Name: Remodelage dépendant de l’expérience de la connectivité synaptique des neurones sensoriels olfactifs du cerveau juvénile au cours d’une période critique au début de la vie (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-03-01T14:50:00.000+00:00
Duration: 7 min 13 s
Description: Découvrez le remodelage synaptique dépendant de l'expérience chez Drosophila en utilisant des expositions olfactives contrôlées et l'imagerie confocale. Cette méthode permet d'étudier les mécanismes de plasticité cérébrale pendant les périodes critiques.

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<meta charset="utf8"></head><body>Remodelage synaptique induit par l’expérience olfactive dans le cerveau juvénile de la drosophile

<ol><li>English, S., Barreaux, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+evolution+of+sensitive+periods+in+development%3A+insights+from+insects%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opinion+Behav+Sci%22%5BJournal%5D)">The evolution of sensitive periods in development: insights from insects.</a> Curr Opinion Behav Sci. 36, 71-78 (2020).</li>
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<li>Devaud, J. M., Acebes, A., Ramaswami, M., Ferrús, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+and+functional+changes+in+the+olfactory+pathway+of+adult+Drosophila+take+place+at+a+critical+age%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Structural and functional changes in the olfactory pathway of adult Drosophila take place at a critical age.</a> J Neurobiol. 56 (1), 13-23 (2003).</li>
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<li>Chodankar, A., Sadanandappa, M. K., Raghavan, K. V., Ramaswami, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glomerulus-selective+regulation+of+a+critical+period+for+interneuron+plasticity+in+the+drosophila+antennal+lobe%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Glomerulus-selective regulation of a critical period for interneuron plasticity in the drosophila antennal lobe.</a> J Neurosci. 40 (29), 5549-5560 (2020).</li>
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<li>Gugel, Z. V., Maurais, E. G., Hong, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+exposure+to+odors+at+naturally+occurring+concentrations+triggers+limited+plasticity+in+early+stages+of+Drosophila+olfactory+processing%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Chronic exposure to odors at naturally occurring concentrations triggers limited plasticity in early stages of Drosophila olfactory processing.</a> eLife. 12, 85443(2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>For Odor Exposure</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Drosophila flacons Genesee</td><td>Scientific</td><td>32-110</td><td></td></tr><tr><td>Ethyl butyrate</td><td>Sigma Aldrich</td><td>E15701</td><td></td></tr><tr><td>Microcentrifugeuses tubes&nbsp ;</td><td>Fisher Scientific&nbsp ;</td><td>05-408-129</td><td></td></tr><tr><td>Huile minérale</td><td>Sigma Aldrich</td><td>M3516</td><td></td></tr><tr><td>Chambres à odeurs</td><td>Glasslock</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pinceaux</td><td>Winsor & Newton</td><td>Series 233</td><td></td></tr><tr><td>Parafilm</td><td>Thermofisher</td><td>S37440</td><td></td></tr><tr><td>Treillis métallique</td><td>Scienceware</td><td>378460000</td><td></td></tr><tr><td><fort>Dissection cérébrale</fort></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Éthanol, 190 proof</td><td>Decon Labs</td><td>2801</td><td>Dilué à 70 %</td></tr><tr><td>Forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>11251-30</td><td>Dumont #5</td></tr><tr><td>Paraformaldéhyde&nbsp ;</td><td>Microscope électronique Sciences</td><td>157-8</td><td>Dilué à 4 %</td></tr><tr><td>Boîtes de Pétri</td><td>Fisher Scientific&nbsp ;</td><td>08-757-100B</td><td></td></tr><tr><td>Solution saline tamponnée au phosphate</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>70011-044</td><td>Diluée à 1x</td></tr><tr><td>Saccharose</td><td>Fisher Scientific&nbsp ;</td><td>BP220-1</td><td></td></tr><tr><td>Sylgard</td><td>Electron Microscope Sciences</td><td>24236-10</td><td></td></tr><tr><td>Triton-X 100</td><td>Fisher Scientific&nbsp ;</td><td>BP151-100</td><td></td></tr><tr><td>Brain Immunocytochemistry</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>488 chèvre anti-poulet</td><td>Invitrogen</td><td>A11039</td><td></td></tr><tr><td>546 chèvre anti-rat</td><td>Invitrogen</td><td>A11081</td><td></td></tr><tr><td>Albumine sérique bovine&nbsp ;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A9647</td><td></td></tr><tr><td>Poulet anti-GFP</td><td>Abcam</td><td>13970</td><td></td></tr><tr><td>Couvre-lames Avantor</td><td></td><td>48366-067</td><td>25 x 25 mm</td></tr><tr><td>Ruban adhésif double face</td><td>Scotch</td><td>34-8724-5228-8</td><td></td></tr><tr><td>Fluoromount-G&nbsp ;</td><td>Electron Microscope Sciences</td><td>17984-25</td><td></td></tr><tr><td>Lames de microscope</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-544-2</td><td>75 x 25 mm</td></tr><tr><td>Vernis à ongles</td><td>Sally Hansen</td><td>109</td><td>Xtreme Wear, Invisible</td></tr><tr><td>Normal goat serum</td><td>Sigma Aldrich</td><td>G9023</td><td></td></tr><tr><td>Rat anti-CadN</td><td>Developmental Studies Hybridoma Bank</td><td>AB_528121</td><td></td></tr><tr><td> Confocal/Analyse</fort></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tout ordinateur/portable</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Microscope confocal</td><td>Carl Zeiss</td><td></td><td>Zeiss 510 META&nbsp ;</td></tr><tr><td>Logiciel</td><td>Fidji Fidji</td><td></td><td>Version 2.14.0/1.54f</td></tr></tbody></table>

