> Physical Review Letters. 85, 5655-5658 (2000).</li>
<li>Zipfel, W. R., Williams, R. M., Webb, W. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonlinear+magic%3A+multiphoton+microscopy+in+the+biosciences%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Nonlinear magic: multiphoton microscopy in the biosciences.</a> Nature Biotechnology. 21 (11), 1369-1377 (2003).</li>
<li>Weigert, R., Porat-Shliom, N., Amornphimoltham, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+cell+biology+in+live+animals%3A+Ready+for+prime+time%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Imaging cell biology in live animals: Ready for prime time.</a> Journal of Cell Biology. 201 (7), 969-979 (2013).</li>
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<li>Ewald, A. J., Werb, Z., Egeblad, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+of+vital+signs+for+long-term+survival+of+mice+under+anesthesia%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harbor+Protocols%22%5BJournal%5D)">Monitoring of vital signs for long-term survival of mice under anesthesia.</a> Cold Spring Harbor Protocols. 2011 (2), 5563(2011).</li>
<li>Ewald, A. J., Werb, Z., Egeblad, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+mice+for+long-term+intravital+imaging+of+the+mammary+gland%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harbor+Protocols%22%5BJournal%5D)">Preparation of mice for long-term intravital imaging of the mammary gland.</a> Cold Spring Harbor Protocols. 2011 (2), 5562(2011).</li>
<li>Nishinakagawa, H., Mochizuki, K., Nishida, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+blood+supply+to+the+mammary+glands+of+the+mouse%2C+rat%2C+hamster+and+guinea-pig%5BTitle%5D)+AND+%22Japanese+Journal+of+Zoological+Science%22%5BJournal%5D)">On the blood supply to the mammary glands of the mouse, rat, hamster and guinea-pig.</a> Japanese Journal of Zoological Science. 39 (7), 283-291 (1968).</li>
<li>Parslow, A., Cardona, A., Bryson-Richardson, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sample+drift+correction+following+4D+confocal+time-lapse+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Sample drift correction following 4D confocal time-lapse imaging.</a> Journal of Visualized Experiments. (86), e51086(2014).</li>
<li>Palade, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracellular+aspects+of+the+process+of+protein+synthesis%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Intracellular aspects of the process of protein synthesis.</a> Science. 189 (4200), 347-358 (1975).</li>
<li>Heald, C. W., Saacke, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytological+comparison+of+milk+protein+synthesis+of+rat+mammary+tissue+in+vivo+and+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Dairy+Science%22%5BJournal%5D)">Cytological comparison of milk protein synthesis of rat mammary tissue in vivo and in vitro.</a> Journal of Dairy Science. 55 (5), 621-628 (1972).</li>
<li>Hunziker, W., Kraehenbuhl, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epithelial+transcytosis+of+immunoglobulins%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Mammary+Gland+Biology+and+Neoplasia%22%5BJournal%5D)">Epithelial transcytosis of immunoglobulins.</a> Journal of Mammary Gland Biology and Neoplasia. 3 (3), 287-302 (1998).</li>
<li>Messal, H. A., van Rheenen, J., Scheele, C. L. G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+intravital+microscopy+toolbox+to+study+mammary+gland+dynamics+from+cellular+level+to+organ+scale%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Mammary+Gland+Biology+and+Neoplasia%22%5BJournal%5D)">An intravital microscopy toolbox to study mammary gland dynamics from cellular level to organ scale.</a> Journal of Mammary Gland Biology and Neoplasia. 26 (1), 9-27 (2021).</li>
<li>Teter, B. B., Sampugna, J., Keeney, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Milk+fat+depression+in+C57Bl%2F6J+mice+consuming+partially+hydrogenated+fat%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Nutrition%22%5BJournal%5D)">Milk fat depression in C57Bl/6J mice consuming partially hydrogenated fat.</a> Journal of Nutrition. 120 (8), 818-824 (1990).</li>
