Name: Technique moins invasive pour la fracture mandibulaire non stabilisée dans des modèles murins (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-09-27T13:25:00.000+00:00
Duration: 4 min 13 s
Description: Découvrez une technique de fracture mandibulaire non stabilisée chez la souris pour étudier la réparation osseuse endochondrale. Cette méthode minimise la perte osseuse et les lésions tissulaires.

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<meta charset="utf8"></head><body>Protocole normalisé de fracture mandibulaire pour la réparation osseuse chez la souris

<ol><li>Thompson, Z., Miclau, T., Hu, D., Helms, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+model+for+intramembranous+ossification+during+fracture+healing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ortho+Res%22%5BJournal%5D)">A model for intramembranous ossification during fracture healing.</a> J Ortho Res. 20 (5), 1091-1098 (2002).</li>
<li>Bahney, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+biology+of+fracture+healing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ortho+Res%22%5BJournal%5D)">Cellular biology of fracture healing.</a> J Ortho Res. 37 (1), 35-50 (2019).</li>
<li>Yu, Y. Y., Lieu, S., Hu, D., Miclau, T., Colnot, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Site+specific+effects+of+zoledronic+acid+during+tibial+and+mandibular+fracture+repair%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Site specific effects of zoledronic acid during tibial and mandibular fracture repair.</a> PLoS One. 7 (2), e31771(2012).</li>
<li>Landry, P. S., Marino, A. A., Sadasivan, K. K., Albright, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+soft-tissue+trauma+on+the+early+periosteal+response+of+bone+to+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Trauma%22%5BJournal%5D)">Effect of soft-tissue trauma on the early periosteal response of bone to injury.</a> J Trauma. 48 (3), 479-483 (2000).</li>
<li>Colnot, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skeletal+cell+fate+decisions+within+periosteum+and+bone+marrow+during+bone+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22J+Bone+Miner+Res%22%5BJournal%5D)">Skeletal cell fate decisions within periosteum and bone marrow during bone regeneration.</a> J Bone Miner Res. 24 (2), 274-282 (2009).</li>
<li>Julien, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+contribution+of+skeletal+muscle+mesenchymal+progenitors+to+bone+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Direct contribution of skeletal muscle mesenchymal progenitors to bone repair.</a> Nat Commun. 12 (1), 2860(2021).</li>
<li>McGuire, C., Boudreau, C., Prabhu, N., Hong, P., Bezuhly, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Piezosurgery+versus+conventional+cutting+techniques+in+craniofacial+surgery%3A+A+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Plast+Reconstr+Surg%22%5BJournal%5D)">Piezosurgery versus conventional cutting techniques in craniofacial surgery: A systematic review and meta-analysis.</a> Plast Reconstr Surg. 149 (1), 183-195 (2022).</li>
