Le protocole de l’unité d’AVC de souris avec notation neurologique standardisée pour les études translationnelles sur l’AVC de souris

Le modèle d’AVC de souris avec occlusion intravasculaire traduit bien les traitements actuels de thrombectomie et de reperfusion, cependant, il ne traduit pas les routines efficaces de l’unité clinique d’AVC. Ici, dans cette vidéo, nous démontrons notre concept éprouvé d’unité translationnelle d’AVC de souris et notre échelle d’évaluation neurologique standardisée. La première méthode de notre protocole fait référence à l’unité de course de souris.

Évaluez quotidiennement l’état clinique de l’animal et calculez son score de certification de risque en additionnant les points, comme indiqué ici. Adaptez la fréquence et l’intensité du soutien en fonction du RSS et de la phase post-AVC de l’animal. Pour un soutien nutritionnel actif, saisissez et tenez la souris doucement mais fermement à partir de la fourrure de son cou.

Stabilisez sa joue avec un majeur et faites glisser le majeur vers le nez de la souris contre sa joue et maintenez la position. Placez la pointe de la seringue entre ses dents vers l’intérieur de sa joue. Donnez environ 40 à 50 microlitres de gel alimentaire à chaque fois.

Remettez doucement la souris dans la cage et répétez l’alimentation après une à deux minutes. Ensuite, la composante focale de l’échelle expérimentale de l’AVC est démontrée. Commencez par le premier test pour la parésie des membres antérieurs.

Soulevez doucement la souris de la base de sa queue et examinez les membres antérieurs. Score de zéro pour l’extension symétrique vers l’avant et la mobilité des membres antérieurs. Marquez un pour une légère flexion et une réduction du mouvement du membre contralésionnel.

Marquez deux pour une légère flexion du membre contralésionnel. Score trois pour l’adhérence du membre contralésionnel au tronc et score quatre pour le membre plégique sans mouvement du membre ou du corps. Évaluez maintenant la parésie des membres postérieurs.

Continuez à tenir la souris par la base de sa queue comme pour le premier test. Examinez les membres postérieurs, marquez zéro pour l’extension symétrique et le mouvement des membres postérieurs. Score un pour l’asymétrie des membres postérieurs avec une diminution significative du mouvement et une position asymétrique du membre postérieur contralésionnel.

Continuez à tenir la souris par la base de sa queue pour évaluer la symétrie de son tronc. Score zéro pour une flexion symétrique normale du tronc des deux côtés et aucune flexion persistante du tronc sur 30 degrés par rapport à l’axe vertical. Marquez un pour une flexion marquée du tronc de plus de 30 degrés par rapport à l’axe vertical avec prédominance contralésionnelle.

Testez maintenant le comportement circulaire. Placez doucement la souris sur une surface plane et laissez-la bouger librement pendant au moins une minute. Observez son mouvement.

Score de zéro lorsque la souris se déplace rapidement et linéairement. Marquez un point pour la tendance à se tourner d’un côté mais pas en cercles serrés. Marquez deux points pour les cercles inconstants fermés d’un côté.

Marquez trois pour les cercles rapprochés constants d’un côté et quatre pour pivoter, se balancer ou ne pas bouger du tout. Testez maintenant la symétrie corporelle. Continuez à partir du test quatre et laissez la souris se déplacer librement sur la surface plane.

Observez son axe nez-queue. Score de zéro pour une posture normale, un tronc surélevé depuis le banc et une queue droite. Marquez un pour une légère asymétrie lorsque le corps se plie légèrement d’un côté et que la queue est pliée distalement.

Marquez deux pour une asymétrie modérée lorsque le corps se penche ou se plie du côté contralésionnel et que la queue est pliée proximalement. Marquez trois pour l’asymétrie proéminente lorsque le corps est plié, qu’un côté repose sur le banc et que la queue est clairement pliée. Et marquez quatre points pour l’asymétrie extrême lorsque le corps est plié et qu’un côté est constamment allongé sur le banc.

Maintenant, pour le test six, continuez à partir du test cinq et observez sa démarche. Vérifiez les déficits moteurs de la marche. Marquez zéro pour une démarche normale lorsque les membres sont flexibles, symétriques et rapides.

Marquez-en un pour une démarche raide, inflexible et plus lente sans boiter. Marquez deux points pour une boiterie claire avec des mouvements asymétriques. Marquez trois points pour trembler, dériver ou tomber après une légère poussée.

Marquez quatre points pour l’absence de marche spontanée. Maintenant, testez les cercles obligatoires. Tenez la souris par la base de sa queue et élevez-la légèrement de la surface pour qu’elle marche sur ses membres antérieurs.