<li>Russell, T. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transduction+of+the+mammary+epithelium+with+adenovirus+vectors+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Virology%22%5BJournal%5D)">Transduction of the mammary epithelium with adenovirus vectors in vivo.</a> Journal of Virology. 77 (10), 5801-5809 (2003).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>488 laser</td><td>Melles-Griot-CW</td><td></td>&<td>nbsp ; laser 50 mW</td></tr><tr><td>60x Objectif à immersion dans l’huile PLAPON (NA 1.42)</td><td>Olympus</td><td>1-U2B933</td><td>Lentille Microscope confocal</td></tr><tr><td>633 laser</td><td>Melles-Griot-CW</td><td></td> <td>He-Ne laser 12 mW</td></tr><tr><td>63x objectif (NA 1.40, HC PL APO CS2)</td><td>Leica</td><td>11506350</td><td>Lens Microscope à deux photons</td></tr><tr><td>BA 410-460 nm</td><td>Chroma</td><td>-</td><td>Filtre passe-bande</td></tr><tr><td>BA 495-540 nm</td> <td>Filtre passe-bande</td><td>Chroma</td><td></td></tr> <tr><td>BA 505-605 nm</td> <td>Filtre passe-bande</td><td>chromatique</td><td></td></tr> <tr><td>BA 655-755 nm</td> <td>Filtre passe-bande</td><td></td> <td>chroma-dipyrrométhane</td></tr> <tr><td>(BODIPY) 665/676</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>B3932</td><td>Capteur de peroxythérapie lipidique</td></tr><tr><td>Carbomer-940</td><td>Snowdrift Farm</td><td>739601480651</td><td></td></tr><tr><td>Cathéter</td> Gel <td>Terumo</td><td>SV27EL</td><td>Sets de perfusion à ailettes&nbsp ;</td></tr><tr><td>Cautériseur</td><td>Braintree Scientific, Inc</td><td>GEM 5917</td><td>Système de cautère</td></tr><tr><td>CMV-Cre souris&nbsp ;</td><td>Jackson lab</td><td>006054</td><td>Ligne de souris</td></tr><tr><td>Coverslip</td><td>Bioptechs-30mm</td><td></td> <td>de diamètre coverlip pour microscope inversé</td></tr><tr><td>Curity 4x4 inch tout usage gaze éponge</td><td>Covidien</td><td>9024</td><td>Éponge</td></tr><tr><td>EGFPcyto souris</td><td>Jackson lab</td><td>003291</td><td>Ligne de souris</td></tr><tr><td>Fiji/ImageJ software</td> Open <td>source-Free</td><td></td> <td>software tool</td></tr><tr><td>Pince fine</td><td>Braintree Scientific, Inc</td><td>FC003 8</td><td>Pince à tissus</td></tr><tr><td>Microscope Fluoview 1000 Olympus</td><td></td><td>FV1000</td><td>Microscope confocal</td></tr><tr><td>Logiciel FluoView</td> <td>Microscope confocal Olympus-Microscope et microscope à deux photons</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>Rasoir électrique portatif</td><td>Braintree Scientific, Inc</td><td>CLP-8786-451A</td><td>Tondeuse sans fil</td></tr><tr><td>Coussin chauffant</td><td>Braintree Scientific, Inc</td><td></td><td>DPIP Coussin chauffant pour animaux</td></tr><tr><td>Détecteurs HyD Détecteur</td> <td>spectral Leica-Leica 4Tune</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>Logiciel Imaris Bitplane</td><td>/ Oxford instruments-Commercial</td><td></td> <td>Outil logiciel</td></tr><tr><td>Ingisht X3 Laser accordable Spectra</td><td>Physics</td><td>Insight X3</td><td>Laser à impulsions accordables</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>VetOne</td><td>13985-046-40</td><td>Anesthésique</td></tr><tr><td>kétamine&nbsp ;</td><td>VetOne</td><td>13985-702-10</td><td>Anesthésique</td></tr><tr><td>LAS X Logiciel</td><td>Leica-Microscope</td><td></td> à <td>deux photons Outil logiciel</td></tr><tr><td>Mai-Tai Laser accordable Spectra</td><td>Physics</td><td>Mai-Tai</td><td>Laser</td></tr><tr><td>MetaMorph</td><td>Molecular</td> <td>Devices-Commercial</td> <td>Outil logiciel</td></tr><tr><td>Monodansylpentane AUTODOT</td><td>Abcepta</td><td>Sm1000a</td><td>Colorant pour gouttelettes lipidiques</td></tr><tr><td>MPE-RS microscope</td><td>Olympus</td><td>IX70</td><td>Microscope à deux photons</td></tr><tr><td>souris mT/mG</td><td>Jackson lab</td><td>007676</td><td>Ligne de souris</td></tr><tr><td>Chauffage</td><td>d’objectif Bioptechs</td><td>150819</td><td>Chauffage d’objectif pour microscopes confocaux et à deux photons</td></tr><tr><td>Chambre respiratoire saturée d’oxygène</td><td>Patterson Scientific</td><td>78933385, SAS3 et EVAC4</td><td>Système d’anesthésie et d’évacuation gazeuse&nbsp ;</td></tr><tr><td>Parafilm</td><td>Heathrow Scientific</td><td>HS234526B</td> Détecteur PMT <td>à film thermoplastique semi-transparent, flexible</td></tr><tr><td></td><td>Olympus-Descanned</td><td></td><td>&nbsp ; &nbsp ; détecteurs</td></tr><tr><td>Détecteur PMT</td><td>LSM-Technology</td><td>Détecteurs non désançonnés</td><td>fabriqués sur mesure</td></tr><tr><td>Pompe</td><td>Harvard Appareil</td><td>703602, 704402</td><td>Injecteur et contrôleur Nanomite</td></tr><tr>Qualité<td>Saline</td><td>Biologique</td><td>114-055-721EA</td><td>Saline normale</td></tr><tr><td>Ciseaux tranchants à bout émoussé</td><td>Braintree Scientific, Inc</td><td>SCT-S 508</td><td>Ciseaux</td></tr> <tr><td>chirurgicauxSeringue</td><td>Covidien</td><td>22-257-150</td><td>Seringue à tuberculine 1mL</td></tr><tr><td>TCS SP8 Microscope spectral de plongée</td><td>Leica</td><td>SP8</td><td>Microscope à deux photons</td>Pince</tr> à <tr><td>épiler&nbsp ;</td><td>Braintree Scientific, Inc</td><td>FC032</td><td>Pince à tissus</td></tr><tr><td>Xylazine&nbsp ;</td><td>VetOne</td><td>13985-704-10</td><td>Anesthésique</td></tr></tbody></table>