<li>Wong, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chondrocyte-to-osteoblast+transformation+in+mandibular+fracture+repair%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">Chondrocyte-to-osteoblast transformation in mandibular fracture repair.</a> J Orthop Res. 39 (8), 1622-1632 (2021).</li>
<li>Vercellotti, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Technological+characteristics+and+clinical+indications+of+piezoelectric+bone+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Minerva+Stomatol%22%5BJournal%5D)">Technological characteristics and clinical indications of piezoelectric bone surgery.</a> Minerva Stomatol. 53, 207-214 (2004).</li>
<li>Wong, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chondrocyte-to-osteoblast+transformation+in+mandibular+fracture+repair%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">Chondrocyte-to-osteoblast transformation in mandibular fracture repair.</a> J Orthop Res. 39 (8), 1622-1632 (2021).</li>
<li>Tian, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HIF-1%CE%B1+regulates+osteoclast+activation+and+mediates+osteogenesis+during+mandibular+bone+repair+via+CT-1%5BTitle%5D)+AND+%22Oral+Dis%22%5BJournal%5D)">HIF-1α regulates osteoclast activation and mediates osteogenesis during mandibular bone repair via CT-1.</a> Oral Dis. 28 (2), 428-441 (2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Buprénorphine : Buprecare 0.3 mg/kg</td><td>Élévateur Animalcare</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Largeur OBWEGESER 6mm Longueur 17,5cm&nbsp ;</td><td>Collin Medical</td><td>HA 5905</td><td></td></tr><tr><td>Pince : Plaque de coussin MORIA 11 cm N&deg ; 5</td><td>MORIA</td><td>9906</td><td></td></tr><tr><td>Table chauffante Bioseblab 55 cm x 33 cm</td><td>Bioseblab</td><td>707</td><td></td></tr><tr><td>Porte-aiguille : Micro Halsey Porte-Aiguille - Métal&nbsp ;</td><td>LABODERM</td><td>21,100</td><td></td></tr><tr><td>Neo Clear&nbsp ;</td><td>Merck Millipore, Darmstadt, Allemagne</td><td>109843&nbsp ;</td><td></td></tr><tr><td>Ocry Gel Tube 10 g (lubrifiant pour les yeux)</td><td>tvm lab&nbsp ; &nbsp ;</td><td>3.70045E+12</td><td></td></tr><tr><td>Piezotome 2 ASS FINAL</td><td>ACTEON</td><td>X57402</td><td></td></tr><tr><td>Insert piézotome Piezocision PZ3</td><td>ACTEON</td><td>F87574</td><td></td></tr><tr><td>Ciseaux micro&nbsp ;</td><td>MORIA</td><td>MC52</td><td></td></tr><tr><td>Sutures en soie PERMA HAND SEIDE&nbsp ; / MERSILK</td><td>ETHICON</td><td>REF 18501G&nbsp ;</td><td></td></tr><tr><td>Ciseaux droits</td><td>MORIA</td><td>4877A</td><td></td></tr><tr><td>Vetflurane (isoflurane) 250 ml</td><td>VIRBAC</td><td>VET066 (Centravet)</td><td></td></tr></tbody></table>