remodelage dépendant de l’expérience de la connectivité synaptique des neurones sensoriels olfactifs du cerveau juvénile au cours d’une période critique au début de la vie

Experience-Dependent Remodeling of Juvenile Brain Olfactory Sensory Neuron Synaptic Connectivity in an Early-Life Critical Period

La figure 1 montre le flux de travail des méthodes d’exposition aux odorants pendant la période critique dépendante de l’expérience olfactive et d’imagerie cérébrale. Le protocole commence par l’appariement de l’âge des pupes sombres du pharate immédiatement avant l’éclosion (figure 1A). Les pupes sont placées dans des chambres odorantes pendant 4 heures, puis les adultes nouvellement fermés sont retournés dans des flacons frais dans les chambres déodorantes de contrôle du véhicule ou d’EB dosé (figure 1B). Nous exposons généralement à l’odorant pendant 24 heures, bien que n’importe quelle durée soit possible. Après l’exposition à un odorant, la dissection cérébrale commence par le retrait de la tête du thorax, puis le retrait de l’exosquelette de la cuticule à l’aide d’une pince fine (Figure 1C). Le cerveau isolé est nettoyé de tous les tissus associés qui pourraient interférer avec l’imagerie, puis immédiatement fixé dans 4% de paraformaldéhyde et 4% de saccharose dans du PBS. Une courte dose de 30 minutes est suffisante pour une bonne intégrité du tissu cérébral. Le protocole immunocytochimique commence par un bloc de 1 h (p. ex., BSA, NGS), une incubation d’une nuit dans des anticorps primaires (p. ex., anti-GFP, -CadN), puis une brève incubation de 2 h dans des anticorps secondaires (figure 1D). Les cerveaux marqués sont montés sur des lames de verre sous des lamelles scellées, la surface dorsale du cerveau étant relevée pour une meilleure imagerie des lobes antennaires (figure 1E). Notez que tous les échantillons sont mis à l’aveugle pour le génotype et les conditions d’expérience en marquant la lame avec une désignation codée pour un décodage ultérieur. Un microscope confocal à balayage laser avec un objectif à immersion dans l’huile 63x est utilisé pour imager les lobes antennaires centraux du cerveau (Figure 1F). Des lignes laser optimales pour les fluorophores utilisés sont sélectionnées (par exemple, Argon 488 et HeNe 543) pour imager l’innervation des neurones sensoriels olfactifs Or42a de VM7 dans le contexte des glomérules environnants.
Il est important de sélectionner le gain, le décalage, la résolution d’imagerie et l’épaisseur de coupe optique optimaux pour capturer l’intégralité de la projection Z-stack de l’innervation des neurones Or42a dans les glomérules VM7. Tous les génotypes et conditions d’expérience à comparer sont imagés avec des réglages de microscope identiques. Les piles Z sont traitées à l’aide du logiciel ImageJ, les modifications dépendantes de l’expérience étant évaluées principalement par le volume d’innervation 7,14. Les mesures volumétriques ont été calculées de deux manières. On calcule la zone d’innervation tranche par tranche à l’aide de la fonction lasso ImageJ, puis on multiplie chaque valeur par l’épaisseur de chaque tranche (μm)8,9. L’autre utilise la somme des projections Z de tranche et multiplie le nombre de tranches de la pile Z par l’épaisseur de la tranche pour déterminer le volume moyen. Les deux méthodes donnent des résultats cohérents. En plus des mesures de volume, l’intensité de fluorescence peut également être évaluée avec la projection de l’intensité maximale de VM7 glomérules16. La somme pondérée de tous les pixels est évaluée via la projection ImageJ sum slice max, le nombre de pixels à chaque niveau d’intensité étant additionné pour calculer l’intensité globale 8,9. Le bruit de fond peut être soustrait