5 avril 2024
Un système de télémétrie a permis d’enregistrer simultanément l’activité autonome et le comportement maternel détaillé des souris mères, de la grossesse à la lactation. Cette méthode permet de comprendre la dynamique des caractéristiques physiologiques et comportementales chez les mères, de la grossesse au sevrage.
Nos recherches se concentrent sur les changements physiologiques chez les mères de la grossesse à l’allaitement, et sur leur impact sur le comportement maternel et le développement de ses petits. Nous cherchons à déterminer comment la physiologie d’une mère s’adapte pour soutenir la croissance et le développement sains de sa progéniture. La mise en œuvre de territoires chez la souris enceinte permet un suivi continu de l’ECG de la gestation à la lactation, donnant un aperçu de l’activité automatique lors d’un événement de reproduction. Cette méthode permet d’observer plus naturellement le comportement et les enregistrements ECG simultanés offrent une compréhension claire de l’évolution de la physiologie maternelle.
Nos recherches ont permis d’améliorer les méthodes chirurgicales et les méthodes d’observation des souris, ce qui permet de suivre les souris pendant une longue période.
Nos recherches nous aident à comprendre comment la réponse physique de la mère pendant la grossesse et l’allaitement en termes d’activité automatique. Nos recherches pourraient mener à de meilleurs soins maternels et à un soutien au développement des petits, et pourraient inspirer de nouvelles approches pour étudier la reproduction, non seulement chez les animaux, mais aussi chez les humains.
À l’avenir, nous prévoyons d’étudier où les mères qui ont commis un infanticide ou une négligence dans l’environnement naturel présentent des différences dans l’activité autonome et le comportement maternel de la grossesse à l’allaitement par rapport aux mères normales. Nous croyons que ce protocole sera également utile pour comprendre les facteurs à l’origine de la négligence et de l’infanticide.
[Instructeur] Pour commencer, placez la souris anesthésiée en position couchée sur le panneau chauffant. À l’aide de ciseaux, faites une incision cutanée entre les oreilles, puis insérez une pince dans l’incision pour séparer la peau et le muscle autour du cou et du côté ventral, créant ainsi un espace pour le placement du télémètre. Insérez maintenant le télémètre à travers l’incision entre les oreilles et placez-le dans l’espace créé sur le côté ventral. À l’aide d’une pince, faites rouler et regrouper les fils positifs et négatifs du télémètre et placez ces fils dans l’espace du cou. Pour fermer l’incision, utilisez une aiguille de 13 millimètres et une suture de 20 centimètres. Ensuite, placez la souris en position couchée. À l’aide de ciseaux, faites une petite incision autour de la peau de la clavicule et séparez les muscles de la peau du cou. À l’aide d’une pince, extrayez les fils positif et négatif de l’arrière du cou. Ensuite, séparez doucement les glandes salivaires pour exposer l’aspect en forme de V du muscle sterno-cléido-mastoïdien. Ensuite, ajustez la longueur de la sonde négative pour atteindre le muscle sterno-cléido-mastoïdien près de la clavicule et retirez soigneusement la tubulure de plomb de la sonde négative. Passez maintenant l’aiguille à coudre avec une suture de 10 centimètres à travers la courbure en forme de V du muscle sterno-cléido-mastoïdien pour créer une boucle. Enfilez l’électrode en acier inoxydable du fil négatif à travers cette boucle et positionnez-la sous le muscle près de la clavicule. Attachez légèrement la boucle pour fixer l’électrode en acier inoxydable sans endommager le muscle sterno-cléido-mastoïdien. De plus, placez une deuxième suture sur le côté crânien du muscle et attachez-la autour du tube du fil négatif pour le fixer. Ensuite, sectionnez autour de l’apophyse xiphoïde et séparez soigneusement la peau du muscle entre l’apophyse xiphoïde et la clavicule. Étendez ensuite l’avance positive pour atteindre le processus xiphoïde. Retirez le tube de plomb du fil positif, en vous assurant que l’électrode en acier inoxydable enroulée à l’intérieur est étirée à l’aide d’une pince à épiler fine. Ensuite, utilisez une aiguille de calibre 18 pour créer un tunnel sous le muscle autour du processus xiphoïde. Placez ensuite l’électrode en acier inoxydable dans une aiguille et passez-la à travers le muscle autour du processus xiphoïde. Une fois l’aiguille retirée, utilisez une aiguille à coudre avec une suture de 10 centimètres pour suturer légèrement l’électrode en acier inoxydable enroulée sur le muscle autour du processus xiphoïde. Pour sécuriser davantage la sonde positive, placez une deuxième suture sur le côté crânien de l’apophyse xiphoïde et attachez-la autour du tube de la sonde positive. À l’aide d’une aiguille à coudre avec une suture de 20 centimètres, fermez toutes les incisions. Après l’implantation, placez la souris dans une cage propre. Pour commencer, placez la souris avec le télémètre dans la cage et positionnez la cage sur la base en T qui agit comme le récepteur de la télémétrie de la souris. Allumez l’ordinateur enregistrable et utilisez l’application logicielle d’analyse de données installée pour collecter les données de l’électrocardiogramme à partir de la souris. Ensuite, à l’aide de l’application de tableau de laboratoire sur l’ordinateur enregistrable, enregistrez l’électrocardiogramme. Pour analyser les données de l’électrocardiogramme, démarrez LabChart et ouvrez le fichier de données pour la période d’enregistrement. Cliquez sur le bouton VFC et ajustez les paramètres de détection de rythme en conséquence pour analyser la variabilité de la fréquence cardiaque. Cliquez ensuite sur le bouton HRV et sélectionnez la vue Beat Classifier. Choisissez tous les temps dans la vue Classificateur de temps et sélectionnez la vue Rapport à partir du bouton HRV. Copiez les données de la vue Rapport et collez-les dans Excel pour une analyse plus approfondie. L’analyse de l’électrocardiogramme a montré que la fréquence cardiaque diminuait progressivement tandis que l’intervalle de fréquence respiratoire augmentait progressivement du JG 17 au 21. L’analyse de la VFC a montré que le rapport de fréquence basse à haute fréquence a fortement augmenté de 0 à 21.
Cette étude examine les changements physiologiques chez les souris femelles de la grossesse à la lactation ainsi que leur impact sur le comportement maternel et le développement des petits. En utilisant un système de télémétrie pour le suivi continu de l'ECG, la recherche fournit des informations sur la dynamique de la physiologie maternelle durant cette période critique.
La surveillance continue de l'ECG et du comportement chez la souris, de la grossesse jusqu'à la lactation, permet une cartographie précise des adaptations autonomiques et physiologiques durant les transitions maternelles. Cette approche renforce la détection mécanistique des risques et la confiance prédictive dans les modèles précliniques de comportement maternel et de neurophysiologie. La méthode améliore la continuité translationnelle pour les études ciblant les voies neurodéveloppementales et autonomiques pertinentes pour la santé maternelle et celle de la progéniture.
Ce protocole basé sur la télémétrie s'intègre dans la continuité de la découverte, depuis les premières études mécanistiques jusqu'à la validation préclinique des cibles maternelles et neurodéveloppementales.