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Essai de migration in vitro en temps réel pour les lymphocytes T CD8+ murins primaires
Essai de migration in vitro en temps réel pour les lymphocytes T CD8+ murins primaires
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JoVE Journal Immunology and Infection
Real-Time In Vitro Migration Assay for Primary Murine CD8+ T Cells

Essai de migration in vitro en temps réel pour les lymphocytes T CD8+ murins primaires

Full Text
2,285 Views
06:42 min
May 24, 2024

DOI: 10.3791/66580-v

Allison T. Ryan1,2, Ankit Dahal1,2, Sana Mir1,2, Minsoo Kim1,2, Kihong Lim1,2

1Department of Microbiology and Immunology,University of Rochester, 2David H. Smith Center for Vaccine Biology and Immunology,University of Rochester

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Ce protocole fournit une méthode d’isolement primaire des lymphocytes T murins et de microscopie à intervalle de la migration des lymphocytes T dans des conditions environnementales spécifiques avec une analyse quantitative.

L’objectif de notre recherche est de comprendre les modèles de migration des lymphocytes T dans des conditions environnementales hautement définies afin de permettre une expérimentation in vitro éclairée et de déchiffrer les interactions moléculaires ayant un impact sur la migration. L’imagerie en direct, telle que la microscopie multiphotonique intravitale, est utilisée pour la compréhension in vivo de la cinétique des cellules immunitaires. Mais les dispositifs microfluidiques sont un outil in vitro courant qui offre un contrôle précis du microenvironnement qui ne peut pas être offert dans un échantillon vivant.

Notre protocole nous permet d’analyser des voies de signalisation complexes et de mieux comprendre les expériences in vitro ciblées afin d’aborder davantage les rôles biologiques des signaux individuels d’une manière spécifique au type de cellule. Notre méthode est simple, reproductible et facile d’accès dans les laboratoires de recherche qui disposent d’un microscope à fond clair doté d’un appareil photo numérique connecté. Par conséquent, notre approche garantit un ensemble fiable de méthodes pour étudier les événements de migration cellulaire dynamique.

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Mots-clés: Migration des lymphocytes T Réponse immunitaire adaptative Chimiokines Récepteurs des chimiokines Molécules d’adhésion Essai de migration in vitro Analyse en temps réel Indices environnementaux Isolement des lymphocytes T Analyse assistée par ordinateur Interactions moléculaires Motilité cellulaire Thérapeutique

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