technique moins invasive pour la fracture mandibulaire non stabilisée dans des modèles murins

Less-Invasive Technique for Non-stabilized Mandibular Fracture in Mouse Models

En ce qui concerne les interventions chirurgicales in vivo , pour réaliser de manière optimale cette procédure de fracture mandibulaire non stabilisée dans un modèle murin, un apprentissage et une formation spécifiques sont nécessaires.
Cette technique de fracture mandibulaire non stabilisée permet d’étudier le processus de réparation de l’os endochondral. Après l’euthanasie, des échantillons mandibulaires ont été prélevés dans du paraformaldéhyde à 4 % (24 h). Après une décalcification complète avec de l’EDTA pH 8, des sections ont été intégrées dans de la paraffine. Des coupes sagittales en série ont été réalisées, déparaffinées dans une solution de déparaffinisation, puis réhydratées avant la coloration Sirus Red/Alcian Blue, en utilisant les protocoles standard. Les images histologiques ont confirmé la formation d’un cal mou avec une matrice cartilagineuse (Figure 5). La cicatrisation osseuse est terminée 4 semaines après la fracture, comme le montrent les analyses micro-CT. Nous suggérons d’étudier le processus de réparation osseuse à différents points clés depuis le début de la formation des callosités (par exemple, tous les 7 jours (jours 7, 14, 21) ou plus selon l’objectif de l’étude) jusqu’à la fin de la cicatrisation osseuse (c’est-à-dire le jour 28), avec des analyses histomorphologiques et morphométriques micro-CT.
Sur la base d’une analyse rétrospective de cette procédure réalisée sur 58 souris de type sauvage (fond C57BL/6J), le taux de réussite du protocole est de 86,3 % et un taux d’exclusion de 13,7 %. L’exclusion était due à une mort spontanée prématurée en postopératoire précoce (3 %), à la décision d’euthanasie pour les souris présentant un score critique (1 % ; score &gt; 3 et/ou en cas de perte de poids &gt; 20 %), ou en cas de position anormale de l’ostéotomie, avec une division anormale de l’angle mandibulaire (5 %), ou lorsque la fracture était au niveau molaire (n=1/58). Une infection a été observée dans ce dernier cas, avec un dédoublement anormal de la fracture au niveau molaire (n= 1/58 ; Tableau 2).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66824/66824fig01.jpg"> 
Figure 1 : Image de l’approchecutanée sous-mandibulaire de la branche ascendante mandibulaire. Le bord inférieur de la mandibule est fracturé par un insert piézotome, permettant une perte osseuse minimale (flèche). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66824/66824fig01large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66824/66824fig02.jpg"> 
Figure 2 : Coloration de la mandibule de souris. Vue latérale d’une mandibule de souris de type sauvage de 6 semaines (colorée au rouge d’alizarine / bleu d’alcian) : 1. Condyle, 2. Processus coronoïde, 3. Encoche coronoïde, 4. Processus angulaire, 5. Bord postérieur de la ramus, 6. Bord basilaire (ou inférieur) de la mandibule. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66824/66824fig02large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66824/66824fig03.jpg"> 
Figure 3 : Radiographie du crâne de la souris. Radiographies latérales du crâne d’une souris sauvage de 6 semaines (vue sagittale) montrant l’aspect de la mandibule d’une souris non fracturée (à gauche) et l’aspect de la mandibule d’une souris fracturée et la direction de la fracture mandibulaire non stabilisée (flèches), du bord inférieur à l’encoche coronoïde, placée antérieurement au condyle (à droite). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66824/66824fig03large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66824/66824fig04.jpg"> 
Graphique 4. Radiographie du crâne de la souris dans des conditions sous-optimales. Radiographies latérales du crâne d’une souris sauvage de 6 semaines (vue sagittale) montrant une fracture anormale de l’angle mandibulaire (flèches). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66824/66824fig04large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66824/66824fig05.jpg"> 
Figure 5 : Résultats représentatifs. Résultats au 14e jour après la fracture chez une souris de type sauvage (C57BL/6J). Vues coronales 3D représentatives d’un scanner μCT reconstruit du site de la fracture mandibulaire, montrant le cal osseux (flèches blanches). Images représentatives du cartilage du cal (coloration Sirus Red/Alcian Blue) confirmant la présence d’un processus de réparation osseuse endochondrale. Abréviations : B = Os, C = Cartilage. Barre d’échelle : 200 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66824/66824fig05large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td></td>
			<td>0</td>
			<td>1</td>
			<td>2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aspect animal</td>
			<td>Normal</td>
			<td>Réduction des toilettes</td>
			<td>Poils ébouriffés, dos arqué</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Comportement</td>
			<td>Normal</td>
			<td>Hypomobilité</td>
			<td>Hypomobilité, réduction de l’apport alimentaire, perte de poids &gt; 10 %</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Signes cliniques</td>
			<td>Normal</td>
			<td>Inflammation cicatricielle</td>
			<td>Cicatrice ouverte, infection</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tableau 1. Échelle de score de bien-être postopératoire. 
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td></td>
			<td>n = 58 souris</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Taux de réussite</td>
			<td>86.3 %</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Taux d’exclusion :</td>
			<td>13.7 %</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mort spontanée prématurée</td>
			<td>3%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Note critique &lt; 3 et/ou perte de poids &gt; 20 %</td>
			<td>1%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fracture anormale fendue à l’angle mandibulaire</td>
			<td>5%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fracture anormale, au niveau des molaires</td>
			<td>1.7 %</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tableau 2. Taux de réussite et d’exclusion du protocole.

Technique moins invasive pour la fracture mandibulaire non stabilisée dans des modèles murins

Non-stabilized fractures can be made at mandibular sites in mice, thus making it possible to analyze bone repair using an endochondral ossification mode. ...

less-invasive-technique-for-non-stabilized-mandibular-fracture-mouse

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Biologie

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