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Utilisation du clivage sous cibles et du test de marquage (CUT & Tag) dans la recherche sur l...
Utilisation du clivage sous cibles et du test de marquage (CUT & Tag) dans la recherche sur l...
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JoVE Journal Developmental Biology
Using Cleavage Under Targets and Tagmentation (CUT&Tag) Assay in Mouse Myoblast Research

Utilisation du clivage sous cibles et du test de marquage (CUT & Tag) dans la recherche sur le myoblaste chez la souris

Full Text
1,389 Views
07:09 min
March 1, 2024

DOI: 10.3791/66066-v

Yuefeng Li1,2, Xiaofen Wu1,2, Ping Hu1,2

1Guangzhou Laboratory, 2The Key Laboratory of Biological Targeting Diagnosis, Therapy and Rehabilitation of Guangdong Higher Education Institutes,The Fifth Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Les chercheurs novices dans le domaine de l’épigénétique trouveront que CUT&Tag est une alternative beaucoup plus facile aux tests ChIP. CUT&Tag a énormément bénéficié aux études épigénétiques sur des populations de cellules rares et primaires, générant des données de haute qualité à partir de très peu de cellules. Ce protocole décrit la réalisation de dosages H3K4me1 CUT&Tag sur des myoblastes de souris isolés des muscles des membres postérieurs de souris.

Les recherches de notre groupe portent sur la façon dont la structure et la transcription du génome des cellules souches musculaires squelettiques adultes sont régulées et maintenues, en particulier lors de changements de sulfates, comme l’engagement, la différenciation et le tinasis des cellules souches. Les cellules souches musculaires squelettiques adultes, qui ne représentent que 1 % des cellules mononucléées dans le tissu musculaire, présentent un défi pour les études des caractéristiques de la chromatine à l’aide de High-C, ChIPs et ATAC seq, en raison de leur rareté dans les suspensions unicellulaires obtenues par digestion musculaire. L’immunoprécipitation de la chromatine, ChIP, a été un outil clé pour le profilage des caractéristiques du génome.

Une technique de coupe et d’étiquetage plus simple et plus efficace, mise au point par le Dr Steven Henikoff, surpasse souvent la ChIP, en particulier dans l’étude de l’épigénétique dans des populations de cellules rares. Sa facilité d’utilisation élargit l’accessibilité pour les chercheurs, y compris les experts non épigénétiques.

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Mots-clés : CUT&Tag clivage sous les cibles et marquage myoblastes de souris cellules souches musculaires facteurs de liaison à la chromatine marques d’histones variants d’histones ChIP immunoprécipitation de la chromatine ChIP de réticulation ChIP native nucléase micrococcique séquençage localisations génomiques

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