microscopie subcellulaire intravitale de la glande mammaire

Intravital Subcellular Microscopy of the Mammary Gland

Le lait est sécrété par des cellules épithéliales alvéolaires polarisées, qui se différencient pendant la grossesse à partir des bourgeons d’un arbre ductulaire étendu26 (Figure 2A). Les précurseurs de la synthèse du lait sont assimilés à travers les membranes basales/latérales et les produits finis sont sécrétés à travers la surface apicale dans un « espace laitier » central. La face basale de chaque alvéole est recouverte d’un réseau stellaire de cellules myoépithél...

Microscopie subcellulaire intravitale de la glande mammaire

The mammary gland constitutes a model par excellence for investigating epithelial functions, including tissue remodeling, cell polarity, and secretory ...

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Biologie

Imagerie time-lapse est utilisé pour évaluer le comportement des principaux pré-néoplasiques des cellules épithéliales mammaires issues de modèles de souris génétiquement modifiées de risque de cancer du sein afin de déterminer s'il existe des corrélations entre certains paramètres comportementaux et génétiques distinctes des lésions.

Imagerie time-lapse de primaires prénéoplasiques cellules épithéliales mammaires issues de modèles de souris génétiquement modifiées de cancer du sein

Microscopie intravitale est un outil puissant qui permet l'imagerie de divers processus biologiques chez les animaux vivants. Dans cet article, on présente un procédé détaillé pour l'imagerie de la dynamique des structures sous-cellulaires, telles que les granules de sécrétion, dans les glandes salivaires des souris vivantes.

