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DOI: 10.3791/64281-v
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Le présent protocole décrit la conception, la fabrication et la caractérisation d’un système microfluidique capable d’aligner, d’immobiliser et de comprimer avec précision des centaines d’embryons de Drosophila melanogaster avec une intervention minimale de l’utilisateur. Ce système permet l’imagerie haute résolution et la récupération d’échantillons pour l’analyse post-stimulation et peut être mis à l’échelle pour s’adapter à d’autres systèmes biologiques multicellulaires.
Ce protocole explique comment fabriquer et utiliser les technologies microfluidiques pour tirer parti des avantages expérimentaux en termes de débit d’échantillons, de manipulation automatisée et de capacité à appliquer avec précision des contraintes mécaniques tout en visualisant simultanément des échantillons. Cette technique minimise la manipulation manuelle des organismes biologiques multicellulaires, tels que les embryons et les organoïdes, pour leur immobilisation, leur alignement et leur imagerie en direct. Il permet également de leur appliquer une compression mécanique pour les études de mécanobiologie.
La fabrication de moules avec des caractéristiques de rapport d’aspect élevé pour cette puce microfluidique peut être difficile avec les techniques de microfabrication conventionnelles. Les conseils expliqués dans cet article vidéo peuvent surmonter ces défis. Pour commencer, nettoyez d’abord la plaquette de silicium avec de l’acétone, puis avec de l’alcool isopropylique.
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