en quantifiant une région extra-glomérulaire de taille identique. Cette méthode de soustraction prend plus de temps mais est plus précise, car elle tient compte des différents niveaux de marquage des anticorps de fond dans chaque échantillon de cerveau pour produire une quantification plus représentative des valeurs d’intensité de fluorescence d’innervation. Les mesures d’intensité sont effectuées dans une plage typique de 18 à 30 coupes optiques (0,37 μm/tranche) à l’intérieur d’une pile Z, calculée en moyenne pour chaque cerveau16. Dans presque tous les cas, les mesures d’intensité et de volume de fluorescence d’innervation donnent des résultats cohérents.
Dans toutes les modalités de mesure, les résultats représentatifs restent inébranlables ; L’expérience odorante de l’EB au début de la vie entraîne une perte significative de l’innervation des neurones Or42a. Le glomérule VM7 peut être identifié de manière fiable par sa taille, sa forme et son emplacement parmi d’autres glomérules olfactifs du lobe antennaire cartographiés avec précision (Figure 2A) et par l’expression ciblée du marqueur membranaire Or42a-mCD8 ::GFP couplé au marquage glomérulaire avec de la cadhérine anti-neurale (CadN ; Figure 2B). L’exposition programmée au contrôle du véhicule odorant (huile minérale) entraîne une innervation neuronale Or42a impossible à distinguer d’un animal normal non traité. Pourtant, l’expérience odorante de l’EB dans les premiers jours suivant l’éclosion (dpe) provoque l’élagage des glomérules synaptiques (Figure 2C). Ce mécanisme d’élagage est entièrement limité à la brève période critique du début de la vie 8,10. Nous utilisons généralement des expositions à des substances odorisantes de 24 heures pour évaluer l’élagage synaptique des glomérules VM7 et la diminution du volume d’innervation qui en résulte dans le cerveau de la drosophile juvénile. Une exposition de 24 h (0-1 dpe) au témoin du véhicule odorisant (huile minérale) maintient l’innervation normale et dense Or42a-mCD8 ::GFP (vert) dans les glomérules synaptiques VM7 (cercles pointillés blancs) dans les lobes antennaires des deux hémisphères cérébraux (figure 2D, à gauche). En contraste frappant, une exposition de 24 heures (0-1 dpe) à un odorant EB à 25 % dissous dans l’huile minérale entraîne une forte taille de l’innervation Or42a-mCD8 ::GFP (vert) et une perte du volume glomérulaire synaptique (Figure 2D, à droite). Ces résultats sont à la fois visuellement évidents et toujours clairs. L’un des plus grands attributs de ce protocole d’expérience olfactive est la clarté des résultats de l’imagerie cérébrale, qui se prêtent également à des quantifications simples de l’intensité de la fluorescence et du volume de l’innervation.
L’avantage majeur de ce protocole d’expérience odorante est la possibilité de l’exploiter pour l’étude de la restriction temporelle et des mécanismes dose-dépendants de l’odorant pendant la période critique de l’élagage synaptique. Pour l’élimination des synapses neuronales Or42a induites par l’EB dans le glomérule VM7, le mécanisme de remodelage est principalement limité au juvénile précoce (0-2 dpe), sans élagage synaptique détectable dépendant de l’expérience à maturité (7-9 dpe), à l’exception d’une modulation mineure aux niveaux d’exposition EB les plus élevés8. Une telle restriction temporelle définit une période critique, et la compréhension de ce mécanisme de synchronisation est un objectif important. Un autre attribut de ce protocole est que l’élagage synaptique dépendant de l’expérience est dépendant de la dose EB (Figure 3). L’exposition programmée au véhicule de contrôle de l’odorisant (huile minérale) avec 0 % d’odorant EB entraîne une innervation normale des