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DOI: 10.3791/64215-v
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Le présent protocole décrit une méthode qui utilise le jaune de lucifer dans un modèle entéroïde apical-out pour déterminer la perméabilité intestinale. Cette méthode peut être utilisée pour déterminer la perméabilité paracellulaire chez les entéroïdes qui modélisent les maladies inflammatoires de l’intestin telles que l’entérocolite nécrosante.
L’application de Lucifer Yellow aux milieux des entéroïdes Apical-out fournit une méthode simple d’analyse quantitative et qualitative des trois principales voies de perméabilité intestinale paracellulaire dans un modèle 3D. C’est une technique relativement simple qui nous permet d’évaluer la perméabilité à l’aide d’un modèle entéroïde. Nous travaillons avec cette technique dans nos études sur l’entérocolite nécrosante.
Cependant, cette technique peut être utile dans l’étude de toute maladie intestinale humaine, en utilisant un modèle entéroïde. Nos chercheurs postdoctoraux, le Dr Tyler Leiva et la Dre Alena Golubkova, ainsi que Camille Schlegel, superviseure adjointe de recherche de notre laboratoire, feront la démonstration des procédures aujourd’hui. Pour commencer, cultivez les androïdes intégrés dans BMM pendant sept à 10 jours avec des milieux conditionnés à 50% LWRN pour la génération entéroïde apical-out ou AO.
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