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DOI: 10.3791/66164-v
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Nous décrivons un protocole de xénotransplantation dans le jaune d’embryons de poisson-zèbre transparent qui est optimisé par une méthode de stadification simple et rapide. Les analyses post-injection comprennent la survie et l’évaluation de la charge de morbidité des cellules xénotransplantées par cytométrie en flux.
Nous cherchons à obtenir des connaissances moléculaires sur le contrôle de l’hématopoïèse normale et maligne, puis à exploiter ces connaissances pour développer de nouvelles thérapies pour le traitement des cancers du sang. Les xénogreffes tumorales sont un outil indispensable pour évaluer l’impact d’une altération génétique ou d’un traitement sur le comportement tutumeur. Cependant, les xénogreffes de souris sont coûteuses, longues et de portée limitée.
L’utilisation du poisson-zèbre pour la xénotransplantation tumorale permet de surmonter tous ces inconvénients. Dans ce protocole, nous démontrons un processus de montage facile et rapide pour la xénotransplantation, ce qui augmente le débit. Nous utilisons en outre la coloration cellulaire pour connaître la qualité de l’inoculum, puis la cytométrie en flux pour évaluer la progression tumorale en évaluant ou en quantifiant la charge de la maladie.
Nous avons l’intention d’utiliser cette approche pour identifier de nouvelles façons de bloquer la fonction de la cascade de kinases Ras/MAP, qui est à l’origine de la grande majorité des cancers humains. Et nous le ferons non pas en essayant de bloquer l’activité catalytique de la cascade kinase Ras/MAP, mais plutôt en empêchant sa capacité à phosphoryler les substrats cancérigènes qu’elle modifie.
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