neurones Or42a du glomérule synaptique VM7, qui est impossible à distinguer d’un animal non traité. Le calcul du volume tridimensionnel d’innervation neuronale Or42a montre une taille typique d’un cerveau juvénile normal (2260 μm3 ; Figure 3A, à gauche). Des résultats représentatifs montrent que l’augmentation de la concentration d’odorant EB entraîne une taille des glomérules synaptiques de plus en plus importante. Par exemple, une exposition de 24 h (0-1 dpe) à un odorant EB à 15 % entraîne une perte d’innervation claire et constante (figure 3A, au milieu). La quantification du volume d’innervation 3D montre une réduction notable par rapport aux commandes du véhicule (760 μm3 contre 2260 μm3). Une exposition de 24 heures (0-1 dpe) à un odorisant à 25 % d’EB entraîne une perte d’innervation encore plus importante (281 μm3 ; Figure 3A, à droite). Les quantifications représentatives de cette gamme de concentrations d’odorisant EB montrent des résultats cohérents pour l’intensité de fluorescence (figure 3B) et le volume d’innervation (figure 3C). Cette dépendance à la dose permet d’étudier les moyens de prévenir l’élagage synaptique ainsi que d’améliorer l’élagage avec des expositions à des odeurs plus faibles pour démontrer une augmentation du remodelage des glomérules synaptiques. Certaines études antérieures ont montré l’effet inverse de l’augmentation du volume glomérulaire en utilisant d’autres odorisants avec ce protocole10. L’exposition à l’odorant EB pendant la période critique se traduit toujours par une taille des glomérules synaptiques frappante et facilement détectable.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66629/66629fig01.jpg"> Figure 1 : Organigramme des études d’exposition aux odorants dans le cerveau juvénile de la drosophile. (A) Les pupes sombres pharates (90+ h après la pubation à 25 °C) sont collectées et placées dans des chambres odorantes. Dans des conditions odorantes, 4 heures sont autorisées pour l’éclosion, puis les mouches juvéniles sont transférées dans un flacon frais. (B) Les mouches du même âge sont divisées en conditions d’expérience soit la commande du véhicule (100 % huile minérale), soit celle du butyrate d’éthyle (EB ; % v/v dans l’huile minérale). Un grillage fin (en médaillon) permet l’accès aux odorants. Les mouches sont généralement exposées pendant 20 heures supplémentaires, pour un total de 24 heures d’exposition, 0 à 1 jour après l’éclosion (DPE). (C) Les mouches sont disséquées en enlevant d’abord la tête, puis de fines pinces sont utilisées pour retirer délicatement l’exosquelette de la cuticule et isoler le cerveau juvénile. Le cerveau isolé est débarrassé de tous les tissus environnants et de la trachée saillante. (D) Les cerveaux isolés sont fixés, bloqués, puis incubés séquentiellement dans des anticorps primaires et secondaires. La gamme d’anticorps utilisés comprend généralement une sonde membranaire générale pour révéler les glomérules synaptiques du lobe antennaire et une sonde membranaire spécifique pour les neurones sensoriels olfactifs Or42a. (E) Les cerveaux marqués sont placés dans un support de montage sur une lame de microscope en verre avec des entretoises de ruban sous une lamelle scellée. L’orientation correcte du cerveau (surface dorsale vers le haut) est essentielle pour une imagerie optimale des lobes antennaires. (F) Les cerveaux sont imagés à l’aide d’un microscope confocal fluorescent à balayage laser. Tous les échantillons sont soumis à l’insu du génotype et présentent des conditions avant l’imagerie et les analyses quantifiées ultérieures. