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DOI: 10.3791/65959-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This research investigates the integrity of the blood-brain barrier mediated by brain endothelial cells through the deployment of impedance-based biosensors. Using an in vitro model, we analyze cancer cell interactions and their impact on barrier strength.
Nous démontrons ici la technique d’utilisation de biocapteurs basés sur l’impédance : ECIS et cellZscope, pour mesurer la force de la barrière endothéliale cérébrale. Nous détaillons la préparation et la technique d’ajout de divers stimuli à un modèle in vitro de l’endothélium cérébral. Nous mesurons, enregistrons et donnons une analyse représentative des résultats.
Nos recherches portent sur la microvascularisation cérébrale et la barrière hémato-encéphalique. Les cellules endothéliales cérébrales régulent le flux moléculaire dans le cerveau. Nous utilisons des biocapteurs basés sur l’impédance pour évaluer l’intégrité de la barrière dans la maladie.
Avec une analyse concomitante et plusieurs variables de traitement, nous avons déjà établi que plusieurs lignées cellulaires cancéreuses perturbent l’endothélium cérébral. Il est important de noter que nous avons établi que cela n’est pas principalement médié par des protéases ou des cytokines, mais pourrait plutôt être une fonction des corps vésiculaires liés au cancer. Nous étudions comment les cancers métastatiques perturbent les cellules endothéliales du cerveau, pénètrent dans le cerveau et forment des tumeurs secondaires.
À l’aide de biocapteurs basés sur l’impédance, nous explorons cette interaction pour comprendre l’atteinte du système vasculaire cérébral et la maladie. Notre objectif est d’identifier et de bloquer des cibles pour sauver nos cellules endothéliales cérébrales de la perturbation. Dans ce protocole, nous détaillons les modifications apportées à partir de cinq à sept ans d’expérience qui aideront à augmenter la reproductibilité et la robustesse de l’utilisation des deux technologies basées sur l’impédance.
Les avantages et les limites des deux systèmes par rapport à d’autres technologies sont discutés dans le manuscrit. Grâce à cette technologie, nous pouvons étudier plusieurs propriétés des cellules endothéliales microvasculaires cérébrales simultanément et en temps réel. Nous avons établi que les cellules cancéreuses et les cytokines peuvent perturber la barrière endothéliale.
Ensuite, nous évaluerons si le blocage de ces molécules d’adhésion ou récepteurs aide à protéger la barrière endothéliale cérébrale, telle que mesurée à l’aide de ces techniques.
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