Observez son mouvement. Score de zéro pour un mouvement linéaire normal. Marquez un point pour la tendance à se tourner d’un côté.

Marquez deux points lorsque la souris tourne d’un côté en cercles fermés complets. Marquez trois points lorsqu’il pivote et que son mouvement est lent. Et marquez quatre points lorsque la souris n’avance pas et que la partie avant du tronc repose sur le banc.

Nous décrivons ici comment exécuter le test de posture. Placez la souris sur votre paume comme indiqué dans la vidéo et balancez-la doucement d’avant en arrière. Notez comment la souris conserve sa position verticale et s’équilibre contre les forces latérales, son corps n’entre pas en contact avec la paume ou les doigts.

Les images des différents scores de ce test ne sont pas utiles car son score repose fortement sur la détection de mouvements rapides et subtils de la souris qui sont ressentis par la main et les repères visuels ne sont pas suffisants pour le score. Nous décrivons chaque score sous forme de texte pour votre commodité. Évaluez maintenant le placement des membres antérieurs.

Tenez la souris par le dos ou par la base de sa queue et dirigez-la vers le faisceau comme cible à atteindre. Observez la portée symétrique. Ensuite, une fois qu’il saisit le faisceau, retirez-le doucement et observez la libération symétrique des membres antérieurs.

Score de zéro pour la portée et la libération symétriques. Marquez-en un pour toute asymétrie. Testez maintenant le déficit sensorimoteur des membres antérieurs.

Tenez la souris par le dos comme démontré et stimulez successivement les pattes avant avec une pointe fine. Marquez zéro pour les mouvements de préhension rapides normaux. Marquez un point pour la préhension absente ou clairement retardée de la patte avant contralésionnelle.

Ensuite, testez sa marche sur le faisceau. Placez la souris sur la poutre avec son axe nez-queue parallèle à celle-ci et laissez-la se tenir en équilibre ou marcher sur la poutre. Observez l’équilibre, la parésie des membres et les chutes.

Gardez toujours votre main sous l’animal au cas où il tomberait. Score zéro lorsque la souris se balance avec une posture stable et se dirige vers un côté de la poutre. Marquez-en un lorsqu’il saisit le côté de la poutre et ne marche pas dessus.

Sachez qu’il peut avoir besoin d’un certain temps pour s’équilibrer sur la poutre. Marquez deux points lorsqu’un membre tombe de la poutre. Marquez trois points lorsque deux membres tombent de la poutre.

Marquez quatre points lorsque la souris tente de se tenir en équilibre sur le faisceau mais tombe au bout de 40 secondes. N’oubliez pas que dans ce test, la souris doit être observée pendant 60 secondes maximum. Marquez cinq lorsqu’il y a une chute qui se produit entre 20 et 40 secondes.

Et marquez six points lorsqu’il ne tente pas d’équilibrer ou de s’accrocher à la poutre. Évaluez la sensation des moustaches. Placez la souris sur un banc ouvert et stimulez avec succès ses moustaches avec un coton-tige fin à longue pointe.

En venant d’un angle aveugle, observez sa réponse de rotation. Score de zéro pour une rotation rapide normale lors d’une stimulation bilatérale. Marquez un point pour la réponse contralésionnelle plus lente.

Évaluez deux pour l’absence de réponse contralésionnelle. Score 3 pour l’absence de réponse contralésionnelle et la réponse ipsilesionnelle plus lente. Et obtenez un score de quatre pour la réponse bilatérale absente.

Testez la capacité d’escalade. Placez la souris au centre d’une surface recouverte de caoutchouc à un angle de 45 degrés et observez sa réponse pendant qu’elle essaie de grimper. Score de zéro lorsque la souris monte rapidement au sommet de la surface.

Marquez-en un lorsqu’il grimpe avec une tension et une faiblesse des membres est présente. Marquez deux points lorsqu’il s’accroche à la pente et ne glisse ni ne grimpe. Marquez trois points lorsqu’il glisse sur la pente malgré les efforts déployés pour éviter de tomber.

Et marquez quatre points lorsqu’il glisse sans effort pour éviter la chute. Le protocole de l’unité d’AVC de souris a soutenu de manière reproductible la survie des souris après l’occlusion filamenteuse de l’artère cérébrale moyenne, en maintenant un taux de survie de 80 %. En complément de l’ESS focal, vous pouvez utiliser un test à échelle pour détecter et quantifier la faiblesse des membres avant et postérieurs jusqu’à six mois.