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66629/66629fig01large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66629/66629fig02.jpg"> Figure 2 : Taille des glomérules synaptiques en fonction de l’expérience odorante. (A) Les glomérules olfactifs du lobe antennaire (AL) sont cartographiés avec précision. Quelques glomérules synaptiques représentatifs sont représentés. La classe des neurones sensoriels olfactifs (OSN) du récepteur Or42a innerve spécifiquement les glomérules VM7. (B) Les neurones marqués Or42a-mCD8 ::GFP (vert) innervent densément les glomérules VM7 appariés sur les côtés gauche (L) et droit (R) du cerveau, avec le marquage par anticorps N-Cadhérine (CadN) de tous les glomérules synaptiques AL (magenta). La ligne de mouche est w1118 ; Or42a-mCD8 ::GFP/+. (C) Représentation graphique schématique de l’innervation Or42a OSN des glomérules synaptiques VM7 dans les conditions de contrôle du véhicule (100 % d’huile minérale ; à gauche) et d’exposition au butyrate d’éthyle (% EB v/v dans l’huile minérale ; à droite) pendant la période critique juvénile. L’élagage de l’innervation en fonction de l’expérience ne se produit qu’avec une exposition à l’EB au début de la vie, avec des synapses éliminées et des axones perdus, ce qui entraîne une réduction du volume d’innervation. (D) Images confocales représentatives de l’innervation d’Or42a OSN des glomérules synaptiques appariés VM7 (cercles blancs en pointillés ; Or42a-mCD8 ::GFP, vert) après le contrôle du véhicule à l’huile (à gauche) et une exposition à 25% EB (à droite) pendant 24 h (0-1 dpe). L’expérience odorante EB entraîne l’élagage synaptique et la perte de volume d’innervation. Ce mécanisme dépendant de l’expérience n’est limité dans le temps et transitoirement réversible qu’au cours d’une période critique olfactive bien définie dans les premiers jours suivant l’éclosion. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66629/66629fig02large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66629/66629fig03.jpg"> Figure 3 : Quantification de l’intensité et du volume de fluorescence de l’innervation des glomérules synaptiques dose-dépendants de l’EB. (A) Or42a-mCD8 ::GFP dans un glomérule synaptique VM7 (vert) exposé de 0-1 dpe au témoin d’huile minérale du véhicule odorant (0 % EB, à gauche), 15 % EB (au milieu) ou 25 % EB (à droite). Ci-dessous : Les mêmes images avec l’innervation glomérulaire délimitée (cercles blancs) et le volume d’innervation tridimensionnel calculé. Le témoin véhicule présente une innervation du glomérule synaptique VM7 par les neurones Or42a qui est indiscernable de celle des animaux non traités. L’expérience d’une période critique avec une exposition à 15 % de l’odorisant EB entraîne une taille évidente du glomérule synaptique, avec une diminution de 66 % du volume d’innervation tridimensionnel dans ce cas. L’exposition à la teneur plus élevée de 25 % d’EB entraîne une taille plus importante, avec une perte de près de 90 % du volume du glomérule synaptique dans ce cas. Ainsi, on peut imaginer une taille dose-dépendante à mesure que l’expérience odorante augmente. (B) Résultats représentatifs de l’intensité de fluorescence marquée Or42a-mCD8 ::GFP dans les glomérules synaptiques VM7 exposés de 0 à 1 dpe au témoin du véhicule odorant (huile, vert), 15 % d’EB (moyen, orange) ou 25 % d’EB (à droite, noir). (C) Résultats représentatifs des volumes d’innervation tridimensionnelle des glomérules VM7 dans les mêmes conditions d’exposition aux odeurs pendant la période critique. Les nuages de points montrent tous les points de données individuels avec la moyenne ± SEM. La signification est indiquée comme suit : p≤0,05 (*), p ≤ 0,01 (**), p ≤ 0,001 (***) et p ≤ 0,0001 (****). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66629/66629fig03large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>