Microscopie intravitale pour l&#39;imagerie Subcellular ouvrages chez des souris vivantes exprimant des protéines fluorescentes

Un protocole pour la livraison intracanalaire non-invasive de réactifs aqueux de la glande mammaire de la souris est décrite. La méthode prend avantage de l'injection localisée dans les mamelons des glandes mammaires ciblant spécifiquement conduits mammaires. Cette technique est adaptable à une variété de composés comprenant siRNA, les agents chimiothérapeutiques et les petites molécules.

Injection intra-canalaire pour localisée Drug Delivery de la glande mammaire de souris

Le protocole d'immunofluorescence indirecte décrite dans cet article permet la détection et la localisation de protéines dans la glande mammaire de la souris. Procédé complète est donnée pour préparer des échantillons de la glande mammaire, pour effectuer l'immunohistochimie, l'image de coupes de tissus par microscopie à fluorescence, et de reconstruire des images.

Immunofluorescence indirecte sur des coupes congelées de glande mammaire de souris

Ce protocole décrit l'utilisation de la microscopie multiphotonique pour effectuer prolongée imagerie time-lapse d'interactions multicellulaires en temps réel, in vivo à la résolution d'une seule cellule.

Time-lapse Extended Imagerie intravitale du temps réel multicellulaire Dynamics dans le microenvironnement de la tumeur

Ici, nous décrivons une technique d’administration localisée de réactifs à la glande mammaire du lapin via une injection intracanalaire. De plus, nous décrivons un protocole de visualisation et de confirmation de l’administration par imagerie échographique à haute résolution des agents de contraste.

Livraison Intracanalaire le lapin glande mammaire

Nous présentons ici un protocole pour l’isolement des souris entière et intacte pour étudier l’expression de la matrice extracellulaire (ECM) et de la morphologie ductal des glandes mammaires. La souris #4 glandes abdominales ont été extraits des 8-10 semaines vieux nullipares les souris femelles, fixés dans du formol tamponné neutre, sectionnés et colorés par immunohistochimie pour protéines ECM.

Isolement des glandes mammaires de souris intacte, toute analyse d’Expression de la matrice extracellulaire et la morphologie de la glande

Une approche est présentée ici pour l’imagerie intravitale à long terme utilisant des fenêtres en silicone optiquement claires qui peuvent être collées directement sur le tissu / organe d’intérêt et la peau. Ces fenêtres sont moins chères et plus polyvalentes que d’autres actuellement utilisées sur le terrain, et l’insertion chirurgicale provoque une inflammation et une détresse limitées chez les animaux.

Imagerie intravitale longitudinale à travers des fenêtres en silicone transparent

Ce protocole décrit une nouvelle fenêtre d’imagerie mammaire avec un couvercle remplaçable (R.MIW). La microscopie intravitale après implantation du R.MIW permet une imagerie longitudinale et multi-jours de la glande mammaire saine et malade avec une résolution cellulaire au cours des différents stades de développement.

Microscopie intravitale longitudinale à l’aide d’une fenêtre d’imagerie mammaire avec couvercle remplaçable

La méthode d’imagerie intravitale décrite ici utilise la deuxième génération harmonique de collagène et la fluorescence endogène du cofacteur métabolique NAD(P)H pour segmenter de manière non invasive un microenvironnement tumoral non marqué en compartiments tumoral, stromal et vasculaire pour une analyse approfondie des images intravitales 4D.

Une approche de segmentation sans étiquette pour l’imagerie intravitale du microenvironnement tumoral mammaire

Le présent protocole décrit l’injection intracanalaire de vecteurs viraux via la tétine pour délivrer des gènes d’intérêt dans les cellules épithéliales mammaires.

In vivo Livraison de gènes dans des cellules épithéliales mammaires de souris par injection intracanalaire mammaire

Découvrez l'imagerie intravitale de la glande mammaire lactante chez la souris par microscopie confocale et multiphoton. Cette méthode permet de visualiser en temps réel la dynamique des gouttelettes lipidiques et la morphologie glandulaire.

Microscopie subcellulaire intravitale de la glande mammaire

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