Remodelage dépendant de l’expérience de la connectivité synaptique des neurones sensoriels olfactifs du cerveau juvénile au cours d’une période critique au début de la vie

Early-life olfactory sensory experience induces dramatic synaptic glomeruli remodeling in the Drosophila juvenile brain, which is experientially ...

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Visualiser les effets d&#39;une expérience précoce positive, tactile stimulation, sur dendritiques Morphologie et Synaptic connectivité avec Golgi-Cox coloration

Ce protocole introduit l’apprentissage précoce latéralisé de la préférence olfactive chez les rats utilisant l’occlusion aiguë d’un seul naris. L’apprentissage latéralisé permet d’examiner les résultats comportementaux et les mécanismes biologiques sous-jacents chez les mêmes animaux, réduisant ainsi la variance induite par les conceptions inter-animaux. Ce protocole peut être utilisé pour étudier les mécanismes moléculaires qui sous-tendent l’apprentissage précoce des odeurs.

Un modèle d&#39;apprentissage latéralisé odeur chez les rats nouveau-nés pour dissection Formation Neural Circuits Soutenir la mémoire

Nous décrivons un protocole de marquage in vivo des neurones sensoriels olfactifs par électroporation et par balayage laser confocal ultérieur ou microscopie multiphotonique pour visualiser la morphologie neuronale et son développement au fil du temps.

Le système olfactif comme un modèle pour étudier des modèles axonale croissance et la morphologie In Vivo

Nous décrivons un protocole d'immunohistochimie pour étudier le profil d'activation des neurones de l'hippocampe après exposition à une tâche spatiale d'apprentissage dans un modèle de souris caractérisé par des déficits cognitifs d'origine neurologique du développement. Ce protocole peut être appliqué sur les deux modèles génétiques souris ou pharmacologiques, caractérisée par des déficits cognitifs.

Visualisation immunohistochimique de l&#39;hippocampe Neuron Activité Après l&#39;apprentissage spatial dans un modèle de souris de troubles neurodéveloppementaux

L’identification des molécules et des voies contrôlant la plasticité synaptique et la mémoire reste un défi majeur en neurosciences. Ici, un flux de travail est décrit abordant la quantification relative des protéines synaptiques supposées impliquées dans la réorganisation moléculaire des synapses pendant l’apprentissage et la consolidation de la mémoire dans un paradigme d’apprentissage auditif.

Résolution quantitative Haute Synaptic Proteome Profiling des souris régions cérébrales Après Auditory Discrimination apprentissage

Ici, nous formons la souris sur une tâche d’apprentissage associatif pour tester la discrimination à l’odeur. Ce protocole permet également d’études sur l’apprentissage induit par des changements structurels dans le cerveau.

Un Test objectif et reproductible d’apprentissage olfactif et de la Discrimination chez les souris

Il s’agit d’un protocole pour la préparation des tranches aiguës de l’adulte et le vieillissement hippocampi souris qui tire parti de la perfusion transcardique et la coupe de tranches avec la glace-froid NMDG-aCSF pour réduire les dommages hypoxiques au tissu. Les tranches qui en résultent restent en bonne santé pendant de nombreuses heures et conviennent aux corrections à long terme et aux enregistrements sur le terrain.

Minimiser l’hypoxie dans les tranches hippocampales des souris adultes et vieillissantes

Le protocole présenté ici fournit des informations sur l’électroencéphalographie (EEG) simultanée et l’évaluation comportementale en temps réel. Nous avons discuté de toutes les étapes impliquées dans ce protocole comme une solution attrayante pour les chercheurs dans de nombreux domaines des neurosciences, en particulier dans les domaines de l’apprentissage et de la mémoire.

Surveillance simultanée de l’électrophysiologie sans fil et du test comportemental de la mémoire comme outil pour étudier la neurogenèse de l’hippocampe

Ce protocole décrit la procédure de dissection, l’état de culture et l’imagerie en direct d’un système d’explantation antenne-cerveau pour l’étude de l’assemblage du circuit olfactif.

Un système Explant pour les études d’imagerie time-lapse de l’assemblage de circuits olfactifs chez la drosophile

Découvrez le remodelage synaptique dépendant de l'expérience chez Drosophila en utilisant des expositions olfactives contrôlées et l'imagerie confocale. Cette méthode permet d'étudier les mécanismes de plasticité cérébrale pendant les périodes critiques.

Remodelage dépendant de l’expérience de la connectivité synaptique des neurones sensoriels olfactifs du cerveau juvénile au cours d’une période critique au début de la vie (Vidéo) | JoVE Journal

Remodelage dépendant de l’expérience de la connectivité synaptique des neurones sensoriels olfactifs du cerveau juvénile au cours d’une période critique au début de la vie

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